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上海喆圖科學(xué)儀器有限公司

20
  • 2024

    04-16

    細(xì)胞培養(yǎng)的三種常見問題及解決方案

    培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因:1.胰蛋白酶消化過度;2.支原體污染;3.培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解);4.細(xì)胞老化;5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法:1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物;3.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2;4.啟用新的保種細(xì)胞;5.調(diào)節(jié)最佳接種細(xì)胞濃度。懸浮細(xì)胞成簇可能原因:1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子;2.支原體污染;3.蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解;4.DNA污染。解決方法:1
  • 2024

    04-11

    常見的六種細(xì)菌接種方法優(yōu)缺點(diǎn)講解

    如何選擇細(xì)菌接種方法?細(xì)菌的接種方法有很多種,如劃線法、涂布法、傾注法、斜面接種法、液體培養(yǎng)基接種法、螺旋接種法等,其方法和應(yīng)用各有不同,小助手將一一解釋,以幫助實(shí)驗(yàn)人員選擇操作。一、劃線法用途:主要用于菌種分純,獲得單菌落。實(shí)驗(yàn)步驟:由接種環(huán)沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線(詳見圖1),微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,可在平板表面得到單菌落。優(yōu)點(diǎn):可以觀察菌落特征,對(duì)混合菌進(jìn)行
  • 2024

    04-11

    用二氧化碳培養(yǎng)箱做海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)

    海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1、儀器二氧化碳培養(yǎng)箱,解剖鏡,眼科鑷,眼科剪2、動(dòng)物新生鼠(SD大鼠)3、耗材DMEM/F12培養(yǎng)基、聚賴氨酸實(shí)驗(yàn)步驟:包被:培養(yǎng)前一天將培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶或皿用0.01%多聚賴氨酸包被過夜。第二天早上來吸除包被液在無菌超凈臺(tái)中自然晾干后放置于二氧化碳培養(yǎng)箱中備用。配制神經(jīng)元專用培養(yǎng)基(DMEM/F12培養(yǎng)基中添加1%谷氨酰胺,2%B27,1%雙抗)取腦:選取新生24h之內(nèi)的SD大鼠數(shù)只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,斷頭處死,無菌條件下分層剪開頭皮,顱骨,用彎鑷?yán)_腦區(qū)
  • 2024

    04-10

    小量質(zhì)粒DNA的提取之堿裂解法

    此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴(kuò)增、銀染序列分析。方法如下:1、接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞于2mlLB培養(yǎng)基2、37℃振蕩培養(yǎng)箱過夜3、取1.5ml菌體于Ep管,以4000rpm離心3min,棄上清液4、加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/LEDTApH8.0,25mM/LTris-HClpH8.0)充分混合5、加入0.2ml溶液II(0.2mM/LNaOH,1%SDS),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5min6、加入0.15ml預(yù)冷溶液III(5mol/
  • 2024

    04-10

    真空干燥箱做三聚氰胺實(shí)驗(yàn)

    三聚氰胺(C3H6N6)是一種有機(jī)化合物,因其化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有三個(gè)氰基(-CN)而得名。在實(shí)驗(yàn)中使用真空干燥箱進(jìn)行三聚氰胺實(shí)驗(yàn),可能是為了在低壓環(huán)境下除去三聚氰胺樣品中的水分,以獲得干燥的樣品。以下是一個(gè)簡化的實(shí)驗(yàn)步驟,但請(qǐng)注意,具體實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范和化學(xué)品操作指南。實(shí)驗(yàn)步驟:準(zhǔn)備:確保實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)良好,穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備,如實(shí)驗(yàn)服、手套、護(hù)目鏡等。稱量:準(zhǔn)確稱取一定量(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要確定)的三聚氰胺樣品。裝樣:將稱量好的三聚氰胺樣品放入干燥的試管或者稱量瓶中。預(yù)干燥:將裝有樣品的試管
  • 2024

    04-09

    一文了解箱式電阻爐的使用注意事項(xiàng)

    箱式電阻爐是一種常見的電爐形式,分為立式,臥式,分體式,一體式。使用溫度為1200度以下,1400度以下,1600度以下,1700度以下,分別以電阻絲、硅碳棒、硅鉬棒為發(fā)熱元件,根據(jù)需要可選擇,箱式電爐除通常在空氣中加熱外,還有可通氣氛和密封抽真空電爐,形式多樣。廣泛用于陶瓷、冶金、電子、玻璃、化工、機(jī)械、耐火材料、新材料開發(fā)、特種材料、建材等領(lǐng)域的生產(chǎn)及實(shí)驗(yàn)。箱式電阻爐使用注意事項(xiàng):1.使用時(shí)爐膛溫度不得超過額定爐溫,也不要長時(shí)間工作在額定溫度以上。2.工作環(huán)境條件為:溫度0~50℃,相對(duì)濕度
  • 2024

    04-08

    如何快速估算每次實(shí)驗(yàn)放幾只動(dòng)物?

