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2019
05-20

離子色譜儀的原理和操作要點
離子色譜是液相色譜的一種，是分析離子的一種液相色譜方法。離子色譜法作為傳統(tǒng)的分離分析方法，具有分析速度快、檢測靈敏度高、選擇性好，能同時分離多種離子并能將一些非離子物質(zhì)轉(zhuǎn)變成離子性物質(zhì)進行測定等優(yōu)點。離子色譜儀的基本原理：分離的原理是基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進行的可逆交換和分析物溶質(zhì)對交換劑親和力的差別而被分離。適用于親水性陰、陽離子的分離。離子色譜儀的操作要點：1．使用環(huán)境條件：相對濕度：﹤85%，工作環(huán)境溫度：15—30℃，電源電壓：220±10%，
2019
05-14

C4反相色譜柱的優(yōu)點介紹
C4反相色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的反相色譜柱。使用3微米粒徑的硅膠填料，優(yōu)化了孔徑，固定相配體的烷基鏈長及表面鍵合密度，可實現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析。使用短柱可以在高流速下實現(xiàn)快速分析。C4反相色譜柱的優(yōu)點介紹：1、定量結(jié)果更準(zhǔn)確，包括純度分析和穩(wěn)定性分析。2、靈敏度更高，檢測下限更低，對低濃度雜質(zhì)有更強的檢測能力。3、分離度更好，更有利于相鄰色譜峰的分離。4、色譜柱間重現(xiàn)性：指同一批次合成的填料之間的重現(xiàn)性。（1）柱床填充質(zhì)量控制：1）理論塔板數(shù)。2）色譜峰對稱。3）柱反壓。（2）
2019
05-06

體積排阻色譜（SEC）的分離原理介紹
體積排阻色譜（SEC）是一項使用水相洗脫液基于尺寸分離蛋白質(zhì)、寡核苷酸和其它復(fù)雜生物聚合物的技術(shù)，也被稱為凝膠色譜、凝膠過濾色譜或凝膠滲透色譜，它是快速分離不同分子量混合物的有效方法。體積排阻色譜的分離原理：分子的體積排阻，樣品組分和固定相之間原則上不存在相互作用，色譜柱的固定相是具有不同孔徑的多孔凝膠，只讓臨界直徑小于凝膠孔開度的分子進入（保留），其孔徑大于溶劑分子，所以溶劑分子可以自由地出入。高聚物分子在溶液中呈無規(guī)則線團，線團的體積和分子量有一定的線性關(guān)系，對不同大小的溶質(zhì)分子可以滲透到不
2019
04-29

C18反相色譜柱的操作與清洗
C18反相液相色譜柱是一種常用的色譜柱產(chǎn)品，主要由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成，被廣泛用于多個領(lǐng)域中。在c18反相液相色譜柱的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長柱子的使用壽命非常重要。使用時間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化，如不采取措施，將會縮短色譜柱的使用壽命，影響工作效率，并造成一定的經(jīng)濟損失。C18反相色譜柱操作步驟：1.平衡開始時將流速緩慢地提高，用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑流速如果
2019
04-23

尺寸排阻色譜柱的特點與清洗方法
尺寸排阻色譜（SEC）是一種分析技術(shù)，可以按尺寸并根據(jù)從填有多孔硅膠的色譜柱中洗脫的情況來分離已溶解的大分子，用于測量蛋白質(zhì)分子量、結(jié)構(gòu)、大小及構(gòu)成。當(dāng)SEC與光散射、粘度計以及濃度檢測器相結(jié)合（稱為三重檢測）時，可測量分子量、分子大小和特性粘度，并生成關(guān)于大分子結(jié)構(gòu)、構(gòu)象聚集與支化方面的信息。通過使用SEC來測量分子量和其他特性，可以對蛋白質(zhì)、合成聚合物和多糖類之類的天然聚合物等分子進行表征。尺寸排阻色譜的特點：1.保留時間是分子尺寸的函數(shù)，有可能提供分子結(jié)構(gòu)的某些信息。2.保留時間短，譜峰窄
2019
04-19

