產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品是經(jīng)過本公司柱式RNA 純化試劑盒純化的分子生物學級別的酵母tRNA 溶液，濃度為 5 mg/mL，不含蛋白質和 DNA 污染，OD260/OD280 在 1.9 左右，可直接用作微量 RNA 和 DNA 提取，RNA 和 DNA 片段回收的助沉劑，也可以用作原位雜交、Northern 雜交的封堵劑，對于探針為 RNA 的雜交試驗尤其適用。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份規(guī)格包裝

精提酵母tRNA 溶液（5 mg/mL）1.5 mL1.5 mL 白蓋管

使用手冊1 份無

保存和運輸

精提酵母tRNA溶液，5 mg/mL低溫運輸，-20℃保存，有效期一年

自備試劑

無水乙醇，75%乙醇

使用方法：

一：本產(chǎn)品作核酸助沉劑使用

注：由于 tRNA 是多聚核苷酸激酶和末端轉移酶的底物，因此如果回收的 DNA 或RNA 要用于此類反應，就不能使用 tRNA 作為助沉劑，需要改用糖原或聚丙烯酰胺（需要從本公司另購）。如果回收的 RNA 或 DNA 要用于 RT-PCR 和 PCR 擴增， 最好先確認所用引物不會跟酵母 tRNA 結合，否則可能會產(chǎn)生非特異擴增。

1.在核酸(DNA 或/和 RNA)溶液中，加入適當種類和濃度的鹽離子，鹽離子不同其終濃度也不相同，具體如下：

鹽終濃度

NH4OAc (醋酸銨）0.5 M

NaCl (氯化鈉)0.25 M

NaOAc (醋酸鈉）0.3 M

2.加入本產(chǎn)品使其終濃度為 20 ug/mL，混合均勻。

3.加入兩倍體積的自備無水乙醇，混合均勻。

4.冰上放置 15 分鐘。

5. 12000-15000 × g 離心 15 分鐘以上，小心移棄上清。

6. 用 1 mL 75%乙醇洗一次（加入 1 mL 75%乙醇，振蕩混勻后 12000-15000

× g 離心 5 分鐘，小心移棄上清）。

7.短暫離心數(shù)秒，小心移棄殘留液體。

8.將沉淀溶于適當緩沖液中待用。

二：本作為雜交封堵劑

本產(chǎn)品可以作為原位雜交液、Northern 雜交液和 RNA 斑點雜交液的封堵劑， 也可以作為 Southern 雜交液和 DNA 斑點雜交液的封堵劑，但不適于作為菌斑雜交的封堵劑，其在雜交液或預雜交液中的終濃度為 100ug/mL。如果使用 RNA 探針，最好使用 tRNA 精提液做封堵劑，以保護 RNA 探針。

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