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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第19年
細(xì)胞凋亡的幾種檢測(cè)方法2010/06/30
一、形態(tài)學(xué)觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細(xì)胞呈圓形,胞核深染,胞質(zhì)濃縮,染色質(zhì)成團(tuán)塊狀,細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細(xì)胞核呈黃綠色熒光,胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè),可見細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺(tái)盼藍(lán)染色:如果細(xì)胞膜不完整、破裂,臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞,細(xì)胞變藍(lán),即為壞死。如果細(xì)胞膜完整,細(xì)胞不為臺(tái)盼藍(lán)染色,則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對(duì)反映細(xì)胞膜的完整性,區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫助。4、透射電鏡觀察:可見凋亡細(xì)胞表面微絨
小鼠單個(gè)核細(xì)胞分離一步梯度法去除死細(xì)胞2010/06/24
基本原理活細(xì)胞(密度較小)和死細(xì)胞(密度較大)密度不同,從而有助于將活的淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞分離。附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸鈉;PharmaciaLKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)12ml或50ml聚丙烯離心管(比聚苯乙烯離心管好)注:Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度與溫度有關(guān);該方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液適合在室溫中使用。因此應(yīng)注意使細(xì)胞懸液、離心和高密度溶液控制在室溫。否則會(huì)因活細(xì)胞沉入離心管底導(dǎo)
蛋白質(zhì)的濃縮技術(shù)方法2010/06/23
(一)濃縮膠濃縮法濃縮膠是一種高分子網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)聚合物,具有很強(qiáng)的吸水性能。每克干膠可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物質(zhì),如水、葡萄糖、蔗糖、無機(jī)鹽等,適宜濃縮10000分子量以上的生物大分子物質(zhì)。濃縮后,蛋白質(zhì)的回收率可達(dá)80%~90%。比濃縮膠應(yīng)用方便,直接加入被濃縮的溶液中即可。必須注意,濃縮溶液的pH值應(yīng)大于被濃縮物質(zhì)的等電點(diǎn),否則在濃縮膠表面產(chǎn)生陽離子交換,影響濃縮物質(zhì)的回收率。(二)冷凍干燥濃縮法這是濃縮蛋白質(zhì)的一種較好的辦法,它既使蛋白質(zhì)不易變性,又保持蛋白質(zhì)中固
紫外線消毒器應(yīng)用2010/06/22
一、紫外線消毒器消毒原理時(shí)紫外線按其生物學(xué)作用的差異,紫外線可分為UV-A(320-400nm)、UV-B(275-320nm)、UV-C(200-275nm)和真空紫外線部分。水處理中實(shí)際上是使用紫外線的UV-C部分,在該波段中260nm附近已被證實(shí)是殺菌效率zui高的紫外線。冠宇紫外線消毒器集光學(xué)、微生物學(xué)、機(jī)械、化學(xué)、電子、流體力學(xué)等綜合科學(xué)為一體。采用特殊設(shè)計(jì)的率、高強(qiáng)度和長壽命的紫外UV-C光發(fā)生裝置產(chǎn)生的強(qiáng)紫外UV-C光照射流水。當(dāng)水中的細(xì)菌、病毒等受到一定劑量的紫外UV-C光(波長
腫瘤標(biāo)志物分類、檢測(cè)原理和檢測(cè)方法2010/06/21
