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影響酶活性的條件及酶在ELISA檢測中的步驟2024/11/29

1.溫度溫度是影響酶活性的關(guān)鍵因素之一。在一定范圍內(nèi)，隨著溫度升高，酶活性增強，到達最適溫度時，酶活性最-強。超過最適溫度，酶活性會迅速降低，因為高溫會導致酶分子變性，從而失去催化活性。相反，低溫會減緩酶促反應速率，但酶分子本身并未變性，溫度恢復后酶活性可逐漸恢復。2.pH值pH值對酶活性同樣具有顯著影響。每種酶都有其最佳pH范圍，在此范圍內(nèi)酶活性最-強。pH值的變化可能通過改變酶的電荷狀態(tài)來影響其三維結(jié)構(gòu)，從而導致酶活性降低甚至失活。因此，在進行酶促反應時，需要精確調(diào)節(jié)反應體系的pH值，以確保

小鼠β-半乳糖苷酶（β-gal） ELISA 實驗說明2024/11/21

檢測范圍：3IU/L-150IU/L使用目的本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中β-半乳糖苷酶（β-gal）活性。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠β-半乳糖苷酶（β-gal）水平。用純化的小鼠β-半乳糖苷酶（β-gal）體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β-半乳糖苷酶（β-gal），再與HRP標記的β-半乳糖苷酶（β-gal）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)

蛋白質(zhì)純化的相關(guān)介紹2024/10/23

一、蛋白質(zhì)純化的定義蛋白質(zhì)純化是指利用蛋白質(zhì)之間的相似性和差異性，通過一系列物理化學手段，從復雜的生物樣品中分離出目標蛋白質(zhì)的過程。這一過程要求去除大部分雜質(zhì)，同時保持蛋白質(zhì)的天然活性和結(jié)構(gòu)完整性。二、蛋白質(zhì)純化的方法蛋白質(zhì)純化方法多種多樣，通常根據(jù)蛋白質(zhì)的物理化學性質(zhì)（如分子量、電荷、疏水性和特異性結(jié)合能力等）來選擇合適的方法。以下是一些常用的蛋白質(zhì)純化方法：?鹽析法?：通過在蛋白質(zhì)溶液中加入高濃度的鹽（如硫酸銨），使蛋白質(zhì)因溶解度降低而沉淀析出。這種方法簡單有效，但需注意鹽濃度和pH值的控制

人E3泛素連接酶(DTX3L) ELISA實驗說明2024/10/14

檢測范圍：4pg/ml-220pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中E3泛素連接酶(DTX3L)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人E3泛素連接酶(DTX3L)水平。用純化的人E3泛素連接酶(DTX3L)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入E3泛素連接酶(DTX3L)，再與HRP標記的E3泛素連接酶(DTX3L)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過充分洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)

常見的支原體檢測方法2024/10/10

支原體是一類無細胞壁、高度多形性的最小原核細胞型微生物，其大小通常在0.1-0.3微米之間。由于它們能形成絲狀與分支形狀，因此得名支原體。支原體廣泛存在于人和動物體內(nèi)，大多數(shù)種類并不致病，但在特定條件下，如機體免疫力下降時，部分支原體種類可能引發(fā)疾病。對人致病的支原體主要包括肺炎支原體、解脲支原體、人型支原體和生殖器支原體等，它們分別能引起呼吸道和泌尿生殖道的感染。常見的支原體檢測方法1.核酸檢測法核酸檢測法是目前支原體檢測中最敏感、最準確的方法之一。該方法利用PCR（聚合酶鏈式反應）技術(shù)擴增支

流式細胞術(shù)在生物實驗中的應用2024/09/25

流式細胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）作為一種先進的細胞分析技術(shù)，自其誕生以來，便在生物醫(yī)學研究領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用。該技術(shù)通過高速、多參數(shù)地分析單個細胞或微粒的熒光信號和散射光信號，為研究者提供了詳盡的細胞生物學信息，今天恒遠生物帶你認識細胞術(shù)在生物實驗中的具體應用。一、流式細胞術(shù)的基本原理流式細胞術(shù)的核心在于流式細胞儀的使用。該儀器利用鞘液包繞的樣品流通過激光束，激發(fā)細胞或微粒上的熒光染料，產(chǎn)生熒光信號和散射光信號。這些信號被光電倍增管接收并轉(zhuǎn)換為電信號，隨后通過計算機系統(tǒng)進行

