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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
人腫瘤壞死因子α高敏 ELISA 試劑盒本試劑盒檢測(cè)原理2020/05/14
人腫瘤壞死因子α高敏ELISA試劑盒本試劑盒檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人TNF-α抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的TNF-α與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入生物素化的檢測(cè)抗體孵育。洗滌去除未結(jié)合的生物素化的抗體,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入信號(hào)增強(qiáng)劑孵育,洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,再次加入Streptavidin-HRP。洗滌后,加入顯色底物TMB,
小鼠白介素6 ELISA試劑盒樣品活化方法2020/05/13
小鼠白介素6ELISA試劑盒樣品活化方法:生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測(cè)指標(biāo)活性前必須進(jìn)行活化處理?;罨椒ㄈ缦拢貉濉⒀獫{:280μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40μL樣品,混勻,加入40μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40μL活化試劑2,混勻后立即檢測(cè)。注意:樣品被稀釋了10倍!細(xì)胞培養(yǎng)上清:20μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入100μL樣品,混勻,加入40μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40μL活化試劑2,混勻后立即檢測(cè)。注意:樣品被稀釋了2倍!組織勻漿:1960μL
豬心肌肌鈣蛋白Telisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)用途2020/05/07
豬心肌肌鈣蛋白Telisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)用途:TN-T,心肌肌鈣蛋白T(cardiactroponinT,cTnT)是心肌缺血敏感和特異的指標(biāo),細(xì)胞免疫中T細(xì)胞參與細(xì)胞因子的合成以及體液免疫的形成,是人體抵御病原菌入侵的*道防線。所提供的ELISAKit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或
真菌1-3-β-D葡聚糖(1,3-β-DG)elisa試劑盒樣本處理2020/04/29
真菌1-3-β-D葡聚糖(1,3-β-DG)elisa試劑盒樣本處理及要求:1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻
兔子胰島素(INS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒雙抗體夾心法2020/04/28
兔子胰島素(INS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒雙抗體夾心法:1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.
沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測(cè)試劑盒操作技巧2020/04/23
沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測(cè)試劑盒操作技巧1.操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導(dǎo)致效果過錯(cuò),試驗(yàn)重復(fù)性差。3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說明書舉薦的洗刷次數(shù),洗液在反應(yīng)孑
小鼠核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒做標(biāo)準(zhǔn)曲線幾個(gè)問題2020/04/22
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)有幾個(gè)問題需要注意1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從談起。2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。3、采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲
枝頂孢霉染料法熒光定量PCR試劑盒樣品DNA的制備2020/04/21
枝頂孢霉染料法熒光定量PCR試劑盒樣品DNA的制備1.如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。2.用自選方法純化
小鼠幽門螺旋桿菌抗體IgG檢測(cè)試劑盒的準(zhǔn)備2020/04/16
小鼠幽門螺旋桿菌抗體IgG檢測(cè)試劑盒的準(zhǔn)備:1.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。2.控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無菌試管,經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過久,檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本;對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1h,待充分凝固后再離心分離血清。3.試劑的選擇:國(guó)家明確要求
豬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)準(zhǔn)備2020/04/14
豬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒使用支原體污染PCR檢測(cè)試劑盒,能在2到3小時(shí)內(nèi)獲得可靠的結(jié)果,是一種靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速的檢測(cè)支原體污染的方法,具有以下特點(diǎn):①特異性引物是針對(duì)高度保守的支原體16SrRNA序列設(shè)計(jì)的,可用于檢測(cè)非常廣泛的支原體種類,不受真核細(xì)胞或細(xì)菌DNA干擾。經(jīng)本試劑盒測(cè)試的支原體菌株涵蓋了所有常見的支原體污染種類;②靈敏度*,低僅需10個(gè)拷貝的支原體基因組即可使檢測(cè)呈陽(yáng)性;③陽(yáng)性對(duì)照所用引物與支原體檢測(cè)相同,可幫助判斷假陰性現(xiàn)象,避免假陰性導(dǎo)致的誤判;④包含PCR
豚鼠ELISA試劑盒的基本原則三2020/04/09
豚鼠ELISA試劑盒的基本原則有三:(1)抗原或抗體的物理吸附到固相載體,可以是蛋白質(zhì)與聚苯乙烯表面吸附的疏水性部分之間的相互作用,并豚鼠ELISA試劑盒保持其免疫活性;(2)抗原或抗體酶結(jié)合物可以通過然而豚鼠ELISA試劑盒酶共價(jià)鍵連接,這種酶結(jié)合物仍能保持其免疫和大鼠ELISA試劑盒酶的活性;(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)的抗原或抗體試劑盒,以確定是否免疫反應(yīng)是根據(jù)底物顯色反應(yīng)的增加,和顯色反應(yīng)深度成正比樣品的相應(yīng)抗原或抗體的量,因此,可以按顯色底物水平顯示測(cè)試結(jié)果。方法是一種新的免疫診斷技術(shù),已成功
赤點(diǎn)石斑魚神經(jīng)壞死病毒RNA核酸檢測(cè)試劑盒使用步驟2020/04/07
赤點(diǎn)石斑魚神經(jīng)壞死病毒(RGNNV)RNA核酸檢測(cè)試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ┦褂貌襟E:一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例1.注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照。2.標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。3.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR模板稀釋液用帶芯槍頭,下同。4.換槍頭,在6號(hào)管中加入5μL1×10E7拷貝/μL
駱駝-新型科研的元兇2020/03/30
美國(guó)和沙特阿拉伯一項(xiàng)ELISA新研究發(fā)現(xiàn),2012年在中東地區(qū)發(fā)現(xiàn)的中東呼吸系統(tǒng)綜合征科研(MERS病毒)廣泛見于駱駝體內(nèi),而且已存在20多年,這說明該病毒可能由駱駝傳染給人。美國(guó)國(guó)家過敏癥和傳染病研究所和沙特國(guó)王大學(xué)等機(jī)構(gòu)25日在《微生物學(xué)》網(wǎng)絡(luò)版上報(bào)告說,他們?cè)谏程厝珖?guó)范圍內(nèi)采集了200多頭單峰駝血液樣本,結(jié)果發(fā)現(xiàn)74%的樣本中都存在這種病毒,病毒主要存在于駱駝的呼吸道中。更讓人驚訝的是,對(duì)1992年至2010年間采集的駱駝血液樣本的分析表明,這種病毒在駱駝中存在的歷史至少可追溯到1992年
派琴蟲核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)哪里有賣2020/03/26
派琴蟲核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到。2.重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為。3.靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。4.實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的1
木絲霉pCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟2020/03/24
木絲霉pCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100,混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次;13000rpm離心15min,吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min,13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l75%乙醇,顛倒洗滌,13000
腺病毒型PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素2020/03/19
腺病毒型PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,
牛雌二醇elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2020/03/18
牛雌二醇elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):⑴嚴(yán)格按照人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)elisa試劑盒說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。⑵加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵
鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測(cè)試劑盒應(yīng)遵循的原則2020/03/16
鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1elisa試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備步驟2020/03/12
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1elisa試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/
裸鼠白細(xì)胞介素ELISA試劑盒液體樣本的收集2020/03/11
裸鼠白細(xì)胞介素-6(IL-6)ELISA試劑盒液體樣本的收集:1、血清:用無菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3、尿液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/
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