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傳代培養(yǎng)的方法及其注意事項(xiàng)2025/05/26: 傳代培養(yǎng)的方法及其注意事項(xiàng)原理細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng)，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。材料和試劑1.細(xì)胞：貼壁細(xì)胞株2.試劑：0.25％胰酶、1640培養(yǎng)基（含10％小牛血清）3.儀器和器材：倒置顯微鏡、培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等操作步驟1.吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2.向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液

WB實(shí)驗(yàn)過程中常見條帶問題分析解決方法2025/05/23: WB實(shí)驗(yàn)過程中常見條帶問題分析解決方法一、除了目的蛋白條帶外有很多條雜帶1.一抗抗體差異，部分不常見的分子抗體是多克隆的，雜帶比較多。2.一抗4℃孵育過夜時(shí)，如果一抗的孵育濃度較高，也容易出現(xiàn)雜帶。一般可按抗體說明書來設(shè)定稀釋濃度。3.二抗孵育時(shí)間過長(zhǎng)或者二抗?jié)舛冗^高也會(huì)導(dǎo)致雜帶增多。一般二抗規(guī)定的孵育時(shí)間為室溫1-2小時(shí)，一般1小時(shí)足矣，時(shí)間過長(zhǎng)易出現(xiàn)非特異性條帶；二抗一般1：10000稀釋。4.一抗與二抗之間TBST洗膜時(shí)間較短，次數(shù)較少，常規(guī)應(yīng)該洗三次，一次10min。5.在封閉，或是一抗

人原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞產(chǎn)品介紹2025/05/23: 人原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞ColonicMucosalEpithelialCells,結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-d010價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。其中上皮細(xì)胞主要位于粘膜層的上皮層，為單層柱狀上皮,含較多的杯狀細(xì)胞。結(jié)腸粘膜內(nèi)有杯狀細(xì)胞,

人原代小腸粘膜上皮細(xì)胞產(chǎn)品介紹2025/05/23: 人原代小腸粘膜上皮細(xì)胞SmallIntestinalMucosalEpithelialCells,小腸黏膜上皮細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-d007價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。一般根據(jù)形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化將小腸分為三段，分別為十二指腸，空腸和回腸。小腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層，由外向內(nèi)依次為：漿膜層，平滑肌層，粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層：靠近粘膜下層的是一層平滑肌，稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織，又稱為固有層。最

人原代胃成纖維細(xì)胞產(chǎn)品介紹2025/05/23: 人原代胃成纖維細(xì)胞GastricFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d006價(jià)格：6950.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經(jīng)、血管和淋巴管的分布。其中成纖維細(xì)胞主要分布于粘膜層中的固有層、黏膜下層和外膜層。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中最常見的細(xì)胞，電鏡下，成纖維細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和高爾基復(fù)合體，表明其具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。己知成纖維細(xì)胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細(xì)胞外基質(zhì)，在

人原代胃平滑肌細(xì)胞產(chǎn)品介紹2025/05/23: 人原代胃平滑肌細(xì)胞GastricSmoothMuscleCells貨號(hào)：HUM-YJ-d005價(jià)格：6930.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經(jīng)、血管和淋巴管的分布。其中平滑肌主要位于肌層中，胃的肌層發(fā)達(dá)，由內(nèi)斜、中環(huán)和外縱三層平滑肌構(gòu)成。其中，中層環(huán)形平滑肌在幽門處增厚，形成幽門括約肌，具有節(jié)制胃內(nèi)容物排出的作用。胃動(dòng)力性疾病的發(fā)生與平滑肌的收縮性的改變密切相關(guān)，現(xiàn)已有充分證據(jù)說明，Cajal間質(zhì)細(xì)胞是胃部運(yùn)動(dòng)的起搏細(xì)胞，

人原代食管成纖維細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/21: 人原代食管成纖維細(xì)胞EsophagealFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d003價(jià)格：6960.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述食管是咽和胃之間的消化管，哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，其中外膜主要都是成纖維細(xì)胞構(gòu)成的疏松結(jié)締組織，食管通過其與食管周圍的器官相連。黏膜下層,為厚的疏松結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)部包含食管腺，可分泌粘液排入食管腔。食管癌的發(fā)生中由正常成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的活化的癌相關(guān)纖維母細(xì)胞是腫瘤間質(zhì)微環(huán)