根據(jù)WHO資料,范圍內(nèi)惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因,占總死亡人數(shù)的22%,并逐年增加。10種常見腫瘤:胃癌、肝癌、食管癌、結(jié)直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療是患者獲得長期生存的zui主要途徑。以肝癌為例,腫瘤直徑<2cm,5年生存率幾乎100%;直徑每增加1cm,5年生存率下降20%。腫瘤診斷三大支柱是圖像診斷(包括B超、CT、核磁共振)、化學(xué)診斷(血清學(xué)和免疫學(xué))及細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)診斷,而后兩者均以腫瘤標(biāo)志為主要或輔助觀察
維生素C可提高iPS細(xì)胞誘導(dǎo)效率2010/06/17
誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(inducedpluripotentstemcells,iPScells)是具有胚胎干細(xì)胞特性的一種細(xì)胞,由體細(xì)胞誘導(dǎo)而來,可作為胚胎干細(xì)胞的替代品用于科學(xué)研究和臨床治療。但是iPS細(xì)胞的成功誘導(dǎo)比較復(fù)雜,誘導(dǎo)效率一直是科學(xué)界的難題,通常每萬個(gè)細(xì)胞才能誘導(dǎo)成功一例iPS細(xì)胞。zui近,中科院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院裴端卿帶領(lǐng)的研究小組發(fā)現(xiàn),通過在培養(yǎng)過程中添加維生素C可使iPS誘導(dǎo)效率提高10倍。通過老鼠和人細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)時(shí)添加維生素C可促進(jìn)相關(guān)基因表達(dá),推動(dòng)體細(xì)胞進(jìn)入重編
致病微生物2010/06/13
微生物是指那些個(gè)體體積直徑一般小于1mm的生物群體,它們結(jié)構(gòu)簡單,大多是單細(xì)胞,還有些甚至連細(xì)胞結(jié)構(gòu)也沒有。人們通常會(huì)借助顯微鏡或者電子顯微鏡才能看清它們的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。需要說明的是微生物是一個(gè)比較籠統(tǒng)的概念,界線有時(shí)會(huì)非常模糊。如單細(xì)胞藻類和一些原生動(dòng)物也應(yīng)算是微生物,但通常它們并不放在微生物中進(jìn)行研究。按我國學(xué)者提出的分類法將生物分成六界:病毒界、原核生物界、原生生物界、真菌界、植物界和動(dòng)物界。不難看出微生物在六界中占了四界,因此微生物在自然界中的重要地位是顯而易見的,其研究的對(duì)象也是十分廣泛
微生物的染色與形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察2010/06/12
雖然各種類型的顯微鏡能夠觀察到微生物的各種形態(tài)結(jié)構(gòu),但一般實(shí)驗(yàn)室常用的是普通光學(xué)顯微鏡。由于細(xì)菌體積小且透明,在活體細(xì)胞內(nèi)又含有大量的水分,因此,對(duì)光線的吸收和反射與水溶液相差不大。當(dāng)把細(xì)菌懸浮在水滴內(nèi),放在顯微鏡下觀察時(shí),由于與周圍背景沒有顯著的明暗差,難于看清它們的形狀,更談不上識(shí)別其細(xì)微結(jié)構(gòu)。而經(jīng)過染色,就可借助顏色的反襯作用比較清楚地看到菌體形態(tài),亦即菌體表面及內(nèi)部結(jié)構(gòu)著色與背景形成鮮明對(duì)比,這樣便可在普通光學(xué)顯微鏡下清晰地觀察到微生物的形狀和結(jié)構(gòu),而且還可以通過不同的染色反應(yīng)來鑒別微生
植物治理污染物將成現(xiàn)實(shí)2010/06/11
相對(duì)來說,植物屬于自養(yǎng)生物,生物量大、根系發(fā)達(dá),對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性強(qiáng)。此外,植物治理的過程也是環(huán)境綠化和美化的過程。所以,在20世紀(jì)的八九十年代學(xué)者們提出用植物治理污染物的新思路。但是,植物世代周期長、個(gè)體大且有分化復(fù)雜的組織器官,即使在污染的環(huán)境中,也不容易在短期內(nèi)獲得降解污染物的能力?,F(xiàn)代分子生物學(xué)和基因工程的手段則可以將微生物與植物兩方面的優(yōu)勢(shì)整合起來。試驗(yàn)證明,微生物來源的打開苯環(huán)結(jié)構(gòu)的基因可以通過基因工程的途徑轉(zhuǎn)化到植物中并得到正確的表達(dá),特別是證明了這種轉(zhuǎn)基因植物能夠清除污染物中難以被快
如何讓干細(xì)胞不分化 新型培養(yǎng)基來幫忙2010/06/10