高溫凝膠滲透色譜儀的性能優(yōu)勢
凝膠滲透色譜不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定，而且可以用來分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物。凝膠滲透色譜的分離原理：讓被測量的高聚物溶液通過一根內(nèi)裝不同孔徑的色譜柱，柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙（較大）和粒子內(nèi)的通孔（較?。．?dāng)聚合物溶液流經(jīng)色譜柱時，較大的分子被排除在粒子的小孔之外，只能從粒子間的間隙通過，速率較快；而較小的分子可以進入粒子中的小孔，通過的速率要慢得多。經(jīng)過一定長度的色譜柱，分子根據(jù)相對分子質(zhì)量被分開，相對分子質(zhì)量大的在前面（即淋洗時間短），相對分子質(zhì)量小的在
2019
04-15

影響離子交換色譜保留行為的因素有哪些？
離子交換色譜是利用離子交換原理和液相色譜技術(shù)的結(jié)合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法。凡在溶液中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法進行分離。離子交換色譜技術(shù)常被用于蛋白質(zhì)、寡核苷酸、多肽、病毒、噬菌體、多糖等的純化。離子交換色譜的基本原理：離子交換色譜是蛋白純化技術(shù)中心常用的一種純化方法，其原理是指分離物質(zhì)所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結(jié)合，這種帶電分子和固定相之間的結(jié)合作用是可逆的，在改變PH或者用逐漸增加離子強度的緩沖液洗脫時，離子交換劑上結(jié)合的物質(zhì)可與洗脫液中的離子
2019
04-08

親水作用色譜HILIC具有哪些優(yōu)勢特點？
親水作用色譜（HILIC）是反相色譜的重要補充，用于改善強極性物質(zhì)的保留和分離選擇性。HILIC模式下化合物的保留行為與正相色譜類似，而且由于HILIC使用含水流動相，有效解決了正相色譜中水溶性物質(zhì)不溶于非水流動相的難題。親水色譜柱的產(chǎn)品特點：●采用高度可控的單分子層形成和封尾技術(shù)●采用*的化學(xué)健合技術(shù)可使HILIC固定相的表面具有酸性、中性和堿性的性質(zhì)●采用孔徑可控的超純硅膠●高的化學(xué)穩(wěn)定性，低固定相流失●色譜柱內(nèi)徑75µm到30mm，長度1cm到30cm●可提供克到千克級的填料●pH穩(wěn)定范圍
2019
04-02

氨基柱的正相和反相使用說明
氨基柱，全稱氨丙基鍵合硅膠色譜柱，不僅可以用于正反相還可以應(yīng)用于離子交換（弱陰離子交換柱）中。但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中，例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99：1)中。一、正相使用新柱子可直接用流動相。推薦先用正己烷-乙腈(99：1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再根據(jù)流動相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積，后換成流動相。正相使用時，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析;流動相要*脫氣
2019
02-25

生物分析色譜柱的選擇
生物分析色譜柱的選擇生物分析色譜柱就是填裝有固定相的柱管。宏觀上，色譜柱是由柱管和填料組成，那么生物分析色譜柱的選擇就要從填料和柱管規(guī)格來選擇。1.填料的選擇：即根據(jù)化合物的屬性選擇適合其分離的色譜模式及固定相。2.柱規(guī)格選擇：生物分析色譜柱規(guī)格的選擇要從內(nèi)徑和柱長兩個指標(biāo)來考慮。不同內(nèi)徑的色譜柱用途：2.1mm和3.0mm內(nèi)徑色譜柱一般用于超液相色譜分析UPLC（分析時間短，效率高）；4.6mm內(nèi)徑色譜柱一般用于常規(guī)液相色譜分析HPLC；10.0-300mm內(nèi)徑色譜柱一般用于制備色譜PreHP
2019
02-22

