產(chǎn)品簡介：

山羊痘是由山羊痘病毒（Goat Pox Virus）引起山羊急性熱性接觸性傳染病，世界動物衛(wèi)生組織將其列為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。病羊是    主要的傳染源，主要通過呼吸道感染，也可以通過損傷的皮膚和粘膜入侵機體。飼養(yǎng)    和管理人員，以及被污染的飼料、墊草、用具、皮毛產(chǎn)品和體外寄生蟲等均可稱為傳播媒介。在自然條件下，山羊痘病毒只能使山羊發(fā)病。本病傳播快、發(fā)病率高、不同品種、性別和年齡的羊均可感染。本病一年四季均可發(fā)生。

本試劑盒適用于檢測山羊皮膚病變組織、淋巴結、水泡液等樣本中的山羊痘病毒，用于山羊痘病毒感染的輔助診斷。

產(chǎn)品特點：

一、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量，讓您的檢測結果更可信。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的山羊痘病毒核酸，不放過任何潛在的感染風險。

三、便捷操作

綜合各項指標特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證，適用于山羊皮膚病變組織、淋巴結、水泡液等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個性化定制服務

專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案。

六、豐富的產(chǎn)品線

除了山羊痘病毒(GTPV)熒光PCR檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR，具有快速、準確、靈敏等優(yōu)點。

適用儀器

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標本采集

山羊皮膚病變組織、淋巴結 5g；水泡液取 1mL。

保存和運輸

上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

組織：稱取樣品約 1g，手術-剪剪碎，于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100 μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；水泡液直接取 100μL 置于 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2DNA 提取

1)對上述處理好的標本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒溫處理 10min，13,000 rpm 離心 5min，取上清液轉移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

2)DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA-提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2.試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：

試劑GTPV 反應液酶液

用量（樣本數(shù)為 N）20μL1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中，21uL/管。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內；

4.2設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25μL；

熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye） NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光，選擇 None 即可。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號

11 cycle95℃10min否

240 cycles94℃15sec否

55℃30sec是

5.結果分析判定

5.1結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時，根據(jù)分析后圖像調節(jié)Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內調節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照)，重新分析結果。

5.2結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。

可疑：檢測通道 Ct 值>35.0，且出現(xiàn)明顯擴增曲線的樣本建議重復試驗，重復試驗結果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和明顯擴增曲線者為陽性，否則為陰性。

陰性：樣本檢測結果無 Ct 值且無明顯的擴增曲線。

6.檢測方法的局限性

6.1樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關；

6.2樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果；

6.3陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏，會導致假陽性結果；

6.4病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果；

6.5不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果；

6.6試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定   量檢測不準確的結果；

6.7本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

7.質控標準

陰性質控品：無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。

9.本產(chǎn)品僅供科研。

選擇我們的山羊痘病毒(GTPV)熒光PCR檢測試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！