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上海乾思生物科技有限公司
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細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇-細(xì)胞分布不均及解決辦法2014/04/21
問:我的細(xì)胞接種培養(yǎng)板,細(xì)胞總是聚集在周邊部分,該如何處理???我看園子里有的戰(zhàn)友的細(xì)胞卻是聚集在中間,是不是板子的質(zhì)量問題???答:請(qǐng)問你的細(xì)胞是如何混勻的?是滴管吹打還是振蕩培養(yǎng)板?如果是后者,而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話,很有可能由于離心力的作用使細(xì)胞甩到周邊部分,導(dǎo)致細(xì)胞中間少,四周多!自己可是試試!周邊一般是相對(duì)會(huì)多一點(diǎn),但是中間的數(shù)量也不會(huì)很少啊~~鋪板的時(shí)候我也沒有特異去振蕩培養(yǎng)板。大概是板子的質(zhì)量問題吧或者是不是鋪板時(shí)候的細(xì)胞密度太低了?我用的corning的板。一個(gè)好辦法:在你培養(yǎng)種板之前,
細(xì)胞培養(yǎng)板的密閉和污染問題2014/03/27
細(xì)胞培養(yǎng)板的加樣和操作:細(xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則,各項(xiàng)操作要保證規(guī)范、科學(xué),不對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)造成額外的影響。這其中zui常見的問題就是如何保證加樣后細(xì)胞的均勻和盡量減少換液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響。問:96,24孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松,這樣是方便了透氣,但是細(xì)菌、霉菌等污染物會(huì)不會(huì)也隨著溜進(jìn)去呢?答:1.蓋子很松,屬于半開放培養(yǎng),這樣的目的是透氣(實(shí)際上是為了使培養(yǎng)皿外的co2能夠與培養(yǎng)皿充分交換,維持培養(yǎng)基的pH值)。2.凡事有利必有弊,這樣當(dāng)然增加了污染的可能性。此外
如何選購細(xì)胞培養(yǎng)板?2014/03/19
細(xì)胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V細(xì)胞培養(yǎng)板型),根據(jù)材質(zhì)的不同的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?。一下為大家介紹細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇:(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),無論是貼壁和懸浮細(xì)胞,一般選用平底板。測(cè)吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì),標(biāo)示
多孔培養(yǎng)板邊緣效應(yīng)的產(chǎn)生和解決方法的探討2014/02/28
在進(jìn)行多孔板尤其是96和384孔板細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),你可能會(huì)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞在孔板中的位置會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),特別是處在周邊以及四個(gè)角的孔中細(xì)胞通常會(huì)表現(xiàn)出分布不均等現(xiàn)象,也就是常說的邊緣效應(yīng)(edgeeffects)。這對(duì)我們的實(shí)驗(yàn)造成了很多的不便,特別是對(duì)于藥物篩選相關(guān)研究更是無法回避。由于多孔板中四邊孔zui直接與外界環(huán)境接觸,受環(huán)境影響也就zui大。關(guān)于邊緣效應(yīng)的成因,現(xiàn)有的觀點(diǎn)主要有以下兩點(diǎn):溫度效應(yīng)由于位置效應(yīng),當(dāng)我們將鋪好的細(xì)胞由室溫轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱時(shí),周邊孔中的細(xì)胞更傾向于聚集到相對(duì)溫暖的
培養(yǎng)板為什么需要顛倒著放置?2014/02/24
在細(xì)菌培養(yǎng)板的存儲(chǔ)以及細(xì)菌培養(yǎng)的過程中,培養(yǎng)板總是需要顛倒放置。“培養(yǎng)板為什么需要顛倒著放置”也是很多同學(xué)常問的問題,那么這培養(yǎng)板顛倒放置背后的原因是什么呢?以下為你闡釋:培養(yǎng)板存儲(chǔ)過程中倒置的原因未使用過的培養(yǎng)板在儲(chǔ)存時(shí)通常會(huì)顛倒著放置,這樣放置的目的是防止長(zhǎng)期存儲(chǔ)過程中的蒸發(fā)作用。蒸發(fā)作用可影響培養(yǎng)板的濕度,從而影響細(xì)菌的生長(zhǎng)效率,并可能導(dǎo)致其他非期望微生物如霉菌的滋生。培養(yǎng)板孵育過程中倒置的原因一旦培養(yǎng)板在經(jīng)菌液涂板過后,需要正置十分鐘左右,稍微蒸騰掉部分水分。但在此后的孵育過程中,培養(yǎng)板
