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蛋白提取相關(guān)知識(shí)介紹2025/05/30: 蛋白提取相關(guān)知識(shí)介紹蛋白作為生命活動(dòng)的基本功能單位，是經(jīng)典的生物標(biāo)志物，常用于蛋白質(zhì)免疫印跡（WesternBlot，WB）、蛋白質(zhì)免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）、染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）、聚丙烯酰胺凝膠電泳（polyacrylamidegelelectrophoresis，PAGE）實(shí)驗(yàn)等。為了實(shí)現(xiàn)我們的研究目的，需要將蛋白從細(xì)胞組織中提取分離出來，這一過程即為蛋白提取，提取出高質(zhì)量的蛋白是后續(xù)

培養(yǎng)基配方2025/05/30: 培養(yǎng)基配方常用培養(yǎng)基（1）血液瓊脂（血平板）：【配方一】成分：普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂90rot；脫纖維羊血(或兔血)10ml。制法：將已滅菌的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂(pH7.6加熱融化；冷卻至50℃左右，以無菌手續(xù)加入10ml脫纖維羊血（臨用前置37℃水浴箱預(yù)溫），輕輕搖勻（勿使有氣泡），傾注于滅菌平皿內(nèi)，每一平皿(直徑9cm)13～15ml或分裝試管，制成斜面；待凝固后，抽樣置37℃培養(yǎng)18～24h，觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng)；如無菌生長(zhǎng)，置4℃?zhèn)溆谩！九浞蕉砍煞郑喝飧鄿?pH7.8)800ml；硫酸鎂(493g/L)8

WB實(shí)驗(yàn)注意細(xì)節(jié)2025/05/30: WB實(shí)驗(yàn)注意細(xì)節(jié)1.細(xì)胞樣本，收細(xì)胞時(shí)，PBS預(yù)冷。2.組織樣本在取材時(shí)離體組織應(yīng)盡快凍存，可以置于液氮中迅速冷凍，使用組織勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿時(shí)，一次研磨時(shí)間不宜過長(zhǎng)，40s左右即可，如研磨不充分，可再次研磨。3.PMSF應(yīng)注意搖勻至無結(jié)晶時(shí)方可使用。4.冰上裂解時(shí)，可以晃動(dòng)以使裂解充分。5.裂解后的樣本盡量分裝保存，避免反復(fù)凍融，盡快變性使用。6.BCA定量時(shí)盡量不使用96孔板最邊緣一圈（由于有些儀器邊緣效應(yīng)）。7.樣本可以根據(jù)具體情況稀釋合適的倍數(shù)再進(jìn)行定量，以免超出標(biāo)曲范圍。8.BCA定量時(shí)，

人原代膽囊成纖維細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/28: 人原代膽囊成纖維細(xì)胞HumanCholecystokinoblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d025價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造，有濃縮和儲(chǔ)存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。其中，外膜層主要由成纖維細(xì)胞構(gòu)成。細(xì)胞特性1)細(xì)胞來源于人正常膽囊組織。2)細(xì)胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性。3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：

人原代肝Kupffer細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/28: 人原代肝Kupffer細(xì)胞HumanKupffercells貨號(hào)：HUM-YJ-d019價(jià)格：8650.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞主要包括肝竇狀內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞和肝星狀細(xì)胞。肝Kupffer細(xì)胞指位于肝竇內(nèi)表面的吞噬細(xì)胞，位于肝血竇腔內(nèi)，具有變形運(yùn)動(dòng)和活躍的吞噬功能，還具有處理和傳遞抗原、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答等作用，能夠清除血液中的外來抗原、抗原－抗體復(fù)合物和細(xì)胞碎片等物質(zhì)。肝Kupffer細(xì)胞是全身單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成部分,也是肝臟防御系統(tǒng)主要成員,在全身

人原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/28: 人原代肝竇內(nèi)皮細(xì)胞HumanHepaticSinusoidalEndothelialCells貨號(hào)：HUM-YJ-d018價(jià)格：8650.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述肝竇內(nèi)皮細(xì)胞是肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中數(shù)目最多的細(xì)胞，約占肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的70%，在表型、功能上與普通毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有較大差異。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞之間缺乏細(xì)胞間連接，細(xì)胞下基底膜物質(zhì)很少，因此竇內(nèi)皮通透性較高，有利于調(diào)節(jié)物質(zhì)交換。不同于肝細(xì)胞的自我復(fù)制，肝再生時(shí)新生LSECs主要來自肝內(nèi)外其他細(xì)胞成分的分化替代，不少研究證實(shí)了肝再生時(shí)LSECs

