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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
ELISA酶結(jié)合物的制備的過(guò)程2020/04/08
ELISA酶結(jié)合物的制備免疫酶技術(shù)(immunoenzymatictechnique)又稱酶免疫測(cè)定法,是繼免疫熒光技術(shù)和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的又一種免疫標(biāo)記技術(shù)。它是把抗原抗體的特異性反應(yīng)和酶的催化作用相結(jié)合而建立的。該技術(shù)通過(guò)化學(xué)方法將酶與抗體或抗抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)記物,這些酶標(biāo)記物仍保持免疫學(xué)活性和酶的活性,然后將它與相應(yīng)的抗體或抗原起反應(yīng),形成酶標(biāo)記復(fù)合物,結(jié)合在免疫復(fù)合物上的酶,在遇到相應(yīng)的底物時(shí),則催化底物產(chǎn)生水解、氧化或還原等反應(yīng),而可溶性或不溶性有色物質(zhì)。然后根據(jù)顯色的深淺來(lái)
ELISA試劑盒怎么加樣血清標(biāo)本2020/03/31
在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶聯(lián)絡(luò)物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。ELISA試劑盒也可在板孔中參與稀釋液,然后在微型轟動(dòng)器上轟動(dòng)1分鐘以保證混和。通常說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超越一星期測(cè)定的需低溫冰存??捎米鱁LISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞
如何使用ELISA試劑盒進(jìn)行定量和定性試驗(yàn)2020/03/23
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。一、ELISA試劑盒定量測(cè)試EL
如何避免ELISA試劑盒白介素類酶標(biāo)板情況失效2020/03/18
ELISA試劑盒白介素類的保質(zhì)期通常都是在一年,假設(shè)保存妥當(dāng)?shù)脑?,不?huì)出現(xiàn)疑問(wèn)的。但不要重復(fù)凍融。當(dāng)然假設(shè)是正常的DAS-ELISA查看試劑盒等,應(yīng)當(dāng)放在4℃支配冰箱保存。建議ELISA試劑盒凍結(jié)后一次用完。已開(kāi)封或許運(yùn)用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,ELISA查看試劑盒開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免濕潤(rùn)。但要留心的是,假設(shè)將ELISA試劑盒剛從冰箱里邊拿出來(lái)就當(dāng)即運(yùn)用的話,也許會(huì)影響,其直接的效果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的查看出現(xiàn)假陰性。建議:先從冰箱中拿出來(lái),在
,ELISA試劑盒的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在哪些地方2020/03/12
ELISA試劑盒的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在哪些地方?下面我們來(lái)具體看看?1、特異性高:進(jìn)行了廣泛的非特異性排查,避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差。2、精度高:通過(guò)加標(biāo)回收率和線性稀釋實(shí)驗(yàn),確保樣本值的準(zhǔn)確性,度高于同類產(chǎn)品(較低的CV%)。3、重復(fù)性好:lot-to-lot檢測(cè)確保zui小的批間差異。4、可靠性強(qiáng):經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的阻止假陽(yáng)性和假陰性試驗(yàn)結(jié)果。5、標(biāo)準(zhǔn)曲線:在保證數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測(cè)范圍,以滿足需求。6、價(jià)格低廉:*RD試劑,國(guó)內(nèi)分裝配置,大大減少了客戶因?yàn)閮r(jià)格高而必須
實(shí)驗(yàn)必看—干燥可以更方便的幫助細(xì)胞保存2020/03/09
俄勒岡州立大學(xué)的研究人員邁出了重要的一步,朝著更方便,更便宜的方式保護(hù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行體外受精,物種保護(hù),細(xì)胞治療和其他目的。該方法是干燥-從細(xì)胞中除去水-并且顯示出作為通過(guò)液氮冷凍保存的替代方案的希望。液氮的沸點(diǎn)為零下320華氏度,而干燥的細(xì)胞可能存儲(chǔ)在傳統(tǒng)的冰柜或冰箱中?!霸谝旱袃?chǔ)存成本相對(duì)較高,運(yùn)輸過(guò)程中對(duì)低溫的要求也不方便,”俄勒岡州立大學(xué)生物工程學(xué)副教授AdamHiggins說(shuō)。使細(xì)胞穩(wěn)定以便以干燥狀態(tài)儲(chǔ)存需要除去足夠的水,使剩余的基質(zhì)形成非結(jié)晶的玻璃狀固體?!案稍锝鉀Q方案*重要的性
戳這里—了解細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件2020/03/03
