低壓超高效液相色譜儀是液相色譜技術(shù)的重要?jiǎng)?chuàng)新,通過優(yōu)化壓力體系與分離機(jī)制,在保持超高效分離性能的同時(shí),顯著提升了儀器的耐用性、操作便捷性和應(yīng)用靈活性,成為現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)室的關(guān)鍵工具。
傳統(tǒng)超高效液相色譜儀(UPLC)依賴超高壓系統(tǒng)(通常≥15,000 psi)驅(qū)動(dòng)亞2μm填料色譜柱,實(shí)現(xiàn)高效分離。而低壓超高效液相色譜儀通過改進(jìn)色譜柱填料和流路設(shè)計(jì),在較低壓力(如62 MPa以下)下即可達(dá)到類似分離效果。例如,福立LC5190采用新型分離材料,結(jié)合低壓預(yù)混合技術(shù),在常規(guī)壓力范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)高分辨率分離,同時(shí)降低泵系統(tǒng)壓力脈動(dòng),延長儀器壽命。
低壓超高效液相色譜儀的組成主要包括以下幾個(gè)部分:
1、輸液系統(tǒng)
高壓輸液泵:是系統(tǒng)的核心部件,負(fù)責(zé)將流動(dòng)相以高壓穩(wěn)定地輸送至色譜柱。需具備高輸出壓力(通常耐壓可達(dá)數(shù)百千克/平方厘米)、流量精度高、耐腐蝕等特點(diǎn),常見類型為往復(fù)柱塞泵。
梯度洗脫裝置:用于實(shí)現(xiàn)流動(dòng)相組成的連續(xù)變化,提高分離效果。低壓梯度通過泵前的電磁比例閥控制不同溶劑的混合比例,僅需一個(gè)高壓泵;高壓梯度則采用多個(gè)高壓泵分別輸送溶劑至泵后混合器,混合更精準(zhǔn)且易自動(dòng)化。
在線脫氣機(jī):去除流動(dòng)相中的溶解氣體(如氧氣),防止氣泡干擾檢測(cè)器或造成柱效下降。常用方法包括真空脫氣、惰性氣體吹掃等。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)
自動(dòng)進(jìn)樣器:實(shí)現(xiàn)高通量、高精度的樣品注入,減少人工誤差。支持程序控制進(jìn)樣量和順序,提升分析效率。
壓力輔助進(jìn)樣技術(shù):通過壓力快速注入樣品,減少擴(kuò)散和交叉污染,適用于微量分析。
3、分離系統(tǒng)
色譜柱:UHPLC的核心組件,內(nèi)填亞2μm甚至更小粒徑的固定相填料(如1.7μm),顯著提升分離效率。柱長通常為10-30cm,內(nèi)徑2-5mm,材質(zhì)多為不銹鋼或耐壓聚合物。
保護(hù)柱:安裝在色譜柱前,填充較大粒徑填料(如5-10μm),用于吸附樣品中的雜質(zhì)顆粒,延長主柱壽命。
柱溫控制器:精確控制色譜柱溫度,避免溫度波動(dòng)影響分離效果。
4、檢測(cè)系統(tǒng)
檢測(cè)器:將分離后的組分濃度轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。常用類型包括紫外-可見吸收檢測(cè)器、二極管陣列檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):由計(jì)算機(jī)及軟件組成,負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)采集、處理、存儲(chǔ)和分析報(bào)告生成,支持自動(dòng)化控制及定量定性分析。
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