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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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ELISA實驗的核心三要素：不可-或缺的三大試劑2025/03/14
一、ELISA基本原理ELISA通過抗原-抗體的特異性結(jié)合，利用酶催化底物顯色反應(yīng)進(jìn)行定量或定性分析。常見的類型包括直接法、夾心法和競爭法，但其核心步驟均依賴于以下三類關(guān)鍵試劑。二、核心試劑一：包被抗體/抗原——實驗的“基石”作用：作為固相載體（微孔板）的固定化分子，捕獲目標(biāo)物。純度與活性：高純度避免交叉反應(yīng)，確保結(jié)合效率（建議使用單克隆抗體）。包被濃度優(yōu)化：預(yù)實驗確定最佳濃度（通常1-10μg/mL），濃度過高易導(dǎo)致空間位阻。緩沖液選擇：碳酸鹽緩沖液（pH9.6）常用，避免含BSA或Tween
小鼠同型半胱氨酸（Hcy）ELISA實驗說明2025/03/06
檢測范圍0.8μmol/L-20μmol/L使用目的本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中同型半胱氨酸（Hcy）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠同型半胱氨酸（Hcy）水平。用純化的小鼠同型半胱氨酸（Hcy）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入同型半胱氨酸（Hcy），再與HRP標(biāo)記的同型半胱氨酸（Hcy）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色
ELISA試劑盒樣本處理方法2025/02/28
?一、核心處理流程??1.樣本類型與預(yù)處理??樣本類型?處理方法（步驟）?關(guān)鍵注意事項?血清全血靜置30分鐘（室溫），離心2000×g10分鐘（4℃），取上清避免溶血；避免反復(fù)凍融（最多3次）?血漿?抗凝全血（EDTA/肝素）離心3000×g15分鐘（4℃），取上層血漿抗凝劑需與試劑盒兼容（詳見說明書）?細(xì)胞上清直接離心1000×g5分鐘去除細(xì)胞碎片，上清分裝保存避免細(xì)胞裂解污染（可能干擾檢測）?組織勻漿組織剪碎后液氮研磨，按比例加入PBS（含蛋白酶抑制劑）勻漿，離心12000×g20分鐘取上清
抗體及其用途2025/02/19
一、概念抗體，也被稱為免疫球蛋白，是一類由漿細(xì)胞分泌的大型Y形蛋白質(zhì)。它們主要存在于脊椎動物的血液、組織液等體液中，以及B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面?？贵w的核心功能是特異性識別并結(jié)合抗原，即外來病原體（如細(xì)菌、病毒）或異常細(xì)胞，從而啟動一系列的免疫反應(yīng)以清除這些有害物質(zhì)?？贵w具有高度特異性，即每一種抗體只能識別并結(jié)合特定的抗原，這種特性確保了免疫反應(yīng)的精準(zhǔn)性和有效性。此外，抗體還具有多種生物活性，如中和病原體毒素、激活補(bǔ)體系統(tǒng)、標(biāo)記病原體以便吞噬細(xì)胞識別和清除等。二、抗體試劑的多樣化用途1.免疫組化實驗在
大鼠氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)ELISA實驗說明2025/02/10
檢測范圍：0.2μmol/L-9μmol/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)水平。用純化的大鼠氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)，再與HRP標(biāo)記的氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的
人脂聯(lián)素（ADP）ELISA實驗說明2025/01/20
檢測范圍80pg/ml-2000pg/ml使用目的本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中脂聯(lián)素（ADP）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人脂聯(lián)素（ADP）水平。用純化的人脂聯(lián)素（ADP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入脂聯(lián)素（ADP），再與HRP標(biāo)記的脂聯(lián)素（ADP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脂聯(lián)素（ADP）呈正相
小鼠I型α干擾素(IFN-αI)ELISA實驗說明2025/01/15
檢測范圍1.5pg/ml-50pg/ml使用目的本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中I型α干擾素(IFN-αI)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠I型α干擾素(IFN-αI)水平。用純化的小鼠I型α干擾素(IFN-αI)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入I型α干擾素(IFN-αI)，再與HRP標(biāo)記的I型α干擾素(IFN-αI)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作