細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下,使其生長(zhǎng)繁殖,并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個(gè)細(xì)胞,也可以是細(xì)胞群。以下是細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件:一、合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。二、血清目前,大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一,含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種生長(zhǎng)因子及其它營(yíng)養(yǎng)成分。三、無(wú)菌無(wú)毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒的操
辨別生物試劑質(zhì)量好壞技巧2020/02/25
生物試劑的種類繁多,面對(duì)琳瑯滿目的產(chǎn)品市場(chǎng)我們?cè)撊绾畏直嫫滟|(zhì)量的好壞呢?1、實(shí)驗(yàn)純(LR,黃標(biāo)簽):主成分含量高,純度較差,雜質(zhì)含量不做選擇,只適用于一般化學(xué)實(shí)驗(yàn)和合成制備。2、當(dāng)量試劑(3N、4N、5N):主成分含量分別為99.9%、99.99%、99.999%以上。3、指示劑和染色劑(ID或SR,紫標(biāo)簽):要求有*的靈敏度。4、光譜純:主要成分純度為99.99%5、質(zhì)量級(jí)別:優(yōu)級(jí)純(GR,綠標(biāo)簽):主成分含量很高、純度很高,適用于精確分析和研究工作,有的可作為基準(zhǔn)物質(zhì)。6、分析純(AR,紅標(biāo)
血清正確保存方法2020/02/21
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝xue塊收縮,其周?chē)龀鲋S色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無(wú)纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿
科研血清的常見(jiàn)問(wèn)題及解答!2020/01/14
科研血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護(hù)作用。科研血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。
上海恒遠(yuǎn)教您怎樣保存各類抗體2020/01/13
抗體的保存是否得當(dāng),會(huì)直接影響抗體的活性和使用效果,那針對(duì)不同類的抗體我們應(yīng)怎樣保存呢?下面上海恒遠(yuǎn)教你各類抗體的保存方法。1、抗體濃度抗體濃度過(guò)低(2、多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而,一旦抗體被純化后,儲(chǔ)存在50%的甘油中于-20℃保存,即使沒(méi)有凍融,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進(jìn)程仍然非常緩慢。即使沒(méi)有甘油,只要你*凍融,抗體也可以存儲(chǔ)在-20℃幾年甚至幾十年。另一個(gè)重要的事情是,該抗體濃度應(yīng)高于1毫克/毫升,因?yàn)橄〉目贵w容易失去活性而且容易造成物理吸
解析血液標(biāo)本的收集注意事項(xiàng)2020/01/02
有些生理要素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒動(dòng)搖、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些乃至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的收集應(yīng)盡量防止生理要素?cái)嚁_,以條件共同為宜,如無(wú)法防止,應(yīng)在標(biāo)本上注明該要素。1.外周血一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位替代。對(duì)燒傷患者,可選擇皮膚完整處采血。因?yàn)椴糠盅簯T例檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類等)受生理要素影響動(dòng)搖過(guò)大,比較時(shí)宜使條件盡量共同。涉及到體內(nèi)出、凝血功用的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),出血時(shí)刻或凝血時(shí)刻等
酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟有哪幾種?2019/12/31
選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的酶聯(lián)免疫試劑盒,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣可能原因:1.過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));2.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。.酶聯(lián)免疫試劑盒血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;3.手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間酶聯(lián)免疫試劑盒解決辦法:1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,酶聯(lián)免疫試劑盒采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間
化學(xué)試劑、藥品的貯存試液的管理2019/12/26