以色列耶路撒冷哈達(dá)薩大學(xué)的研究人員近日開發(fā)出一種新的干細(xì)胞培養(yǎng)基,能讓干細(xì)胞在更長時(shí)間內(nèi)不分化。這項(xiàng)研究是由哈達(dá)薩人類胚胎干細(xì)胞研究中心的主管BenjaminReubinoff領(lǐng)導(dǎo)的,發(fā)表在近期的《NatureBiotechnology》上。作者們相信這項(xiàng)技術(shù)將對(duì)臨床應(yīng)用所需的大量hESC特別有用。為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細(xì)胞(也就是一層小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng)。但是在這些基質(zhì)上培養(yǎng)干細(xì)胞是相當(dāng)昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長時(shí)間內(nèi)保持未分化狀
離心機(jī)及轉(zhuǎn)子的分類2010/06/09
一.離心機(jī)的分類:上對(duì)離心機(jī)的分類方法有三種:按用途分、按轉(zhuǎn)速分和按結(jié)構(gòu)分。按用途分類:分為制備型離心機(jī)和制備分析離心機(jī)。制備型離心機(jī):僅供分離濃縮,提純?cè)嚇拥碾x心機(jī)。制備分析離心機(jī):不但能分離濃縮、提純?cè)嚇?,而且可以通過光學(xué)系統(tǒng)對(duì)試樣的沉降過程進(jìn)行觀察、拍照、測(cè)量、數(shù)字輸出、打印自動(dòng)顯示的離心機(jī)。按轉(zhuǎn)速分類:分為低速離心機(jī)、高速離心機(jī)、超速離心機(jī)。低速離心機(jī):轉(zhuǎn)速在10000rpm以內(nèi)或相對(duì)離心力在15000×g以內(nèi)。高速離心機(jī):轉(zhuǎn)速在10000∽30000rpm以內(nèi)或相對(duì)離心力在15000∽
菌株的復(fù)活2010/06/08
先用肉湯培養(yǎng)基復(fù)活,此為菌種*代;從營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中挑菌液劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,選擇典型菌落,接種于營養(yǎng)瓊脂斜面,此為菌種第二代;一個(gè)月后,從斜面上挑菌劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,選擇典型菌落,接種于營養(yǎng)瓊脂斜面,此為菌種第三代;依次下去,直至第五代,就可以不再接了,可以買新的菌種了。1.選擇復(fù)活用的培養(yǎng)基,可選用說明書中推薦的培養(yǎng)基,根據(jù)菌株的分類進(jìn)行選擇,請(qǐng)說明購買菌株的類型或名稱;2.選擇菌株保存的方法:冷凍真空干燥保藏法(可保存10年以上,需真空冷凍干燥機(jī)等設(shè)備)、超低溫保藏(可保存兩
細(xì)胞凍存.復(fù)蘇方法2010/06/07
1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后
水體溶解氧的各種檢測(cè)方法及原理2010/06/04
1.碘量法:是測(cè)定水中溶解氧的基準(zhǔn)方法,使用化學(xué)檢測(cè)方法,測(cè)量準(zhǔn)確度高,是zui早用于檢測(cè)溶解氧的方法。其原理是在水樣中加入硫酸錳和堿性碘化鉀,生成氫氧化錳沉淀。此時(shí)氫氧化錳性質(zhì)極不穩(wěn)定,迅速與水中溶解氧化合生成錳酸錳:加入濃硫酸使已化合的溶解氧(以MnMnO3的形式存在)與溶液中所加入的碘化鉀發(fā)生反應(yīng)而析出碘:再以淀粉作指示劑,用硫代硫酸鈉滴定釋放出的碘,來計(jì)算溶解氧的含量此方法適用于各種溶解氧濃度大于0.2mg/L和小于氧的飽和度兩倍(約20mg/L)的水樣水中可能含有亞硝酸鹽、鐵離子、游離
多參數(shù)水質(zhì)分析儀2010/06/03
技術(shù)參數(shù)該儀器測(cè)定下限、測(cè)定范圍、測(cè)量精度與但參數(shù)水質(zhì)分析儀器相同。主要特點(diǎn)1、具有選擇離子測(cè)量功能,可內(nèi)置19種離子或參數(shù)測(cè)量項(xiàng)目以供選擇,可儲(chǔ)存1600個(gè)樣品檢測(cè)數(shù)據(jù),配合隨機(jī)提供的化學(xué)試劑包,可自動(dòng)顯示被測(cè)樣品的吸光度值、濃度值及其測(cè)量參數(shù)。2、配置9個(gè)超高亮發(fā)光二極管,波長自動(dòng)轉(zhuǎn)換。用戶也可自備標(biāo)準(zhǔn)溶液,用自制的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量測(cè)定。3、采用單片機(jī)控制,具有光譜數(shù)據(jù)處理功能。4、大屏幕中文顯示,人機(jī)交互式操作。5、主機(jī)內(nèi)置充電電池,外置大功率鋰電池,適用于實(shí)驗(yàn)室或野外現(xiàn)場(chǎng)定量測(cè)量。