人原代直腸成纖維細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/21: 人原代直腸成纖維細(xì)胞RectalFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d020價(jià)格：7190.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述直腸是自肛緣起向上15cm的一段大腸。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸橫切面由內(nèi)到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，腫瘤間質(zhì)對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著重要作用。成纖維細(xì)胞是腫瘤間質(zhì)的重要組成成分,與腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。腫瘤間質(zhì)中成纖維細(xì)胞活化為癌相關(guān)成纖維細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞-

人原代肝癌細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/21: 人原代肝癌細(xì)胞PrimaryCellOfLiverCancer貨號(hào)：HUM-YJ-d030價(jià)格：8350.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述肝癌是一種惡性程度極高，預(yù)后極差的惡性腫瘤，雖然現(xiàn)代新的腫瘤化療、生物治療藥物和手段非常多，但由于其早期診斷率低、術(shù)后復(fù)發(fā)率高而預(yù)后差?；熓悄壳爸委煾伟┑闹饕o助手段之一。細(xì)胞特性1)細(xì)胞來源于人肝癌組織。2)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。3)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。推薦培養(yǎng)基我們推薦使用人原代肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基（產(chǎn)品編號(hào)：

人原代小腸成纖維細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/21: 人原代小腸成纖維細(xì)胞SmallIntestinalFibroblastsCells貨號(hào)：HUM-YJ-d009價(jià)格：6820.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。一般根據(jù)形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化將小腸分為三段，分別為十二指腸，空腸和回腸。小腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層，由外向內(nèi)依次為：漿膜層，平滑肌層，粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層：靠近粘膜下層的是一層平滑肌，稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織，又稱為固有層。最后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)

Western blot 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2025/05/21: Westernblot實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.配膠時(shí)，建議先加水，再加Tris-HCL緩沖液，并且每加一種液體就混勻膠液。加入的TEMED有毒，務(wù)必在通風(fēng)櫥中操作，并且加入后立即混勻、灌膠。丙烯酰胺未聚合的單體有神經(jīng)毒性，能夠經(jīng)皮膚吸收，需戴手套操作。2.AP作為催化劑能夠提供氧自由基促使丙烯酰胺單體聚合，TEMED作為加速劑能夠促進(jìn)AP釋放氧自由基，加速丙烯酰胺單體的聚合。空氣溫度較低時(shí)稍稍多加TEMED可加快膠的凝固速度，但要確保AP未變質(zhì)，否則無效。3.AP應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，否則變質(zhì)會(huì)導(dǎo)致膠不聚合。另外

人原代臍動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/19: 人原代臍動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-e017價(jià)格：7190.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述臍動(dòng)脈指的是在哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育過程中，從胎兒心臟發(fā)出，將胎兒體內(nèi)代謝廢物和代謝產(chǎn)生的二氧化碳運(yùn)送至胎盤，轉(zhuǎn)移至母體的動(dòng)脈。血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,當(dāng)血管受損傷時(shí),成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,

人原代臍靜脈血管周細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/19: 人原代臍靜脈血管周細(xì)胞,臍靜脈周細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-e016價(jià)格：7750.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述周細(xì)胞分布于臍靜脈的微血管系統(tǒng)中，調(diào)節(jié)血管形成、穩(wěn)定和功能的關(guān)鍵因素。周細(xì)胞典型的特征是有一個(gè)突出的核，核周圍胞漿較少，有許多平行于微血管長(zhǎng)軸的突起，這些突起逐漸變細(xì)并包繞微血管腔，起到對(duì)管腔的支持作用。同時(shí)，一個(gè)周細(xì)胞可以通過伸展的突起與微循環(huán)中的多個(gè)毛細(xì)血管接觸。此外，周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞間的相互作用在血管新生中具有極為重要的作用。細(xì)胞特性:1）組織來源于人的臍帶血管組織。2）細(xì)胞鑒定：平滑

