蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Gamma-Secretase Activating Protein (gSAP)

PION; Pigeon Homolog

型號：GOY-01D2810

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：高爾基體

預(yù)測分子量：28kDa

實(shí)際分子量：28kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu646~Leu858 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Exoribonuclease 1 (ERI1)產(chǎn)品名稱：糖核酸外切酶1(ERI1)重組蛋白物種：Human，人THEX1; 3'HEXO; 3'-5' exonuclease ERI1; Histone mRNA 3'-end-specific exoribonuclease; Enhanced RNAi Three Prime mRNA Exonuclease Homolog 1

Recombinant Laceroxidase (LPO)產(chǎn)品名稱：乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白物種：Goat，山羊SPO; Salivary peroxidase

Recombinant Carboxypeptidase B1, Tissue (CPB1)產(chǎn)品名稱：羧肽酶B1(CPB1)重組蛋白物種：Human，人CPB; PCPB; PASP; Pancreas-specific protein

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

DAB Kit/DAB顯色試劑盒20m、60ml國產(chǎn)

雌激素-d4 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 Estrone-d4

 小鼠層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）

克林 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 Clindamycin

 透明質(zhì)酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

鹽克林棕櫚酯 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 Clindamycin palmitate HCL

 AAV-293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

克林鹽鹽一水合物 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 Clindamycin Hydrochloride Monohydrate

 3.5% NaC1糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

亞砜克林 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 Clindamycin Sulfoxide

 人神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

R(+)-維拉帕米一鹽鹽水合物 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 R(+)-Verapamil monohydrochloride hydrate

 OF發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

(S)-(-)-維拉帕米鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 (S)-(-)-Verapamil Hydrochloride

 人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝

去甲維拉帕米鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 Norverapamil, Hydrochloride

γ-分泌激活蛋白(gSAP)重組蛋白小鼠2 ug pYCPlac22-EGFP pYCPlac22-EGFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人二羥基賴正己(DHLNL)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

改良GAM瓊脂抑菌劑  1ml*5

2 ug pACT pACT 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

小鼠DNA(胞-5)甲基轉(zhuǎn)移3B(DNMT3B)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

牛心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

抗生素檢定培養(yǎng)基 32 號  250g

2 ug pAdTrack-CMV pAdTrack-CMV 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

魚促甲狀腺素(TSH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

100mL TE Buffer,50X,pH8.0 TE Buffer,50X,pH8.0 常溫保存

5mL 乳腺上皮細(xì)胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存