人原代肝星狀細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/28: 人原代肝星狀細(xì)胞HumanHepaticStellateCells貨號(hào)：HUM-YJ-d017價(jià)格：8650.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述肝星狀細(xì)胞位于Disse間隙內(nèi)，緊貼著肝竇內(nèi)皮細(xì)胞和肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。其形態(tài)不規(guī)則，胞體呈圓形或不規(guī)則形，常伸出數(shù)個(gè)星狀胞突包繞著肝血竇。正常情況下肝星狀細(xì)胞表現(xiàn)為富含維生素A脂滴的靜止型，其功能主要有：代謝和貯存維生素A、儲(chǔ)存脂肪、合成和分泌膠原及糖蛋白、蛋白多糖等基質(zhì)成分、合成基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制劑、表達(dá)細(xì)胞因子及受體、參與肝竇血流調(diào)節(jié)。肝星狀細(xì)胞是細(xì)胞外基

人I 型膠原 N-末端肽交聯(lián)（UNTX）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明書2025/05/27: 本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷人（Human）I型膠原N-末端肽交聯(lián)（UNTX）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被I型膠原N-末端肽交聯(lián)（UNTX）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的I型膠原N-末端肽交聯(lián)（UNTX）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光

人原代肝外膽管上皮細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/26: 人原代肝外膽管上皮細(xì)胞HumanExtrahepaticBiliaryDuctEpithelialCells貨號(hào)：HUM-YJ-d015價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述膽管，輸送膽汁的管道。由肝分泌的膽汁，經(jīng)肝左、右管、肝總管、膽囊管進(jìn)入膽囊貯存，肝內(nèi)膽管的部分包括：左、右肝管；左內(nèi)葉、左外葉、右前葉、右后葉膽管；各肝段膽管；小葉間膽管；毛細(xì)膽管。常見的膽管病變?nèi)缒懙篱]塞、原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等，都是以膽管上皮為病變靶位，因此研究膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性和病理變化有重要意義。在這

人原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/26: 人原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞ColonFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d012價(jià)格：7190.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。在結(jié)腸腫瘤微環(huán)境中，成纖維細(xì)胞（NFs）與癌細(xì)胞相接處，轉(zhuǎn)化為癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs），這些細(xì)胞在上皮腫瘤的惡性轉(zhuǎn)變中發(fā)揮著

人原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/26: 人原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞ColonSmoothMuscleCells貨號(hào)：HUM-YJ-d011價(jià)格：7060.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞主要分布于粘膜肌層和肌層；結(jié)腸運(yùn)動(dòng)少而緩慢，對(duì)刺激的反應(yīng)也較遲緩。細(xì)胞特性1)細(xì)胞來源于人正常結(jié)腸組織。2)細(xì)胞

人原代胃黏膜上皮細(xì)胞產(chǎn)品介紹2025/05/26: 人原代胃黏膜上皮細(xì)胞GastricMucosalEpithelialCells,胃上皮細(xì)胞胃粘膜上皮細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-d004價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經(jīng)、血管和淋巴管的分布。其中胃粘膜上皮處于粘膜層的最內(nèi)層，為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶對(duì)胃黏膜的損害。胃液主要是由胃蛋白酶和鹽酸所組成，胃液酸性很強(qiáng)，胃黏膜上皮覆蓋著一層0.25-0.5mm的不溶性凝膠

人原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/23: 人原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞ColonicMucosalEpithelialCells,結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-d010價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。其中上皮細(xì)胞主要位于粘膜層的上皮層，為單層柱狀上皮,含較多的杯狀細(xì)胞。結(jié)腸粘膜內(nèi)有杯狀細(xì)胞,

人原代小腸粘膜上皮細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/23: 人原代小腸粘膜上皮細(xì)胞SmallIntestinalMucosalEpithelialCells,小腸黏膜上皮細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-d007價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。一般根據(jù)形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化將小腸分為三段，分別為十二指腸，空腸和回腸。小腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層，由外向內(nèi)依次為：漿膜層，平滑肌層，粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層：靠近粘膜下層的是一層平滑肌，稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織，又稱為固有層。最