血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)原理及操作流程2014/01/15
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中,細(xì)胞計(jì)數(shù)是一項(xiàng)基本功,對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)條件以及需要定量的實(shí)驗(yàn)來說都非常關(guān)鍵。這里介紹使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的經(jīng)典方法以及中間一些需要注意的細(xì)節(jié)。制備細(xì)胞懸液:對(duì)于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,我們需要首先使用胰酶消化的方法使細(xì)胞從培養(yǎng)皿表面脫落根據(jù)需要加入合適體積的培養(yǎng)基,將細(xì)胞進(jìn)行中和及稀釋,以得到均質(zhì)的細(xì)胞懸液。要求盡可能將細(xì)胞吹打散開,不要?dú)埩羧魏渭?xì)胞團(tuán)準(zhǔn)備血細(xì)胞計(jì)數(shù)器:使用70%乙醇將蓋玻片和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器清潔干凈將將蓋玻片潤(rùn)濕(使用水或呼一口氣,目的是使蓋玻片與血細(xì)胞計(jì)數(shù)器接觸更
如何選擇離心管和離心瓶2013/12/27
離心管主要用玻璃、塑料和不銹鋼制成,塑料離心管常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中PP管性能較好。塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。不銹鋼管強(qiáng)度大,不變形,能抗熱,抗凍,抗化學(xué)腐蝕。但用時(shí)也應(yīng)避免接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品,如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等。塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必須蓋嚴(yán),倒置不漏液。管蓋有三種作用:①防止樣品外泄。用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí),這點(diǎn)尤其重要。②防止樣品揮發(fā)。③支持離心管
粒度分析儀在色釉料中的應(yīng)用2013/12/16
粒度分析儀的推廣應(yīng)用對(duì)推動(dòng)我國色釉料行業(yè)的技術(shù)進(jìn)步顯然是有積極作用的。在推廣的過程中,也遇到一些問題。zui早用來測(cè)量粒度的設(shè)備是標(biāo)準(zhǔn)篩,但是它只能測(cè)量一個(gè)或幾個(gè)粒徑點(diǎn)上的篩余量,不能給出詳細(xì)的粒度分布;并且測(cè)試的勞動(dòng)強(qiáng)度大、精度低。后來發(fā)展到用沉降式粒度儀測(cè)量,它雖然能夠測(cè)得詳細(xì)的粒度分布,但操作比較繁瑣、重復(fù)性較差、測(cè)量范圍窄。的方法是激光粒度分析儀。由于它具有測(cè)量范圍寬、重復(fù)性好、速度快、操作容易等顯著優(yōu)點(diǎn),非常適合色釉料行業(yè)的使用。一、與傳統(tǒng)篩分法結(jié)果的對(duì)比色釉料行業(yè)傳統(tǒng)上用篩分法來檢測(cè)
細(xì)胞計(jì)數(shù)板的操作步驟與注意事項(xiàng)2013/11/30
細(xì)胞計(jì)數(shù)法是用來計(jì)數(shù)細(xì)胞懸液中細(xì)胞數(shù)量的一種方法。一般利用計(jì)數(shù)板(血球計(jì)數(shù)板)進(jìn)行。即可用于分離(散)細(xì)胞培養(yǎng)接種前計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量,也可用于對(duì)培養(yǎng)物的細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。不論計(jì)數(shù)的對(duì)象如何,均須制備分散的細(xì)胞懸液。一、細(xì)胞計(jì)數(shù)板的操作步驟1、制備細(xì)胞懸液:對(duì)于懸液培養(yǎng)的細(xì)胞,可直接進(jìn)行下面的步驟2(計(jì)數(shù)與計(jì)算過程)。如果計(jì)數(shù)對(duì)象為貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,首先需將培養(yǎng)物按如下步驟制備成細(xì)胞懸液。1)、終止培養(yǎng),將培養(yǎng)液吸出,用PBS洗培養(yǎng)物一次。2)、給培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入1ml0.25%胰蛋白酶