?微生物內(nèi)毒素檢測方法及注意事項2024/09/19

微生物內(nèi)毒素，主要存在于革蘭氏陰性細菌的細胞壁中，是一種由脂多糖（LPS）構(gòu)成的毒性成分。當細菌死亡裂解后，內(nèi)毒素被釋放到環(huán)境中，可對人體健康產(chǎn)生嚴重影響，如引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素血癥甚至休克等。因此，對微生物內(nèi)毒素的準確檢測在醫(yī)藥、食品、生物制品等領(lǐng)域至關(guān)重要。恒遠生物為你介紹?微生物內(nèi)毒素檢測方法及注意事項。一、微生物內(nèi)毒素檢測方法1.鱟試驗法（LAL試驗）鱟試驗法是經(jīng)典的內(nèi)毒素檢測方法之一，利用鱟血細胞（變形細胞）對內(nèi)毒素的高度敏感性進行檢測。通過將待測樣品與鱟試劑混合，觀察鱟血細胞

?ELISA試劑盒在海藻糖檢測的應用2024/09/10

近年來，隨著檢測技術(shù)的發(fā)展，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）因其高靈敏度和特異性，在海藻糖檢測中得到了廣泛應用。今天恒遠生物為你介紹ELISA試劑盒在海藻糖檢測中的應用。?在海藻糖檢測中，ELISA試劑盒通常采用雙抗體夾心法。具體步驟如下：??準備工作?：將ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出，在室溫下平衡20-30分鐘。準備所需的試劑和器材，如酶標儀、高精度加樣器、洗板機等。?標準品稀釋?：按照說明書要求，將原倍標準品進行梯度稀釋，以制備不同濃度的標準品溶液。?加樣?：在酶標包被板上設(shè)置空白孔、標準

海藻糖在生物制品中的應用及檢測方法2024/09/04

海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖，是由兩個葡萄糖分子組成的一個非還原性雙糖，分子式為C12H22O11。海藻糖結(jié)構(gòu)式為α-D-吡喃葡糖基～α-D-吡喃葡糖苷，經(jīng)常以二水化合物存在，分子式為C12H22O11·2H2O。海藻糖結(jié)構(gòu)式海藻糖是一種典型應激代謝物，能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細胞表面形成特殊的保護膜，有效地保護生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞，從而維持生命體的生命過程和生物特征。海藻糖在生物制品中的應用1.凍干保護劑在生物制品的凍干過程中，海藻糖作為保護劑被廣泛應用。凍干保護機制

ELISA常見問題與解決方法2024/08/30

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附劑測定）是一種常用的生物化學技術(shù)，用于檢測樣品中的特定抗原或抗體。然而，在實際操作過程中，科研人員常常會遇到一些問題，影響實驗結(jié)果的準確性和可靠性，以下是一些可能出現(xiàn)的問題及其解決方法：一、陰性對照出現(xiàn)陽性結(jié)果：可能原因：試劑污染、操作不當、洗板不透徹。解決方法：更換新試劑，小心操作避免污染，確保洗板透徹。二、酶標板整體背景高：可能原因：抗體非特異性結(jié)合、底物溶液污染、孵育過程未避光。解決方法：使用封閉液封閉非特異性結(jié)合位點，適當稀釋底物溶液，確保孵育過程避光。三、復孔之

噬菌體試驗的基本方法2024/08/12

（一）噬菌體的分離和純化1.噬菌體的分離每份未處理的污水樣品取100mL，混合后，經(jīng)36±1℃培養(yǎng)14~24h，通過孔徑為0.45mm的薄膜濾器，檢查濾液中是否有噬菌體的存在。用斑點試驗法檢查噬菌體。2.單斑純化根據(jù)斑點試驗法的結(jié)果，估計濾液內(nèi)噬菌體的數(shù)量。將濾液按百倍稀釋法作兩次連續(xù)稀釋。即吸取0.02mL，稀釋在2mL肉湯內(nèi)，使成10-2；再吸取此稀釋液0.02mL，稀釋在2mL肉湯內(nèi)，使成10-4。（二）PFU和RTDPFU和RTD是噬菌體效價的計量單位。PFU是噬斑形成單位，表示有感染能

植物羥基肉桂?；D(zhuǎn)移酶（HCT）ELISA實驗說明2024/08/05

檢測范圍：5U/L-180U/L使用目的：本試劑盒用于測定植物組織，細胞及其它相關(guān)樣本中羥基肉桂?；D(zhuǎn)移酶（HCT）活性。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物羥基肉桂酰基轉(zhuǎn)移酶（HCT）水平。用純化的植物羥基肉桂?；D(zhuǎn)移酶（HCT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物羥基肉桂酰基轉(zhuǎn)移酶（HCT），再與HRP標記的羥基肉桂?；D(zhuǎn)移酶（HCT）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的