凝膠色譜柱主要用于相對分子質(zhì)量分布測試
凝膠色譜柱主要用于相對分子質(zhì)量分布測試凝膠色譜技術(shù)是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜柱主要用于高聚物的相對分子質(zhì)量分級分析以及相對分子質(zhì)量分布測試。目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,不但應(yīng)用于科學(xué)實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。根據(jù)分離的對象是水溶性的化合物還是有機溶劑可溶物,凝膠色譜柱又可分為凝膠過濾色譜(GFC
2019
01-15

凝膠滲透色譜儀氣路管的清洗
凝膠滲透色譜儀(GPC)，又稱排阻色譜法或凝膠過濾色譜法。它采用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)、多孔性的固定相，利用試樣的組分分子對固定相的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)內(nèi)部的滲透性的差異來分離各組分。是一種穩(wěn)定的分離方法。不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定，而且可以用來分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物。應(yīng)用：主要應(yīng)用在生物化學(xué)和高分子領(lǐng)域，具體如分子量的測定、成分分析、回收料的評估等。凝膠色譜的常用固定相有多孔型的半剛性凝膠和剛性凝膠兩大類。半剛性凝膠是以二乙烯基苯交聯(lián)的聚苯乙烯，剛性凝膠則多采用剛性硅膠，流動相可以使用水和
2018
11-15

一個合格的離子色譜柱應(yīng)該關(guān)注的基本參數(shù)
離子色譜柱是實驗室常用的一種色譜耗材，那么我們在做選擇色譜柱的時候，怎么選擇它的固定相呢，因為色譜柱的固定相關(guān)系到我們分離樣品的準(zhǔn)確性。選擇正確的固定相是確保氣相色譜方法成功的關(guān)鍵參數(shù)。因為分析物分子與流動相之間的相互作用幾乎可以忽略不計，柱溫度和分析物與固定相之間的相互作用是支配分離選擇性的關(guān)鍵。使用溫度將進一步在氣相色譜的理論和儀器/氣相色譜程序升溫章節(jié)中進行討論。色譜固定相選擇的*原則是“相似相溶”原理，分離極性分析物時需要一個極性的固定相，反之亦然。固定相選擇的技巧已知(或經(jīng)驗性證實)，
2018
11-10

親水性色譜柱的特點介紹
親水性色譜柱在用于分離疏水性化合物與常規(guī)的C18相具有相似的選擇性，所以也可以作為一種通用C18柱使用。親水性色譜柱是專為親水性和極性化合物具有更強的保留能力和選擇性而設(shè)計的。典型的應(yīng)用是對生物分子、代謝物和藥物降解產(chǎn)物如有機酸、水溶性維生素、低聚糖、氨基酸以及小分子縮氨酸和小分子核苷等進行分離。親水性色譜柱特點介紹：1．適度的表面覆蓋率和*的封尾2．對酸性、堿性和中性化合物具有良好的峰形3．親水性色譜柱能與100％水流動相條件兼容4．在高含水量的流動相中，對有機酸、縮氨酸、核苷和水溶性維他命等
2018
11-10

老化離子色譜柱是氣相應(yīng)用的一項常見工作
離子色譜柱老化的目的在于去除固定相表面不穩(wěn)定的固定相流失碎片或污染物，讓離子色譜柱為即將進行的分析做好準(zhǔn)備。通常，新柱初次使用、離子色譜柱放置一段時間后再次使用、或離子色譜柱受到一定污染或損傷后都需要進行適當(dāng)?shù)睦匣?。離子色譜柱老化的一般步驟：1.首先使所有加熱部位（如進樣口和檢測器）降溫；2.將切割好的毛細(xì)管柱接到進樣口，開通載氣并保持適當(dāng)流速，將色譜柱出口端插入盛有甲醇或乙醇的燒杯，正常情況下應(yīng)能夠觀察有連續(xù)的氣泡冒出，否則應(yīng)及時檢查是否有漏氣、色譜柱斷裂、或進樣口參數(shù)設(shè)置；3.用6倍柱體積（
2018
10-26