人原代胃成纖維細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/23: 人原代胃成纖維細(xì)胞GastricFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d006價(jià)格：6950.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經(jīng)、血管和淋巴管的分布。其中成纖維細(xì)胞主要分布于粘膜層中的固有層、黏膜下層和外膜層。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中最常見的細(xì)胞，電鏡下，成纖維細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和高爾基復(fù)合體，表明其具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。己知成纖維細(xì)胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細(xì)胞外基質(zhì)，在

人原代胃平滑肌細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/23: 人原代胃平滑肌細(xì)胞GastricSmoothMuscleCells貨號(hào)：HUM-YJ-d005價(jià)格：6930.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經(jīng)、血管和淋巴管的分布。其中平滑肌主要位于肌層中，胃的肌層發(fā)達(dá)，由內(nèi)斜、中環(huán)和外縱三層平滑肌構(gòu)成。其中，中層環(huán)形平滑肌在幽門處增厚，形成幽門括約肌，具有節(jié)制胃內(nèi)容物排出的作用。胃動(dòng)力性疾病的發(fā)生與平滑肌的收縮性的改變密切相關(guān)，現(xiàn)已有充分證據(jù)說明，Cajal間質(zhì)細(xì)胞是胃部運(yùn)動(dòng)的起搏細(xì)胞，

WB實(shí)驗(yàn)過程中常見條帶問題分析解決方法2025/05/23: WB實(shí)驗(yàn)過程中常見條帶問題分析解決方法一、除了目的蛋白條帶外有很多條雜帶1.一抗抗體差異，部分不常見的分子抗體是多克隆的，雜帶比較多。2.一抗4℃孵育過夜時(shí)，如果一抗的孵育濃度較高，也容易出現(xiàn)雜帶。一般可按抗體說明書來設(shè)定稀釋濃度。3.二抗孵育時(shí)間過長(zhǎng)或者二抗?jié)舛冗^高也會(huì)導(dǎo)致雜帶增多。一般二抗規(guī)定的孵育時(shí)間為室溫1-2小時(shí)，一般1小時(shí)足矣，時(shí)間過長(zhǎng)易出現(xiàn)非特異性條帶；二抗一般1：10000稀釋。4.一抗與二抗之間TBST洗膜時(shí)間較短，次數(shù)較少，常規(guī)應(yīng)該洗三次，一次10min。5.在封閉，或是一抗

Western blot 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2025/05/21: Westernblot實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.配膠時(shí)，建議先加水，再加Tris-HCL緩沖液，并且每加一種液體就混勻膠液。加入的TEMED有毒，務(wù)必在通風(fēng)櫥中操作，并且加入后立即混勻、灌膠。丙烯酰胺未聚合的單體有神經(jīng)毒性，能夠經(jīng)皮膚吸收，需戴手套操作。2.AP作為催化劑能夠提供氧自由基促使丙烯酰胺單體聚合，TEMED作為加速劑能夠促進(jìn)AP釋放氧自由基，加速丙烯酰胺單體的聚合?？諝鉁囟容^低時(shí)稍稍多加TEMED可加快膠的凝固速度，但要確保AP未變質(zhì)，否則無效。3.AP應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，否則變質(zhì)會(huì)導(dǎo)致膠不聚合。另外

人原代食管成纖維細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/21: 人原代食管成纖維細(xì)胞EsophagealFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d003價(jià)格：6960.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述食管是咽和胃之間的消化管，哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，其中外膜主要都是成纖維細(xì)胞構(gòu)成的疏松結(jié)締組織，食管通過其與食管周圍的器官相連。黏膜下層,為厚的疏松結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)部包含食管腺，可分泌粘液排入食管腔。食管癌的發(fā)生中由正常成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的活化的癌相關(guān)纖維母細(xì)胞是腫瘤間質(zhì)微環(huán)

人原代直腸成纖維細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/21: 人原代直腸成纖維細(xì)胞RectalFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d020價(jià)格：7190.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述直腸是自肛緣起向上15cm的一段大腸。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，腫瘤間質(zhì)對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著重要作用。成纖維細(xì)胞是腫瘤間質(zhì)的重要組成成分,與腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。腫瘤間質(zhì)中成纖維細(xì)胞活化為癌相關(guān)成纖維細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞-

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