細胞轉(zhuǎn)染是外源基因進入真核細胞的一種重要方法。這些外源DNA或RNA通過轉(zhuǎn)染試劑的包裝輔助才能順利進入細胞,發(fā)揮相應的作用,進而研究其細胞功能及相應的影響。廣泛應用于基因功能研究、調(diào)控基因表達、癌癥、疾病模型相關(guān)研究和重組蛋白研究等生物學試驗。那么你知道細胞轉(zhuǎn)染試劑的作用機制是什么嗎?讓我們一起來看看吧!
細胞轉(zhuǎn)染試劑是一種用于將外源核酸(如DNA、RNA)傳遞到細胞內(nèi)的物質(zhì)。其作用機制可以概述為細胞膜穿透機制和核酸釋放機制。
一、細胞膜穿透機制
細胞轉(zhuǎn)染試劑可以通過不同的機制穿透細胞膜,從而將外源核酸傳遞到細胞內(nèi)。其中常見的機制包括:
1.離子共價結(jié)合:轉(zhuǎn)染試劑可以與DNA或RNA形成帶電復合物,利用復合物與細胞膜上的負電荷之間的吸引作用來穿過細胞膜。
2.脂質(zhì)體介導:某些轉(zhuǎn)染試劑是由脂質(zhì)體組成的,脂質(zhì)體與細胞膜融合后將載體內(nèi)的核酸釋放到細胞內(nèi)。
3.蛋白質(zhì)介導:一些轉(zhuǎn)染試劑可以與核酸形成蛋白質(zhì)/核酸復合物,利用細胞膜上的蛋白質(zhì)受體介導轉(zhuǎn)運。
二、核酸釋放機制
一旦轉(zhuǎn)染試劑穿透了細胞膜,核酸需要被釋放到細胞質(zhì)中,以發(fā)揮其功能。
1.破壞性釋放:某些轉(zhuǎn)染試劑通過破碎或破壞載體來釋放核酸到細胞質(zhì)中。
2.溫和釋放:溫和的轉(zhuǎn)染試劑可以保護載體,通過一些不同的刺激來使核酸滲透出轉(zhuǎn)染試劑,進入細胞質(zhì)。
3.胞吞作用:某些轉(zhuǎn)染試劑可以促進細胞膜的內(nèi)胞吞作用,將溶液及其中的核酸引入細胞質(zhì)。
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