反相色譜的介紹及其影響因素
反相色譜法以被測的高分子為固定相、以惰性氣體為流動相，為了測定需要，在流動相中加入一些探針分子，它們是揮發(fā)性的低分子。將探針分子注入氣化室氣化后，由載氣帶入色譜柱，測定它們在兩相中的分配，從而研究高分產(chǎn)的各種性質(zhì)，高分子與探針分子的相互作用以及高分子與高分子間的相互作用。反相色譜是迄今在液相色譜中應(yīng)用廣泛的技術(shù)，主要是因為它適用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相本質(zhì)上都是疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小程度來分離的，樣
2018
08-30

色譜柱的安裝和清洗
色譜柱的安裝1、請將液相色譜裝置中的流動相*置換后再連接色譜柱。并且*排出流路內(nèi)的空氣。2、裝置內(nèi)的液體和所使用的流動相不能相溶的情況下，請使用雙方都能相溶的液體做過渡。比如從水置換到氯仿的情況，就需要使用丙酮做過渡，才能*置換。3、將鹽溶液置換成有機溶劑的時候，需要通過純水、丙酮的順序來進行置換。相反，從有機溶劑轉(zhuǎn)換成鹽溶液的情況下，需要通過丙酮、純水的順序置換。4、不僅僅是泵，流動相流動的所有流路都必須進行置換。例如，注入樣品的情況，軟管內(nèi)的液體也需要置換。另外，如果使用壓力計等別的軟管的情
2018
08-02

離子色譜儀試驗時背景太高,是什么造成的?
離子色譜儀因其快速、、靈敏而成為許多實驗室分析陰離子的較好方法，如一次進樣，20min可連續(xù)測定μg/L～數(shù)mg/L數(shù)量級的F-、BrO3-、Cl-、NO2-、Br-、N03-、HPO4-和SO4-等多種陰離子，如果是基體簡單的試樣無需前處理，經(jīng)過濾后直接進樣。也正因為此，一旦儀器出現(xiàn)故障，會給使用者造成極大的不便。這就要求使用者了解一些關(guān)于儀器日常維護的知識，遇有故障時能夠正確的判斷并及時排除。離子色譜儀在工作中經(jīng)常遇到以下幾種情況：諸如背景高、噪聲大、泵頭堵塞，有氣泡、峰形不好、分離度下降等
2018
05-29

東曹生物詳解離子色譜儀的流動相
流動相（又稱為淋洗液）是離子色譜儀中容易忽略，也是容易出問題的地方。離子色譜儀使用較多的溶液就是流動相，如果流動相處理得當(dāng)，那么離子色譜中能夠減少一半以上的維修工作。離子色譜儀的流動相基本以水相體系為主，離子色譜的水一般建議使用高純水，如果僅僅為一般性實驗（如mg/L級別離子分析），則娃哈哈純凈水等也是可以使用的，但分析低含量（µg/L）級別的離子還是需要18.2MΩ/cm的高純水，有時候不能相信國產(chǎn)的某些純水機，其電導(dǎo)顯示有一定的誤差。如需要判斷水是否可以使用，可以以純凈水為流動相，不經(jīng)過色譜
2018
05-28

關(guān)于離子色譜柱的固定液涂漬要求說明
離子色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外，還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下，填料粒度20um時，干法填充制備柱較為合適；顆粒必須指出，離子色譜柱的獲得，裝填技術(shù)是重要環(huán)節(jié)，但根本問題還在于填料本身性能的優(yōu)劣，以及配套的色譜儀系統(tǒng)的的結(jié)構(gòu)是否合理。一根好的離子色譜柱不僅與選擇合適的固定液和擔(dān)體有重要關(guān)系，而且固定液能否在擔(dān)體表面上分布呈一層薄而均勻的膜，以及與固定相的填允情況有密切的關(guān)系。為了在擔(dān)體表面得到一層薄而均勻的液膜，固定液的涂漬一般采用靜態(tài)法。以靜態(tài)法涂漬固定液的過稈如下:根據(jù)需要稱取一定量

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