牛乳鐵蛋白(LTF)ELISA實驗說明2024/07/26

檢測范圍：2ng/ml-100ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中乳鐵蛋白(LTF)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛乳鐵蛋白(LTF)水平。用純化的牛乳鐵蛋白(LTF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入乳鐵蛋白(LTF)，再與HRP標記的乳鐵蛋白(LTF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乳鐵蛋白(L

常見細菌染色方法2024/07/17

常見的染色方法包括簡單染色、負染色、革蘭氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、莢膜染色。制備細菌染色片一般要經(jīng)過涂片、固定、染色、水洗、干燥等步驟，然后用顯微鏡甚至油鏡觀察。1.簡單染色：不同細菌或由于觀察者所側(cè)重觀察的內(nèi)容不同，所使用的染料也有差異，但簡單染色的方法是一樣的。先按照上述的制片方法制片，制成需要觀察的玻片后，使用相對應的染料滴加到玻片上的菌膜區(qū)域，以覆蓋菌膜為準。按照不同染料的要求，結(jié)合所觀察的內(nèi)容確定染色時間，染色時間到達時進行水洗，干燥等步驟。最后得到的玻片加蓋蓋玻片即可進行鏡檢。如

大鼠降鈣素原(PCT)ELISA實驗說明2024/07/12

檢測范圍：10ng/L-450ng/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠降鈣素原(PCT)水平。用純化的大鼠降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素原(PCT)，再與HRP標記的降鈣素原(PCT)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素原

凍融血清沉淀物是否會影響血清品質(zhì)2024/07/04

做細胞培養(yǎng)實驗經(jīng)常會用到血清，血清用不完我們會凍起來下次使用。但相信大家也會發(fā)現(xiàn)在融化血清過程中會出現(xiàn)白色的沉淀物質(zhì)，就會疑惑這種情況是否是血清出現(xiàn)問題。首先呢我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么，沉淀物包含纖維蛋白和脂蛋白，這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清（400g，1~2分鐘）或簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾）。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加

人腎素活性（PRA）ELISA實驗說明2024/06/25

檢測范圍：1IU/L-50IU/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清及相關(guān)液體樣本中腎素活性（PRA）濃度。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人腎素活性（PRA）水平。用純化的人腎素活性（PRA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腎素活性（PRA），再與HRP標記的腎素活性（PRA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎素活性（PRA）呈正相

恒遠生物|酶的提取、分離、活力檢測與純化2024/06/19

一、實驗目的酶是植物體內(nèi)具有催化作用的蛋白質(zhì)，植物體內(nèi)的生化反應一般都在酶的作用下進行，沒有酶的催化反應，植物生命也就停止了，因此對酶的研究是闡明生命現(xiàn)象本質(zhì)中十分重要的部分。研究酶先要將酶從組織中提取出來，加以分離、純化，不同的研究目的對酶制劑的純度要求也不同，有些工作只需粗的酶制劑即可，而有些工作則要求較純的酶制劑，根據(jù)不同情況區(qū)別對待。在酶的提取和純化過程中，自始至終都需要測定酶的活性，通過酶活性的測定以監(jiān)測酶的去向。二、實驗原理（1）酶的提取1.酶存在于動植物以及微生物的細胞的各個部位。

如何避免牛血清中的沉淀2024/06/13

細胞治療、生物藥的研發(fā)和生產(chǎn)，都離不開細胞培養(yǎng)技術(shù)，作為細胞的重要營養(yǎng)物質(zhì)，血清對細胞的生長繁殖起著重要作用，直接影響著生物制品的質(zhì)量和安全性，今天小編就給大家聊一聊血清的幾點小知識，幫助大家解決血清使用的一些困擾。1.血清絮狀物沉淀血清中的絮狀物由很多種原因造成，如最常見的是溫度的變化。沉淀的主要成分是纖維蛋白和脂蛋白，尤其在血清融化過程中容易凝集析出。2.絮狀物沉淀出現(xiàn)在血清中會影響血清本身的質(zhì)量嗎？血清中的絮狀物沉淀對血清的品質(zhì)并無影響，所以不用擔心，但要是血清用戶對血清中的絮狀物沉淀比較

恒遠生物|雞免疫球蛋白M(IgM)ELISA實驗說明2024/06/07

檢測范圍：150ng/ml-5000ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白M(IgM)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中雞免疫球蛋白M(IgM)水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白M(IgM)，再與HRP標記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白M(IgM)呈正相關(guān)。用酶