    動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循實(shí)行“3R原則”,包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的替代、減少和優(yōu)化原則,其中減少即指盡量減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量。查閱文獻(xiàn),并未發(fā)現(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)目有絕對(duì)要求,但在減少的同時(shí),一定要滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。統(tǒng)計(jì)學(xué)上要求一般至少每組有6個(gè)可用數(shù)據(jù),才有意義。一般小鼠的每組一般不少于10只;一般大鼠每組不少于6只;大動(dòng)物等級(jí)越高,價(jià)格越貴,根據(jù)情況可適當(dāng)減少,但一般不能少于4-5只。作為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)者,我們不僅僅知其然,也要知其所以然1、為什么要進(jìn)行樣本量估算?科學(xué)性要求:使研究設(shè)計(jì)更加嚴(yán)謹(jǐn)。倫理學(xué)考慮:對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研
  • 2024

    04-08

    細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)

    細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)如下:1、當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到其生長密度高處時(shí)(一般腫瘤細(xì)胞為80-100%,原代細(xì)胞和干細(xì)胞為80-90%,有些細(xì)胞為40-50%,熟知所養(yǎng)細(xì)胞的生長密度極限),移除舊培養(yǎng)液;2、用PBS洗滌兩次(舊培養(yǎng)中的鈣離子會(huì)抑制胰酶的活性),加入1ml胰酶消化液(以T25培養(yǎng)瓶為例),立即蓋好蓋子,把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞漂起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液
  • 2024

    04-03

    TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡原理和經(jīng)驗(yàn)

    TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡原理和經(jīng)驗(yàn)細(xì)胞凋亡中,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。由此,TUNEL成為了檢測DNA片段化(細(xì)胞凋亡)的方法。TUNEL檢測:使用
  • 2024

    04-02

    如何使用馬弗爐融化金屬粉末?

    使用馬弗爐融化金屬粉末是在實(shí)驗(yàn)室或工業(yè)生產(chǎn)中常見的一種操作,需要遵循安全規(guī)程和科學(xué)的操作步驟。以下是一個(gè)基本的操作流程:準(zhǔn)備工作:在開始之前,確保馬弗爐已經(jīng)清潔,并預(yù)熱至所需的溫度。準(zhǔn)備金屬粉末,確認(rèn)其化學(xué)成分和純度,確保它適合在馬弗爐中融化。準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)娜诨ぞ撸缒突鹕谆騝rucible(坩堝)。裝載金屬粉末:將金屬粉末裝入耐火材料制成的坩堝中,注意不要裝得太滿,以免在融化過程中溢出。放入馬弗爐:輕輕地將裝有金屬粉末的坩堝放入馬弗爐內(nèi)。慢慢升降溫度的速度不可太快,以免金屬粉末濺出或者造成熱沖擊
  • 2024

    03-27

    免疫組化實(shí)驗(yàn)常見問題分析

    1.IHC實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯色過深一抗?jié)舛冗^高或孵育時(shí)間過長——降低一抗?jié)舛然驕p少孵育時(shí)間孵育溫度過高——選擇4℃或室溫孵育2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在非特異性顯色石蠟切片脫蠟——延長脫蠟時(shí)間蛋白封閉不充分——增加蛋白封閉時(shí)間組織富含內(nèi)源性生物素與過氧化物酶——使用相關(guān)試劑進(jìn)行封閉3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯色弱或無染色一抗?jié)舛冗^低或孵育時(shí)間過短——增加一抗?jié)舛然蜓娱L孵育時(shí)間組織中無目的抗原的表達(dá)一抗種屬來源與二抗不匹配注意事項(xiàng)切片脫蠟和水化要充分,加反應(yīng)液時(shí)要覆蓋組織充分;每次加液前甩干洗滌液,同時(shí)防止干片。一抗的沖洗原則:單
  • 2024

    03-27

    細(xì)胞培養(yǎng)板的選購技巧

    細(xì)胞培養(yǎng)板是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的重要工具,選擇適合的細(xì)胞培養(yǎng)板對(duì)于細(xì)胞的生長和實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有重要影響。本文將介紹一些選擇細(xì)胞培養(yǎng)板的關(guān)鍵因素,并提供一些應(yīng)用案例進(jìn)行說明。1.培養(yǎng)板材質(zhì):細(xì)胞培養(yