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PCR反應(yīng)技術(shù)的反應(yīng)基本步驟2023/04/16
1、變性90~94℃的高溫處理可使模板DNA雙鏈間氫鍵斷裂,解離成單鏈但不改變其化學(xué)性質(zhì),變性的時間一般為30s,如果模板的G+C含量較高,變性時間可能延長。2、退火退火的溫度一般降低至25~65℃。在退火過程中,引物分別與待擴增的DNA片段的兩條鏈的3'端互補配對。退火的溫度取決于引物的Tm值,并通過預(yù)備試驗來最后確定。一般引物越短,其Tm也越低,對于10bp左右的隨機引物,退火溫度在37℃左右,反之則高。退火溫度越高,引物與模板結(jié)合的特異性增強,非特異性的擴增概率降低,但擴增效率也隨之降低。
如何設(shè)置梯度PCR2023/04/16
1、打開PCR儀,再找到一個普通PCR程序,以備改動(也可以自行重新編輯)2、按enter鍵打開PCR普通程序,按”編輯“進入程序編輯狀態(tài),按“Tab”鍵將編輯區(qū)域調(diào)節(jié)至右側(cè)選擇是否進行梯度PCR選項,選擇“是”3、選擇梯度PCR后按Tab鍵回到左邊程序,點擊下一步進行編輯,此時可看到整個程序界面,找到退火溫度,在下方“±0.00”℃的地方輸入你想進行的梯度區(qū)間,例如61±5℃4、編輯好后保存按ESC返回主界面,找到與程序菜單并列的梯度菜單,點擊進入,將中心溫度調(diào)至與剛剛設(shè)置的溫度一致,例如上述
ers-2細胞電阻儀器使用方法2022/11/21
1.固定電極和可變電極的區(qū)別MERS00002中包含固定電極,但不包含可變電極。固定電極(MERSSTX01)的兩個電極的高度差是固定的。對于可變電極,可以通過調(diào)節(jié)長電極的高度調(diào)節(jié)兩個電極之間的高度差。固定電極適用于除96孔板以外的所有Millicell小室。使用Corning的Transwell,小室底面與孔板底面距離更大,建議購買可變電極,貨號為MERSSTX03。胞電壓和電阻時,屏幕顯示的數(shù)值左右擺動,不穩(wěn)定確保電阻儀與電源斷開;電量不能過低;細胞平衡到室溫(半個小時以上,溫度會影響電阻值
PCR儀的使用步驟及原理2022/10/11
PCR儀是為滿足當(dāng)今分子生物實驗室的需求所設(shè)計。高品質(zhì)的光學(xué)器件、可靠的溫度控制系統(tǒng)及嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝確保儀器可靠性、精度和準(zhǔn)確度。PCR儀主要功能包括多通道PCR檢測,熔解曲線及數(shù)據(jù)分析管理等。儀器可以使用條形管或單個PCR管進行PCR反應(yīng)。PCR儀的操作步驟:1、準(zhǔn)備好樣品,分別分裝于200微升的離心管里;2、接通PCR儀的電源,打開PCR儀的開關(guān),使儀器初始化;3、打開儀器的加熱板,放入需要進行反應(yīng)的樣品;4、從儀器主頁面中選擇自己的使用文件夾;5、選擇合適的運行程序,點擊開始按鈕;6、根據(jù)
電泳儀電泳槽的常用使用方法2022/09/20
電泳儀:電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可少的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類,自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。而區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域中*常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對不同物質(zhì)
生物安全柜性能解疑2022/05/19
