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北京諾博萊德科技有限公司
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葡萄糖氧化酶試劑盒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)BC6009

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地北京市

更新時(shí)間:2025-03-29 09:03:12瀏覽次數(shù):91次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/24S
貨號(hào) BC6009 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸
GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生 H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一
葡萄糖氧化酶試劑盒

葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24

葡萄糖氧化酶試劑盒

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:

GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生 H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一

測定原理:

GOD 催化產(chǎn)生H2O2,過氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替bi林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在 500 nm有特征吸收峰,顏色深淺與 GOD 活性成線性關(guān)系。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱

BC6009-50T/24S

Storage

提取液:液體

60ml

4℃

緩沖液:液體

50ml

4℃

試劑一:粉劑

1   瓶

-20℃

試劑二:粉劑

1   瓶

-20℃

說明書

一份

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 20ml 緩沖液充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保存一個(gè)月;

試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 20ml 緩沖液充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保存一個(gè)月。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

樣品測定的準(zhǔn)備:

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 500nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 試劑一和試劑二的配制:參見試劑的組成和配制。

3、煮沸樣本的準(zhǔn)備:取 500μl 樣本至新的EP 管中,95℃水浴 10min,冷卻至室溫后,8000g 4℃離心10min,取上清作為對照管的煮沸樣本待測。

4、測定操作表

試劑(μl)

對照管

測定管

樣本


250

煮沸樣本

250


試劑一

375

375

試劑二

375

375

混勻,35'C 保溫 15min 后,于 500nm 波長處讀取吸光度。ΔA=A 測定管-A 對照管。每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對照管。

GOD 活力單位的計(jì)算:

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 2.8348x - 0.0169;x 為H2O2 標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/ml),y 為ΔA。

1、血清(漿)GOD 活力的計(jì)算

單位定義:每ml 血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 為一個(gè)酶活力單位。

GOD(nmol/min/ml)= (ΔA+0.0169) ÷2.8348×V 反總÷V 樣÷T×1000=58.8×(ΔA+0.0169)

2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織 GOD 活力的計(jì)算

按蛋白濃度計(jì)算

單位定義:每mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 為一個(gè)酶活力單位。

GOD(nmol/min/mg prot)=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V 反總÷(V 樣×Cpr) ×1000÷T

=58.8×(ΔA+0.0169)÷Cpr

按樣本鮮重計(jì)算

單位定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 為一個(gè)酶活力單位。

GOD(nmol/min/g 鮮重)=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總) ×1000÷T

=58.8×(ΔA+0.0169)÷W

按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 為一個(gè)酶活力單位。

GOD(nmol/min/104 cell)=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總) ×1000÷T

=0.118×(ΔA+0.0169)

V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.625ml; V 樣:加入樣本體積,0.25ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml; T:反應(yīng)時(shí)間,15 min; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。 

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

NADPH (nmol/104 cell)=[(△A -0.0259)÷1.2396×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.003× (△A -0.0259)

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.05ml;V2:加入提取液體積,2ml;V3:加入血清(漿)體積:0.1ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500 萬。

葡萄糖氧化酶試劑盒

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