兔免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA實驗說明2025/01/09
檢測范圍5μg/ml-260μg/ml使用目的本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白G2(IgG2)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中兔免疫球蛋白G2(IgG2)水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白G2(IgG2)，再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白G2(IgG2)呈正相關(guān)
小鼠脂褐質(zhì)（Lipofuscin）ELISA實驗說明2025/01/03
檢測范圍0.2ng/ml-10ng/ml使用目的本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中脂褐質(zhì)（Lipofuscin）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠脂褐質(zhì)（Lipofuscin）水平。用純化的小鼠脂褐質(zhì)（Lipofuscin）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入脂褐質(zhì)（Lipofuscin），再與HRP標(biāo)記的脂褐質(zhì)（Lipofuscin）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，
牛流行熱病毒抗體（EFV-Ab）ELISA實驗說明2024/12/26
檢測范圍5ng/L-160ng/L使用目的本試劑盒用于測定牛血清，血漿及相關(guān)液體樣本中流行熱病毒抗體（EFV-Ab）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中牛流行熱病毒抗體（EFV-Ab）水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入流行熱病毒抗體（EFV-Ab），再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的流行熱病毒抗體（EFV-A
病毒中和實驗2024/12/19
病毒中和實驗是一種重要的免疫學(xué)技術(shù)，用于評估抗體能否中和病毒的感染性。這種實驗不僅具有高度的特異性和敏感性，而且是病毒學(xué)研究中不可-或缺的工具。一、實驗原理病毒中和實驗基于特異性抗病毒抗體（中和抗體）與病毒結(jié)合后，使病毒失去吸附和穿入宿主細(xì)胞的能力，從而抑制病毒的復(fù)制和感染過程。中和抗體與病毒的結(jié)合類似于化學(xué)中的酸堿中和反應(yīng)，因此得名。這種中和作用不僅具有嚴(yán)格的種、型特異性，還表現(xiàn)出量的特性，即一定量的病毒必須有相應(yīng)數(shù)量的中和抗體才能被完-全中和。二、實驗方法病毒中和實驗的方法主要包括簡單定性試
斑馬魚丙二醛（MDA）ELISA 實驗說明2024/12/12
檢測范圍0.1nmol/ml-6nmol/ml使用目的本試劑盒用于測定斑馬魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中丙二醛（MDA）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中斑馬魚丙二醛（MDA）水平。用純化的斑馬魚丙二醛（MDA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛（MDA），再與HRP標(biāo)記的丙二醛（MDA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的丙二醛
人糖鏈抗原153（CA153）ELISA 實驗說明2024/12/06
檢測范圍0.5U/ml-18U/ml使用目的本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中糖鏈抗原153（CA153）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人糖鏈抗原153（CA153）水平。用純化的人糖鏈抗原153（CA153）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入糖鏈抗原153（CA153），再與HRP標(biāo)記的糖鏈抗原153（CA153）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成
影響酶活性的條件及酶在ELISA檢測中的步驟2024/11/29
1.溫度溫度是影響酶活性的關(guān)鍵因素之一。在一定范圍內(nèi)，隨著溫度升高，酶活性增強(qiáng)，到達(dá)最適溫度時，酶活性最-強(qiáng)。超過最適溫度，酶活性會迅速降低，因為高溫會導(dǎo)致酶分子變性，從而失去催化活性。相反，低溫會減緩酶促反應(yīng)速率，但酶分子本身并未變性，溫度恢復(fù)后酶活性可逐漸恢復(fù)。2.pH值pH值對酶活性同樣具有顯著影響。每種酶都有其最佳pH范圍，在此范圍內(nèi)酶活性最-強(qiáng)。pH值的變化可能通過改變酶的電荷狀態(tài)來影響其三維結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致酶活性降低甚至失活。因此，在進(jìn)行酶促反應(yīng)時，需要精確調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的pH值，以確保