一些人或許認為,生物安全柜不過是一個裝有風(fēng)機和一些HEPA過濾器的鐵箱子;事實上生物安全柜要復(fù)雜得多。同樣,保持生物安全柜的安全性能也遠比“定期更換過濾器”復(fù)雜得多。本文旨在為大家在安全柜安全性能原理上破疑解惑,為實驗室工作人員、管理人員和其他涉及安全柜使用維護的相關(guān)人員在工作中給予指導(dǎo)。過濾器過濾器是生物安全柜中的關(guān)鍵組成,主要起到過濾細菌和灰塵顆粒的作用,以凈化吹入安全柜工作區(qū)和排放出的氣體。安全柜里所使用的過濾器一定要有足夠的過濾效率,否則就起不到防護生物危害的作用。過濾器材料應(yīng)采用硅酸鹽
離心機在日常使用過程中的科學(xué)維護說明2022/03/22
離心機主要利用其轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強大離心力,讓液體中的顆??焖俪两迪聛?,從而把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開的設(shè)備,在醫(yī)藥、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著舉足輕重的作用。近年來,隨著醫(yī)藥等行業(yè)的不斷發(fā)展,離心機市場規(guī)模也在不斷擴大。有專家指出,未來五年,離心機行業(yè)將迎來巨大的變革。在此背景下,制造企業(yè)需要致力于技術(shù)研發(fā),打造更多新型的設(shè)計理念、加強技術(shù)創(chuàng)新,研發(fā)出更多新的離心機以滿足市場的需求。良好的離心機是保證設(shè)備穩(wěn)定運行,高質(zhì)量分離的關(guān)鍵。而在使用的過程中,用戶也有必要知曉離心機的相關(guān)的知
冷凍離心機分類及試管破裂原因分析幾條2022/03/22
低溫離心機是利用運轉(zhuǎn)時產(chǎn)生的離心力使溶液中的懸浮微??焖俪恋淼纳瘍x器,在醫(yī)學(xué)、衛(wèi)生防疫等行業(yè)常用。但低溫離心機在使用中常因試管破裂而導(dǎo)致離心失敗,有時會損失珍貴的樣品,臨床上還引起醫(yī)療糾紛。實踐表明,低溫離心機試管破裂更是大多數(shù)與人的因素有關(guān)。常見的問題有:1.負荷不平衡放置在對稱套孔中的樣品,必須連試管一并用天平調(diào)整重量達到平衡。若僅用一只試管放樣品,對稱試管中必須加水予以平衡,否則離心時低溫離心機會震動而使試管破裂。容易被忽視的是,水平轉(zhuǎn)頭的離心杯長期使用或更換后會失衡,故離心杯也要配平。
艾本德5810r離心機使用方法簡要步驟2022/03/22
eppendorf離心機5810R操作步驟:1.連接電源,打開儀器旁邊的開關(guān)。2.根據(jù)盛放樣品的離心管的大小,安放轉(zhuǎn)子,用六角扳手按順時針方向上緊,將離心管平衡放入,蓋上轉(zhuǎn)頭蓋(大轉(zhuǎn)頭的蓋子應(yīng)該旋緊),正確關(guān)上離心機蓋子,使“Open”鍵上的指示燈變亮。3.通過Speed鍵、Time鍵、Temp鍵和▲、▼鍵來調(diào)整離心的參數(shù)。以Speed的設(shè)定為例,按Speed鍵使速度值呈現(xiàn)閃爍狀態(tài),再用▲、▼鍵來更改數(shù)值;如果要設(shè)定離心力(rcf),重復(fù)按Speed鍵直到離心力符號(*)出現(xiàn)在速度值的左邊,便可
Countess II 細胞計數(shù)儀操作方法2022/03/22
操作指南拆開CountessII包裝,設(shè)置演示設(shè)備打開包裝盒,取出附件包裝盒,拆開CountessII設(shè)備的包裝插上CountessII插頭,將USB驅(qū)動器插入儀器前方的USB端口內(nèi)。打開儀器電源儀器將顯示“開始”(Start)界面,指導(dǎo)用戶插入計數(shù)板。設(shè)備現(xiàn)在可進行計數(shù)。從包裝紙中取出Countess計數(shù)板保存包裝紙,以供后面的細胞溶液(若使用)與臺盼藍活性染料稀釋使用混勻細胞/微珠——晃動并上下吹打(渦旋振蕩)吸取10uL細胞樣本至包裝紙上在包裝紙上加入10uL臺盼藍染料至細胞/微珠樣本中(
伯樂gene pulser xcell電穿孔儀操作注意事項2022/03/14
