Foxp3/轉(zhuǎn)錄因子染色固定破膜試劑盒是一款經(jīng)過優(yōu)化的專門針對轉(zhuǎn)錄因子、核蛋白（例如Foxp3和STAT3）以及細胞因子和趨化因子等流式抗體進行細胞內(nèi)抗原染色時所用的固定、破膜試劑。

Foxp3/轉(zhuǎn)錄因子染色固定破膜試劑盒操作方法：

1. 取100 μL細胞/管（約1×106個細胞）于流式管內(nèi)。

2. [可選步驟] 根據(jù)說明書進行Fixable Viability Dye（死活細胞鑒定染料）染色。

3. 按照抗體說明書加熒光標記抗體染細胞表面Marker。

4. 孵育完成后加入1mL細胞染色緩沖液，300g離心5min，棄上清，再加入100uL細胞染色緩沖液重懸細胞。

5. 加入1 mL 1× Fixation Working Solution，渦旋混勻，4℃反應(yīng)30min，反應(yīng)完后，600g離心5min，棄上清。

6. 加入2 mL 1× Permeabilization Working Solution，渦旋混勻，600g離心5min，棄上清。

7. 重復(fù)步驟6。

8. 加入100μL 1× Permeabilization Working Solution重懸細胞。

9. [可選步驟] 加2µL 2％正常小鼠/大鼠血清于細胞懸液中封閉Fc受體，室溫下孵育15min。

10. 按照抗體使用說明書加熒光標記的核染色抗體，混勻后室溫避光孵育30min。

11. 加入2mL 1× Permeabilization Working Solution，600g離心5min，棄上清。

12. 加入適量細胞染色緩沖液重懸細胞，即可上機檢測。

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