WB實(shí)驗(yàn)注意細(xì)節(jié)2025/05/19: WB實(shí)驗(yàn)注意細(xì)節(jié)1.細(xì)胞樣本，收細(xì)胞時(shí)，PBS預(yù)冷。2.組織樣本在取材時(shí)離體組織應(yīng)盡快凍存，可以置于液氮中迅速冷凍，使用組織勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿時(shí)，一次研磨時(shí)間不宜過長(zhǎng)，40s左右即可，如研磨不充分，可再次研磨。3.PMSF應(yīng)注意搖勻至無結(jié)晶時(shí)方可使用。4.冰上裂解時(shí)，可以晃動(dòng)以使裂解充分。5.裂解后的樣本盡量分裝保存，避免反復(fù)凍融，盡快變性使用。6.BCA定量時(shí)盡量不使用96孔板最邊緣一圈（由于有些儀器邊緣效應(yīng)）。7.樣本可以根據(jù)具體情況稀釋合適的倍數(shù)再進(jìn)行定量，以免超出標(biāo)曲范圍。8.BCA定量時(shí)，

人原代臍血DC細(xì)胞性能特點(diǎn)2025/05/19: 人原代臍血DC細(xì)胞HumancordbloodDCcells,人臍帶血DC細(xì)胞貨號(hào)：HUM-YJ-e010價(jià)格：9650.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述樹突狀細(xì)胞（Dendriticcells,DC）是機(jī)體功能最強(qiáng)的專職抗原遞呈細(xì)胞，它能高效地?cái)z取、加工處理和遞呈抗原，未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。DC的來源有兩條途徑：①髓樣干細(xì)胞在GM-CSF的刺激下分化為DC，稱為髓樣DC，也稱DCl，與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞；

細(xì)胞培養(yǎng)關(guān)鍵事項(xiàng)2025/05/19: 細(xì)胞培養(yǎng)關(guān)鍵事項(xiàng)1.如何選用培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)?？傊?，選MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，各種目的無血清培養(yǎng)的選是AIMV培養(yǎng)基（SFM）。在開始進(jìn)行新的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，可以參考下表所列的條件：2.為什么要熱滅活血清？加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在進(jìn)行免疫學(xué)研究、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使

WB常見問題及對(duì)策（條帶缺失、信號(hào)弱）等2025/05/16: WB常見問題及對(duì)策（條帶缺失、信號(hào)弱）等一、不好看的條帶1.不好看的條帶大多是因?yàn)榈鞍酌附到猓斐蓷l帶出現(xiàn)在奇怪的位置。建議使用已經(jīng)保存在冰上的新鮮樣品或換抗體。2.如果蛋白質(zhì)位置比較高，重新加熱樣本可以幫助打破蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。3.模糊的條帶經(jīng)常是因?yàn)檗D(zhuǎn)染過程中電壓過高或氣泡，應(yīng)確保凝膠在較低的電壓下運(yùn)行，以及轉(zhuǎn)染的三明治避免產(chǎn)生氣泡。另外，換新的電泳緩沖液可能也可以幫助解決問題。4.條帶不平滑，可能是由于阻力低導(dǎo)致穿過蛋白質(zhì)凝膠的速度過快，因此要選用質(zhì)量較好的樣品。5.白色條帶是由于蛋白質(zhì)或抗體

人原代胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)品介紹2025/05/16: 人原代胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞PlacentalChorionicTrophoblastCells貨號(hào)：HUM-YJ-e003價(jià)格：7020.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述絨毛膜是構(gòu)成胎盤的胎兒部分，占妊娠胎盤的主要部分。妊娠足月胎盤的絨毛滋養(yǎng)層主要由合體滋養(yǎng)細(xì)胞組成，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞僅散在可見，滋養(yǎng)層的內(nèi)層為基底膜。滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖、功能調(diào)節(jié)失常與多種妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系；絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞是構(gòu)成胎盤屏障的主要組織結(jié)構(gòu)，而胎盤是妊娠期間具有物質(zhì)交換與代謝，分泌激素和防御等功能的重要器官。細(xì)胞特性1

人原代臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/16: 人原代臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞UmbilicalArteryEndothelialCells貨號(hào)：HUM-YJ-e006價(jià)格：6600.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒

人原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞技術(shù)參數(shù)2025/05/15: 人原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞UmbilicalVeinEndothelialCells貨號(hào)：HUM-YJ-e005價(jià)格：6800.0規(guī)格：1*105細(xì)胞詳述臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。由

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