注意事項關(guān)閉shockpod蓋再電擊,操作過程中不要與電極接觸,建議在一定的防護下操作儀器(如眼鏡,手套和防護服等)。避免有液體與shockpod接觸,放置漏電。如果要清潔電極,可以在保證儀器關(guān)機狀態(tài)下,用紙巾或者棉簽清潔電極。防止有腐蝕性液體接觸儀器表面。點擊杯中液體不要有氣泡。電壓設(shè)定根據(jù)實際樣品設(shè)定,否則可能會導(dǎo)致細胞死亡。保持實驗室溫度適中。溫度高于35攝氏度時會影響儀器正常工作。轉(zhuǎn)移儀器時,插孔需要注意PC,CE模塊不可以插反,否則會對儀器產(chǎn)生無法恢復(fù)的影響。如果發(fā)現(xiàn)儀器線路有破損,停
高速離心機與高速冷凍離心機的區(qū)別方法2021/04/09
高速離心機和高速冷凍離心機最大的區(qū)別是一個具有冷凍功能,一個不具備冷凍功能。高速離心機屬常規(guī)實驗室用離心機,廣泛用于生物,化學(xué),醫(yī)藥等科研教育和生產(chǎn)部門,它利用轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強大離心力,分離液體與固體顆粒或液體混合物中各組分,適用于微量樣品快速分離合成。由于轉(zhuǎn)速較高,產(chǎn)生離心力大,是對樣品溶液中懸浮物質(zhì)進行高純度分離、濃縮、精制,提取各種樣品進行研究的有效制備儀器。是醫(yī)學(xué)、藥物學(xué)、生物學(xué)、化學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品環(huán)保等科研生產(chǎn)部門使用的重要儀器設(shè)備,廣泛用于各種藥物、生物制品,如血液、細胞、蛋白
離心機常見的分類方式2021/04/09
離心機自問世以來,歷經(jīng)低速、調(diào)整、超速的變遷,其進展主要體現(xiàn)在離心機設(shè)計和離心技術(shù)兩方面,二者相輔相成。由于臺式離心機結(jié)構(gòu)簡單,造價低,體積小,很快成為常規(guī)實驗室儀器,國內(nèi)外*離心機廠商幾乎都生產(chǎn)臺式離心機,如近幾年來在我國比較活躍的德國賀利氏Hheraeus,艾本德eppendof,西格瑪Sigma,海蒂詩Hettich,賀默Hermle,美國的貝克曼Beckman,Thermo賽默飛世爾,日本的日立Hitachi,日本久保田Kubota等,國內(nèi)的湘儀離心機、赫西離心機、湘智離心機等。從轉(zhuǎn)速看
旋光儀的操作2021/03/30
自動旋光儀是測定物質(zhì)旋光度的儀器。通過對樣品旋光度的測定,可以分析確定物質(zhì)的濃度、含量及純度等.自動旋光儀采用光電檢測器及電子自動示數(shù)裝置,具有體積小、靈敏度高,沒有人差,讀數(shù)方便等特點。對目視旋光儀難以分析的低旋光度樣品也能適應(yīng)。因此廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、有機化工等各個領(lǐng)域。農(nóng)業(yè):農(nóng)用抗菌素、農(nóng)用激素、微生物農(nóng)藥及農(nóng)產(chǎn)品成份分析。醫(yī)藥:抗菌素、維生素、葡萄糖等藥物分析,中草藥藥理研究。食品:食糖、味精、醬油等生產(chǎn)過程的控制及成品檢查,食品含糖量的測定。石油:礦物油之分析、石油發(fā)酵工藝的監(jiān)視。香
全自動旋光儀的使用方法及維護技巧2021/03/30
旋光儀主要用于測定旋轉(zhuǎn)角及國際標(biāo)準(zhǔn)糖度。所謂測定旋轉(zhuǎn)角是可以通過測量藥品、香料化工原料等的比旋光度來確保品質(zhì)和產(chǎn)品的安全性。旋光儀可以用來測定樣品水溶液的旋轉(zhuǎn)角或旋光度。比旋光度是特定溫度和波長下的某種物質(zhì)的固有特性,可以通過眩光管長度,旋轉(zhuǎn)角,濃度計算得出。國際標(biāo)準(zhǔn)糖度被用來在制糖過程中確定粗糖的純度,使用旋光儀上的“國際標(biāo)準(zhǔn)糖度”功能測定樣品,測定顯示值則為樣品的國際標(biāo)準(zhǔn)糖度值。旋光儀應(yīng)用于制藥行業(yè)中藥物原材料及成品的旋光度測量、精細化工行業(yè)化合物或香精香料仲光學(xué)活性物質(zhì)的成分的測量、食品行