(一)化學(xué)試劑、藥品的貯存1.化學(xué)藥品貯存室應(yīng)符合有關(guān)安全規(guī)定,有防火、防爆等安全措施,室內(nèi)應(yīng)干燥、通風(fēng)良好,溫度一般不超過(guò)28℃,照明應(yīng)是防爆型。2.化學(xué)藥品貯存室應(yīng)由專人保管,并有嚴(yán)格的賬目和管理制度。3.室內(nèi)應(yīng)備有消防器材。4.化學(xué)藥品應(yīng)按類存放,特別是化學(xué)危險(xiǎn)品按其特性單獨(dú)存放。(二)化學(xué)試液的管理1.裝有試液的試劑瓶應(yīng)放在藥品柜內(nèi),放在架上的試劑和溶液要避光、避熱。2.試液瓶附近勿放置發(fā)熱設(shè)備如電爐等。3.試液瓶?jī)?nèi)液面上的內(nèi)壁凝聚水珠的,使用前要震搖均勻。4.每次取用試液后要隨手改好瓶
甲醛溶液說(shuō)明書(shū)2019/12/24
福爾馬林″〈formalin;福美林〉是"甲醛″〈formaldehyde〉(HCHO))的水溶液,外觀無(wú)色透明,具有腐蝕性,且因內(nèi)含的甲醛揮發(fā)性很強(qiáng),開(kāi)瓶后一下子就會(huì)散發(fā)出強(qiáng)烈的刺鼻味道。甲醛含量為35%至40%(一般是37%)的水溶液,也加入10%~15%的甲醇防止聚合。具有防腐、消毒和漂白的功能。不同領(lǐng)域有不同作用。性狀:有刺激性氣味的無(wú)色液體。甲醛是一種高刺激性有毒氣體,具易燃性及腐蝕性,在一般空氣里均能測(cè)出微量,相當(dāng)易溶于水,上通常利用化工方法氧化甲醇而得。甲醇氧化之后可得甲醛,而甲醛
細(xì)胞培養(yǎng)耗材的選擇方法2019/12/19
細(xì)胞培養(yǎng)耗材的選擇:從大小來(lái)講,細(xì)胞培養(yǎng)瓶約可分為約600ml,250ml,50ml和25ml的,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。600ml、300ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),50ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。當(dāng)然還有其他如圓形的等,都可根據(jù)個(gè)人愛(ài)好和實(shí)驗(yàn)需要自己選擇。根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)瓶制作材料的不同,也有玻璃和塑料之分,這里談一點(diǎn)
ELISA試劑盒之酶標(biāo)基本步驟是什么?2019/12/16
ELISA試劑盒中的酶標(biāo)用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:1.包被用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為110μgml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml4℃過(guò)夜。次日棄去孔內(nèi)溶液用洗滌緩沖液洗3次每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌下同)。2.加樣加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體于各反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育
正常菌群對(duì)人體有哪些影響?2019/12/13
正常菌群有許多重要的生理功能:1、如菌群之間生物的拮抗作用,正常菌群在人體某一特定位粘附,定植和繁殖,形成一層菌膜屏障。通過(guò)拮抗作用,抑制并排斥過(guò)路菌群的入侵和群集,調(diào)整人體與微生物之間的平衡狀態(tài)。2、免疫作用,正常菌群能刺激宿主產(chǎn)生免疫及清除功能。3、排毒作用,如雙岐桿菌能使腸道過(guò)多的革蘭氏陰性桿菌下降到正常水平,減少內(nèi)毒素的吸收。4、抗腫瘤作用,能降解、清除體內(nèi)的致癌因子,激活體內(nèi)的抗腫瘤細(xì)胞因子等。5、抗衰老作用。人體腸道的正常微生物,如雙岐桿菌,乳酸桿菌等能合成多種人體生長(zhǎng)發(fā)育必須的維生
免疫系統(tǒng)對(duì)抗疾病的關(guān)鍵蛋白2019/12/12
一個(gè)科學(xué)家小組發(fā)現(xiàn),一個(gè)好的免疫系統(tǒng)依賴免疫細(xì)胞中一個(gè)關(guān)鍵的“能源生產(chǎn)”蛋白,對(duì)疫苗和疾病產(chǎn)生免疫力。這個(gè)蛋白稱為HuR(人抗原R),是控制B細(xì)胞代謝的關(guān)鍵,B細(xì)胞生產(chǎn)對(duì)抗感染和接種后形成長(zhǎng)期免疫力至關(guān)重要的抗體。研究表明,去除HuR可阻止B細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和功能。稱為B細(xì)胞的免疫細(xì)胞可成熟地響應(yīng)疫苗或暴露新的疾病,是免疫力的一項(xiàng)重要原則。HuR‘管理’一組基因,這組基因可確定B細(xì)胞產(chǎn)生多少能量,稱為代謝率。我們發(fā)現(xiàn),沒(méi)有HuR來(lái)指導(dǎo)它們,這些關(guān)鍵的代謝酶基因就不再能指導(dǎo)B細(xì)胞使其生產(chǎn)功能所需的能
原裝ELISA試劑盒普遍存在的問(wèn)題2019/12/09
一、原裝ELISA試劑盒普遍存在的問(wèn)題所謂原裝,就是指一件產(chǎn)品,或者事物,是原廠生產(chǎn),并非由委外或其他授權(quán)的廠家聯(lián)合組裝而成的。目前存在較多的生產(chǎn)條件不完善,生產(chǎn)技術(shù)不過(guò)硬的廠家,不斷受委于某些生產(chǎn)產(chǎn)品的零部件,或貼牌,或合資生產(chǎn),但由于自身的原因,導(dǎo)致終產(chǎn)品總體性參差不齊,所以消費(fèi)者總在心里面渴望對(duì)“原裝ELISA試劑盒”的渴望??傁M苓x擇到,性能/品質(zhì)等各方面都比較好的“原裝”產(chǎn)品。原裝ELISA試劑盒主要影響免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開(kāi)優(yōu)
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