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在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中Z可能出現(xiàn)問(wèn)題以及解決方法2013/11/20: 我們常說(shuō)到的ELISA試劑盒是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定的簡(jiǎn)稱，它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。ELISA試劑盒技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，到目前為止已經(jīng)被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域之中。而在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常常會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題，那么今天恒遠(yuǎn)elisa試劑盒供應(yīng)商為大家解說(shuō)的就是在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問(wèn)題以及解決方法。在試驗(yàn)中可能會(huì)出現(xiàn)所有孔都沒(méi)有顯色，那么原因就有可能是微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。也可能是用錯(cuò)試劑。

ELISA試劑盒蛋白質(zhì)純化與結(jié)晶的培養(yǎng)原理2013/11/19: ELISA試劑盒獲得蛋白質(zhì)的晶體結(jié)構(gòu)的*個(gè)瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質(zhì)（10mg），其濃度通常在10mg/ml以上，并以此為基礎(chǔ)進(jìn)行結(jié)晶條件的篩選。運(yùn)用重組基因的技術(shù)，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現(xiàn)載體（expressionvector）內(nèi)，此一載體通常具有易于調(diào)控的特性。之后再將帶有特定基因的載體送入可快速生長(zhǎng)的菌體中，如大腸桿菌（Escherichiacoli），在菌體快速生長(zhǎng)的同時(shí)，也大量生產(chǎn)表現(xiàn)載體上的基因所解譯出之蛋白質(zhì)。一般而言純度越高的蛋白質(zhì)比較有機(jī)會(huì)形成晶體，因此

用elisa試劑盒檢測(cè)樣本的原理和步驟2013/11/18: 1.elisa試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。2．加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過(guò)多，可使用多道移液器。3.孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育，嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。4.洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時(shí)要消除板底殘留的

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差的原因分析及解決方法2013/11/15: 1、ELISA試劑盒樣品數(shù)量不一，加樣時(shí)間長(zhǎng)短不一；重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近。2、樣品加入后未混勻；加樣后在混勻器上充分混勻。3、酶標(biāo)儀濾光片不對(duì)或輸入波長(zhǎng)不對(duì)；TMB顯色用450/630波長(zhǎng).4、酶標(biāo)儀測(cè)定重復(fù)性差；校對(duì)酶標(biāo)儀。5、洗滌不正確；洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時(shí)反應(yīng)板面向下，垂直用力甩凈內(nèi)容物（可多甩幾次），在干凈、無(wú)或少塵的吸水材料上拍干。洗板機(jī)洗板時(shí)不應(yīng)有堵孔，洗滌應(yīng)充分。6、溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱）恒溫箱溫育較水浴顯色深，OD值高出0.1-

酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理2013/11/14: 酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中常見問(wèn)題明細(xì)2013/11/13: 由于ELISA試劑盒具有靈敏度較高、特異性好的特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于各種傳染性疾病的篩查如肝炎、愛滋、優(yōu)生優(yōu)育等。雖然洗板只是ELISA實(shí)驗(yàn)重要環(huán)節(jié)中的一個(gè)，但作為專業(yè)的洗板機(jī)生產(chǎn)廠家，我們必須對(duì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果各因素有一定的認(rèn)識(shí)。的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。如不注意，就易出現(xiàn)白板、花板、色弱和假陽(yáng)性等現(xiàn)象。尤其是花板現(xiàn)象（就是空白、陰性、陽(yáng)性對(duì)照以及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標(biāo)本孔的OD值卻明顯偏高）是各個(gè)廠家洗板機(jī)調(diào)試中經(jīng)常遇到的問(wèn)題。現(xiàn)將ELIS

ELISA試劑盒液體標(biāo)本的收集2013/11/12: ELISA試劑盒液體類標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。3、尿液：[1]用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存

ELISA的概念、原理、操作步驟2013/11/08: ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定（enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。（一）原理ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)人ELISA試劑盒促進(jìn)癌癥發(fā)展機(jī)制2013/11/06: 近日，中科院上海生科院營(yíng)養(yǎng)科學(xué)研究所的科學(xué)家在一項(xiàng)研究中，揭示了人ELISA試劑盒在癌癥發(fā)生發(fā)展中新的功能和機(jī)制。相關(guān)研究成果日前發(fā)表于美國(guó)《癌癥研究》雜志。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6），是腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子家族的成員之一，zui初被發(fā)現(xiàn)于白細(xì)胞介素1（IL-1）及CD40信號(hào)傳導(dǎo)途徑。作為泛素連接酶，人ELISA試劑盒可以對(duì)其底物進(jìn)行Lys63連接的多聚泛素化修飾，進(jìn)而促進(jìn)其底物激酶如TAK1和PKB（Akt）的活性，在先天和后天免疫、骨代謝以及淋巴結(jié)發(fā)育中發(fā)揮重要作用。近來(lái)