乾思生物特別推薦美國PSS粒度分析儀2013/11/25
粒度儀是用物理的方法測(cè)試固體顆粒的大小和分布的一種儀器。根據(jù)測(cè)試原理的不同分為沉降式粒度儀、沉降天平、激光粒度儀、光學(xué)顆粒計(jì)數(shù)器、電阻式顆粒計(jì)數(shù)器、顆粒圖像分析儀等。美國PSS公司擁有4個(gè)系列顆粒檢測(cè)分析產(chǎn)品。Nicomp380系列粒度儀采用動(dòng)態(tài)光散射原理檢測(cè)分析亞微米顆粒的粒度和粒度分布,核心技術(shù)包括基于數(shù)字信號(hào)處理(DSP)的相關(guān)器及其擁有技術(shù)的更加準(zhǔn)確數(shù)學(xué)算法。強(qiáng)大的相關(guān)器和的算法使得NiComp380系列粒度儀的粒度分布解析度在同類產(chǎn)品中遙遙。NiComp380系列粒度儀采用模塊化設(shè)計(jì),
乾思為您介紹移液管的使用方法2013/10/31
移液管有各種形狀,zui普通的是中部吹成圓柱形,圓柱形以上及以下為較細(xì)的管頸,下部的管頸拉尖,上部的管頸刻有一環(huán)狀刻度。移液管為精密轉(zhuǎn)移一定體積溶液時(shí)用的。1.使用時(shí),應(yīng)先將移液管洗凈,自然瀝干,并用待量取的溶液少許蕩洗3次。2.然后以右手拇指及中指捏住管頸標(biāo)線以上的地方,將移液管插入供試品溶液液面下約1cm,不應(yīng)伸入太多,以免管尖外壁粘有溶液過多,也不應(yīng)伸入太少,以免液面下降后而吸空。這時(shí),左手拿橡皮吸球(一般用60ml洗耳球)輕輕將溶液吸上,眼睛注意正在上升的液面位置,移液管應(yīng)隨容器內(nèi)液面下
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備電動(dòng)磁力攪拌器使用的正確方式2013/10/16
磁力攪拌器混合機(jī)顧名思義是上升到攪拌匯總功能,磁力,當(dāng)然是使用電和磁攪拌努力工作作為驅(qū)動(dòng)力,但有一個(gè)電磁攪拌、電磁攪拌的zui小尺寸像膠囊藥丸,大的像一個(gè)筷子。磁攪拌功率越大,孩子越大,需要必須配備大功率磁力攪拌器,但是有些客戶想邊加熱,攪拌,然后磁加熱攪拌器、大功率磁力加熱攪拌器,數(shù)字顯示大功率磁力加熱攪拌器,多工位數(shù)顯大功率磁力加熱攪拌器等,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過數(shù)以百計(jì)的擴(kuò)展產(chǎn)品。電磁力攪拌器適用于液體粘度不是很大,或固液混合物的工作原理,利用磁場(chǎng)和渦流,具有低工作電壓、功率大、噪音低、運(yùn)轉(zhuǎn)平穩(wěn)、安全、
3種材質(zhì)離心管各有特點(diǎn)2013/09/26
離心管按照材料一般可以分為:塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管1、塑料離心管塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)防止樣品外泄是很重要的一點(diǎn);管蓋還有一個(gè)作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形。在挑選這一點(diǎn)的時(shí)候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密,在試驗(yàn)時(shí)能否蓋嚴(yán),以到達(dá)倒置不漏液;我們都知道在塑料離心管中,常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸
離心管與離心技術(shù)2013/09/16
一、離心管英文名稱:centrifugaltube定義:管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋。所屬學(xué)科:機(jī)械工程(一級(jí)學(xué)科);實(shí)驗(yàn)室儀器和裝置(二級(jí)學(xué)科);實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)-實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)零部件及附件(三級(jí)學(xué)科)二、離心管的種類:按體積大小一般分為:大量離心管(500mL、250mL)普通離心管(50mL、15mL)微量離心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL)按照材料一般可以分為塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管1.塑料離心管塑料離心管主要常用材料有聚乙烯(PE)、聚碳酸酯(PC)、聚丙烯(P
細(xì)胞凍存的原理及步驟2013/08/09
細(xì)胞凍存0、概要細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),而且細(xì)胞一旦離開活體開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。一、細(xì)胞凍存原理細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以zui大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,