什么中藥治胃炎2010/06/01
下面重點(diǎn)介紹幾種中成藥。(1)香砂養(yǎng)胃丸:①主要成分:木香、砂仁、枳實(shí)、白術(shù)、豆蔻仁、茯苓、厚樸、香附。②功能主治:本藥有健脾和胃、理氣消食的作用。適用于納差乏力、上腹痛、腹脹、呃逆、噯氣、舌苔厚的胃炎患者。③用法:每服6克,每日2次,溫開水送服。(2)胃氣止痛丸:①主要成分:香附、高良姜。②功能主治:本藥有溫中散寒、行氣止痛作用。適用于喜噯喜按、口吐清水、手足不溫的胃寒患者。③用法:每服3克,每日2次,溫開水送服。(3)舒肝丸:①主要成分:柴胡、厚樸、川芎、香附、枳實(shí)、沉香、砂仁、木香。⑨功能
冬季預(yù)防疾病2010/05/31
中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,立冬陽氣潛藏,陰氣盛極,草木凋零,蟄蟲伏藏,萬物活動(dòng)趨向休止,以冬眠狀態(tài)養(yǎng)精蓄銳,為來春生機(jī)勃發(fā)做準(zhǔn)備。就人體而言,新陳代謝也處于相對(duì)緩慢的水平,因此主張冬季養(yǎng)生要避寒就溫、保護(hù)陽氣,使陰陽相對(duì)平衡?!端貑枴に臍庹{(diào)神大論》曰:“冬三月,此謂閉藏。水冰地坼,無擾乎陽。早臥晚起,必待日光;使志若伏若匿,若有私意,若已有德;去寒就溫,無泄皮膚,使氣亟奪。此冬氣之應(yīng),養(yǎng)藏之道也。”認(rèn)為冬季天地萬物處于閉藏狀態(tài),人們應(yīng)早睡晚起,避寒保暖,但不能過度溫暖而使皮膚出汗,以保陽氣。從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)角度來看
聯(lián)合疫苗和多價(jià)疫苗2010/05/28
為了使用上的方便,生物制品生產(chǎn)單位愈來愈多地制備多價(jià)疫苗或聯(lián)合疫苗。在一個(gè)劑量的疫苗中包含一種病毒的幾個(gè)型或亞型者,稱為多價(jià)疫苗;在一個(gè)劑量的疫苗中包含幾種病毒乃至其它微生物或其產(chǎn)物者,稱為聯(lián)合疫苗。必須指出,多價(jià)疫苗決不是幾種疫苗的簡單的混合。制備和應(yīng)用多價(jià)疫苗或聯(lián)合疫苗,必須首先保證其中各個(gè)免疫成分之間不發(fā)生免疫干擾現(xiàn)象,也就是不降低各該免疫成分的免疫效能。因此必須進(jìn)行大量細(xì)致的試驗(yàn),通過對(duì)比,選擇zui適當(dāng)?shù)呐浜蠈?duì)象和配合比例,并作較大數(shù)量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和本動(dòng)物的免疫效果測(cè)定。另外還有一個(gè)經(jīng)濟(jì)
腦膜炎球菌和李斯特菌的培養(yǎng)2010/05/27
腦膜炎球菌和李斯特菌凍干菌株,需要用無菌的生理鹽水溶解。1、腦膜炎球菌:革蘭陰性菌,營養(yǎng)要求較高,在普通培養(yǎng)基上不長,30℃以下不長,應(yīng)接種于已溫暖的血平板或巧克力平板上,置于燭缸內(nèi)37℃培養(yǎng)。2、李斯特菌:革蘭陽性桿菌,營養(yǎng)要求不高,在含有肝浸液、腹水、血清或葡萄糖的培養(yǎng)基中生長良好,在5%養(yǎng)血平板上形成細(xì)小圓形光滑而有狹窄beta溶血圈的菌落。
光學(xué)顯微鏡常識(shí)產(chǎn)品用途2010/05/26
光學(xué)顯微鏡的組成結(jié)構(gòu)光學(xué)顯微鏡包括光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械裝置兩大部分,而數(shù)碼顯微鏡還包括數(shù)碼攝像系統(tǒng),現(xiàn)分述如下:(一)機(jī)械裝置1.機(jī)架顯微鏡的主體部分,包括底座和彎臂。2.目鏡筒位于機(jī)架上方,靠圓形燕尾槽與機(jī)架固定,目鏡插在其上。根據(jù)有否攝像功能,可分為雙目鏡筒和三目鏡筒;根據(jù)瞳距的調(diào)節(jié)方式不同,可分為鉸鏈?zhǔn)胶推揭剖健?.物鏡轉(zhuǎn)換器它是一個(gè)旋轉(zhuǎn)圓盤,上有3~6(或7)個(gè)孔,分別裝有低倍或高倍物鏡鏡頭。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器就可讓不同倍率的物鏡進(jìn)入工作光路。4.載物臺(tái)是放置玻片的平臺(tái),其中央具有通光孔。臺(tái)上有一
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