小鼠β-半乳糖苷酶（β-gal） ELISA 實驗說明2024/11/21
檢測范圍：3IU/L-150IU/L使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中β-半乳糖苷酶（β-gal）活性。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠β-半乳糖苷酶（β-gal）水平。用純化的小鼠β-半乳糖苷酶（β-gal）體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β-半乳糖苷酶（β-gal），再與HRP標(biāo)記的β-半乳糖苷酶（β-gal）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下
噬菌體技術(shù)的定義、應(yīng)用及ELISA檢測方法2024/11/14
?一、噬菌體的定義?噬菌體（Phage），又稱為細(xì)菌病毒，是專門感染細(xì)菌、真菌、藻類、放線菌或螺旋體等微生物的病毒總稱。噬菌體具有嚴(yán)格的宿主特異性，這意味著它們只能感染特定的微生物種類。噬菌體由核酸和蛋白質(zhì)組成，體積微小但結(jié)構(gòu)復(fù)雜，是病毒中最為普遍和分布最-廣的群體之一。它們通常在一些充滿細(xì)菌群落的地方，如泥土、動物的腸道等，被發(fā)現(xiàn)和存在?。二、噬菌體的應(yīng)用?1.?細(xì)菌鑒定與分型?：噬菌體具有高度的種、型特異性，即一種噬菌體只能裂解和它相應(yīng)的某種細(xì)菌的某一型。因此，噬菌體被廣泛用于細(xì)菌的鑒定和分
花青素的定義、應(yīng)用及ELISA檢測方法2024/11/08
一、花青素的定義花青素（Anthocyanin），又稱花色素，是一類廣泛存在于植物中的水溶性天然色素，屬于生物類黃酮物質(zhì)。它是花色苷水解后得到的有顏色的苷元，決定了許多植物花朵、果實、葉片和種子的顏色變化，使這些植物能夠展現(xiàn)出從紅色、紫色到藍(lán)色的豐富色澤?；ㄇ嗨氐幕窘Y(jié)構(gòu)為3,5,7-羥基-2-苯基苯并吡喃，其結(jié)構(gòu)中R1和R2碳位上的取代基不同，形成了多種不同的花青素種類，包括天竺葵色素、矢車菊色素、飛燕草色素等?。二、花青素的應(yīng)用1.食品著色花青素因其鮮艷的色彩和穩(wěn)定性，被廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)中
AAV的定義、方法及應(yīng)用2024/10/30
一、AAV的定義?AAV是一種單鏈DNA缺陷型病毒，屬于微小病毒科。其基因組DNA小于5kb，無包膜，外形為裸露的二十面體顆粒。AAV不能獨立復(fù)制，只有在輔助病毒（如腺病毒、單純皰疹病毒等）存在時，才能進(jìn)行復(fù)制和溶細(xì)胞性感染。AAV的基因組兩端為末端反向重復(fù)序列（ITR），中間基因組編碼兩個主要蛋白：Cap（衣殼蛋白）和Rep（復(fù)制白）。ITR對于病毒的復(fù)制和包裝具有決定性作用。二、AAV的生產(chǎn)方法AAV的生產(chǎn)工藝通常涉及多個步驟，包括質(zhì)粒構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)、病毒包裝、收集和純化等。以下是AAV生產(chǎn)
蛋白質(zhì)純化的定義、方法及操作步驟2024/10/23
一、蛋白質(zhì)純化的定義蛋白質(zhì)純化是指利用蛋白質(zhì)之間的相似性和差異性，通過一系列物理化學(xué)手段，從復(fù)雜的生物樣品中分離出目標(biāo)蛋白質(zhì)的過程。這一過程要求去除大部分雜質(zhì)，同時保持蛋白質(zhì)的天然活性和結(jié)構(gòu)完整性。二、蛋白質(zhì)純化的方法蛋白質(zhì)純化方法多種多樣，通常根據(jù)蛋白質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)（如分子量、電荷、疏水性和特異性結(jié)合能力等）來選擇合適的方法。以下是一些常用的蛋白質(zhì)純化方法：?鹽析法?：通過在蛋白質(zhì)溶液中加入高濃度的鹽（如硫酸銨），使蛋白質(zhì)因溶解度降低而沉淀析出。這種方法簡單有效，但需注意鹽濃度和pH值的控制
人E3泛素連接酶(DTX3L) ELISA實驗說明2024/10/14
檢測范圍：4pg/ml-220pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中E3泛素連接酶(DTX3L)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人E3泛素連接酶(DTX3L)水平。用純化的人E3泛素連接酶(DTX3L)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入E3泛素連接酶(DTX3L)，再與HRP標(biāo)記的E3泛素連接酶(DTX3L)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過充分洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)
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