美國伯樂iMark酶標(biāo)儀操作使用方法2021/03/30
一步:接上電源,打開后面開關(guān),iMark酶標(biāo)儀開啟后,自檢后,根據(jù)機器上地提示,輸入00000后按輸入鍵即可進入地操作界面。第二步:如果試驗地程序已編好,則按MemoryRecall可直接調(diào)出在儲存檢索菜單里的程序,直接讀板。如果試驗的程序需要重新編輯,則按Edit編輯菜單里面的程序設(shè)置,進行新的試驗程序的編輯。第三步:編輯新程序:按Edit編輯菜單,首*入程序設(shè)置,里面需要進行編輯的有以下幾個分菜單:1.閾值設(shè)置;2.報告種類設(shè)置;3.標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)置;4.試驗?zāi)J皆O(shè)置5.酶標(biāo)板布局設(shè)置。定性試驗一
eppendorf5810r離心機故障分析與排除2021/03/28
根據(jù)維修手冊.“E29”代碼解釋為Motordoesn'tturn電動機不能運轉(zhuǎn)),“E40”代碼解釋Accelerationoftheunitistooslow(加速過慢)。此機器已使用超過3年且沒有做過內(nèi)部除塵.首先分析故障原因可能是主板上灰塵太多.導(dǎo)致機器過熱保護。拆開機器外殼,進行除塵后開機測試,工作正常。為了確認故障是否真正排出,進行連續(xù)試機.20min后又出現(xiàn)同樣故障。因伴隨故障現(xiàn)象的2條代碼都與電動機旋轉(zhuǎn)相關(guān),根據(jù)電路圖重點對電動機旋轉(zhuǎn)驅(qū)動部分進行分析(見圖1):驅(qū)動信號經(jīng)光耦控制
艾本德離心機5424r的使用方法2021/03/28
1、eppendorf離心機TACH報警故障故障現(xiàn)象離心機停止運轉(zhuǎn),故障顯示屏出現(xiàn)TACH閃爍,TACH報警是離心機的速度檢測電路故障引起。故障電路分析速度檢測電路的主要作用是檢測離心轉(zhuǎn)子和離心轉(zhuǎn)軸的速度,由于超速離心機的離心轉(zhuǎn)子速度較高,為確保速度檢測的可靠性,采用2對光電對管DL、T1和D2、T2分別對安裝在離心轉(zhuǎn)軸和離心轉(zhuǎn)子上的速度環(huán)進行檢測,獲得離心轉(zhuǎn)軸和離心轉(zhuǎn)子的各自實際速度信號。為確定速度檢測是否處于正常狀態(tài),電路中加入光電管檢測電路,主要用于光電對管的狀態(tài)監(jiān)控,通過電阻R1向光電管
pcr應(yīng)用中確認RNA的質(zhì)量常用的三種方法2021/03/28
實時熒光定量PCR技術(shù)是通過測定RNA的轉(zhuǎn)錄水平來評估基因的活力。RNA樣本提取的質(zhì)量直接影響基因表達分析。影響RNA品質(zhì)的因素有以下三種:RNA濃度、RNA純度和RNA完整性。檢測RNA濃度、純度和完整性的方式主要有以下幾種:紫外分光光度計法:測量260nm吸收值計算RNA濃度,測量260nm/280nm吸收值的比值,用于評估RNA純度。需要注意的是:在檢測核酸物質(zhì)時應(yīng)該在固定的PH溶液中進行。260nm/280nm的比值范圍在1.9~2.1之間。<1.9,說明有蛋白質(zhì)殘留;>2.1,說明RN
美國密理博細胞電阻儀使用方法2021/03/28
上海旦鼎對MERS00002型細胞電阻電壓歐姆儀使用方法簡要闡述:操作簡要說明注意:充電時不要使用儀表進行測量!在所有操作前需斷開充電電源。1.校正電阻儀STX04電極插入儀表,打開電源,模式置于歐姆檔,儀表若顯示1000Ω為正常無需調(diào)整,不是用螺絲刀調(diào)節(jié)RAdj使儀表讀數(shù)為1000Ω.模式置于毫伏檔,儀表讀數(shù)為0.2.平衡電極測量電壓時需先平衡電極。STX01電極插入儀表,關(guān)閉電源,模式置于歐姆檔,使用PBS,0.15MNaCl或0.1MKCl溶液進行平衡,針對不同的儲存方法有不同的平衡時間。
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