ELISA試劑盒在選樣以及保存方法2013/11/05: 臨床檢驗(yàn)中常用的標(biāo)本一般包括血液（指血，靜脈血），方法和保存都有一定的要求，下面和大家介紹幾種，zui常用的方法，希望對(duì)大家有所幫助．一、ELISA試劑盒尿液標(biāo)本同血標(biāo)本一樣，尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大，特別是飲食的影響，故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本，較濃縮和酸化，有形成分（如血細(xì)胞，上皮細(xì)胞，管形）相對(duì)集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿，留取方便，但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素C干擾潛血

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中加樣注意事項(xiàng)2013/11/04: 目前臨床上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測(cè)的血清標(biāo)本的收集則沒(méi)有時(shí)間和體位方面的影響，用于ELISA試劑盒測(cè)定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清（漿），有時(shí)由于特定的檢測(cè)目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。對(duì)用于激素和治療藥物測(cè)定的血清標(biāo)本的收集，要留意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。再如治療藥物的檢測(cè)，應(yīng)根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)選擇服藥后的zui適時(shí)間抽血檢

小鼠ELISA試劑盒中常見問(wèn)題及解決方法經(jīng)驗(yàn)總結(jié)2013/11/01: 下面分析小鼠ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法1.選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因：①血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;②手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）;③加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法：①標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒

人ELISA試劑盒檢測(cè)發(fā)現(xiàn)過(guò)度清潔反而可能有害健康2013/10/31: 父母總是教育孩子要講衛(wèi)生，要注意清潔。人ELISA試劑盒檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，皮膚表面一些細(xì)菌有助阻止發(fā)炎，過(guò)度清潔反而可能有害健康。阻止發(fā)炎研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)皮膚破損后，皮膚表面一種常見細(xì)菌——葡萄球菌在發(fā)炎進(jìn)程中關(guān)鍵步驟上發(fā)揮阻礙作用，防止人體免疫反應(yīng)過(guò)度引起大范圍發(fā)炎，有助皮膚傷口愈合。人ELISA試劑盒檢測(cè)對(duì)老鼠和人類細(xì)胞進(jìn)行測(cè)試后發(fā)現(xiàn)，這種“好”細(xì)菌能夠產(chǎn)生一種名為“脂磷壁酸”的分子，作用于表皮角化細(xì)胞，阻止角化細(xì)胞加劇發(fā)炎程度。英國(guó)廣播公司（ＢＢＣ）23日援引加洛的話報(bào)道，這項(xiàng)研究揭示了傷口愈合機(jī)制中

酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理2013/10/30: 酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏

脂肪細(xì)胞延長(zhǎng)人造血干細(xì)胞在體外的存活時(shí)間2013/10/29: 利用人造血干細(xì)胞（humanhematopoieticstemcells,hHSCs）治療一系列疾病所面臨的一個(gè)主要的障礙就是科學(xué)家們很難在體外培養(yǎng)它們.它們?cè)隗w外要么很快死亡,要么分化為其他類型的細(xì)胞.在一項(xiàng)新的研究中,來(lái)自美國(guó)塔夫斯大學(xué)工程學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程系的DeanLiangGlettig和DavidKaplan通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)證實(shí)含有脂肪細(xì)胞的飼養(yǎng)層（feederlayer）能夠成功地促進(jìn)體外培養(yǎng)的hHSCs長(zhǎng)期存活.相關(guān)研究結(jié)果于2013年3月12日在線發(fā)表在BioResearchOpe

現(xiàn)貨大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒說(shuō)明書2013/10/28: 現(xiàn)貨大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒說(shuō)明書是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Apelin-17濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Apelin-17和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Apelin-17的濃度呈比例關(guān)系。安全性1、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。2、實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽

人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)禁忌2013/10/25: 人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)禁忌1．人ELISA試劑盒從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝進(jìn)密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其正確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)目多，推薦使用排槍加樣。4．人ELISA試劑盒如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋

小鼠ELISA試劑盒具體步驟解析2013/10/24: 小鼠ELISA試劑盒具體步驟解析（1）小鼠ELISA試劑盒將抗原抗體反應(yīng)固相化：即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié)，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無(wú)選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu)，保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性；（2）封閉：固相吸附蛋白是非特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力，為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性，因此，包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無(wú)關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑，也可用

ELISA檢測(cè)原理2013/10/23: ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來(lái)自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過(guò)氧化物酶）酶結(jié)合物，ELISA試劑盒經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合

小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）elisa試劑盒使用說(shuō)明書2013/10/22: 小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）elisa試劑盒使用說(shuō)明書Elisakit規(guī)格：48孔配置/96孔配置標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液：1.5ml×1瓶酶標(biāo)試劑：3ml×1瓶（48）/6ml×1瓶（96）小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）elisa試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以

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