血球計(jì)數(shù)板的誤差來源2013/07/29
計(jì)算規(guī)則血細(xì)胞計(jì)數(shù)的誤差分別來源于技術(shù)誤差和固有誤差。其中由于操作人員采血不順利,器材處理、使用不當(dāng),稀釋不準(zhǔn)確,細(xì)胞識(shí)別錯(cuò)誤等因素所造成的誤差屬技術(shù)誤差;而由于儀器(計(jì)數(shù)板、蓋片、吸管等)不夠準(zhǔn)確與精密帶來的誤差稱儀器誤差,由于細(xì)胞分布不均勻等因素帶來的細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差屬于分布誤差或計(jì)數(shù)域誤差(filederror)。儀器誤差和分布誤差統(tǒng)稱為固有誤差或系統(tǒng)誤差。技術(shù)誤差和儀器誤差可通過規(guī)范操作、提高熟練程度和校正儀器而避免或糾正,但細(xì)胞分布誤差卻難于*消除。因此,搞好紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制一般需采用
血球計(jì)數(shù)板的使用方法2013/07/12
血球計(jì)數(shù)板被用以對(duì)人體內(nèi)紅、白血球進(jìn)行顯微計(jì)數(shù)之用,也常用于計(jì)算一些細(xì)菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量,是一種常見的生物學(xué)工具。如何使用血球計(jì)數(shù)板。以下做了7點(diǎn)說明:1.視待測(cè)菌懸液濃度,加無菌水適當(dāng)稀釋(斜面一般稀釋100倍),以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。2.取潔凈的血球計(jì)數(shù)板一塊,在計(jì)數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。3.將菌懸液搖勻,用滴管吸取少許,從計(jì)數(shù)板中間平臺(tái)兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴(不宜過多),讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計(jì)數(shù)區(qū),勿使氣泡產(chǎn)生,并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。也可
移液器的滅菌和消毒2013/06/25
分子生物技術(shù)的基礎(chǔ)工具移液器的使用中,消毒與滅菌的概念常常是被混用的。兩者差別在于:消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范圍內(nèi),達(dá)到無害化水平,而滅菌則要求消滅所有活菌。滅菌的處理要求高于消毒。1.化學(xué)消毒。簡(jiǎn)單說來,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。這對(duì)于所有移液器品牌而言都應(yīng)該是可以做到的,否則其外殼的材質(zhì)也太差了!2.紫外線消毒。用紫外線照射移液器的表面,通過破壞細(xì)胞的DNA結(jié)構(gòu)來達(dá)到消毒的目的。紫外線消毒的時(shí)間取決于輻射強(qiáng)度和細(xì)菌對(duì)紫外線的抵抗力的強(qiáng)弱。多數(shù)品牌的移液器是可以
移液器的使用小技巧2013/06/13
移液器的的操作是有一些竅門的,如何選擇量程和控制吸液方面的操作是困擾操作新手的幾個(gè)常見問題,下面是重點(diǎn)注意事項(xiàng):1.安裝吸頭:在移液器的套柄zui下端進(jìn)入吸頭后,如果在吸頭盒內(nèi)操作,在輕輕向下壓的同時(shí)左右晃動(dòng)移液器或稍稍轉(zhuǎn)動(dòng)移液器(僅單道移液器可旋轉(zhuǎn))1-2秒即可;如果是用散裝吸頭,在用手把吸頭往移液器方向輕輕施壓的同時(shí)稍稍轉(zhuǎn)動(dòng)吸頭1-2秒即可。如果這種操作不能達(dá)到理想的密封性,就需要檢查吸頭和移液器了。2.選擇量程:總體來看,移液器的可用量程范圍是移液器zui大量程的10-100%。根據(jù)操作經(jīng)
酶標(biāo)儀的常見故障分析與解決2013/05/16
一、常見故障1、打印機(jī)不工作v酶標(biāo)儀后部DIL開關(guān)設(shè)置不正確。v酶標(biāo)儀內(nèi)置打印機(jī)開關(guān)處于開的位置。在總參數(shù)中設(shè)置內(nèi)置打印機(jī)為關(guān)。v打印機(jī)無紙或紙未裝好,請(qǐng)裝好打印紙。v打印機(jī)未聯(lián)機(jī),請(qǐng)確認(rèn)打印機(jī)上的聯(lián)機(jī)鍵已聯(lián)機(jī)v打印機(jī)接口接錯(cuò)(接在了計(jì)算機(jī)接口上了)。應(yīng)將打印機(jī)接在DIL開關(guān)正下方的打印機(jī)接口上,RS-232接口為計(jì)算機(jī)接口。v打印機(jī)聯(lián)線有問題:有些配備的新打印機(jī)聯(lián)線仍有問題,請(qǐng)確保打印機(jī)聯(lián)線無問題。v打印機(jī)有開機(jī)順序,需先開打印機(jī),后開儀器;有的需先開儀器,后開打印機(jī)。2、調(diào)不出所編輯程序如在
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