Western抗體洗脫液中文版說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Western抗體洗脫液(Stripping buffer)又稱(chēng)膜再生液或Western一抗二抗去除液，用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后，有時(shí)還需要檢測(cè)GAPDH、β-actin等表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定的管家蛋白或其它蛋白作為參照。Stripping buffer可以洗脫一抗二抗，非常方便地重新利用使用過(guò)的膜，檢測(cè)其它蛋白。 Stripping buffer多次重復(fù)使用同一張膜，會(huì)導(dǎo)致蛋白信號(hào)的減弱不宜重復(fù)利用膜，一般可以利用2～3次。

MBWestern Stripping buffer 主要依靠堿性來(lái)解除一抗二抗的結(jié)合，同時(shí)又不會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失， 適用于Western化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后的蛋白膜的重復(fù)利用，尤其適用于PVDF膜，其次為硝酸纖維素膜。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、 蒸餾水

2、 搖床

3、 (可選)濾紙

4、 Western封閉液

操作步驟(僅供參考)：

1、在膜完成Western化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后，蒸餾水中漂洗5min。

2、棄蒸餾水，加入Western Stripping buffer，*覆蓋住膜。

3、搖床上漂洗5min。

4、棄液，盡量把Western Stripping buffer去除干凈，必要情況下，可以用濾紙吸干。

5、加入蒸餾水振蕩漂洗2～3次，每次漂洗3～5min。

6、入封閉液進(jìn)行封閉后(推薦酪氨酸或脫脂奶粉作為封閉液)，進(jìn)行Western后續(xù)操作。

注意事項(xiàng)：

使用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體時(shí)，封閉液必須使用5%脫脂奶粉配制。使用堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體時(shí)，封閉液必須使用酪蛋白(casein)配制。

Western Stripping buffer(堿性)特別適用于PVDF膜的再生，硝酸纖維素膜的再生效果不如PVDF膜。

Western Stripping buffer(堿性)適用于ECL等類(lèi)似的化學(xué)發(fā)光液的檢測(cè)后的一抗二抗洗脫。非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。

Western Stripping buffer(堿性)有輕微腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期： 12個(gè)月有效。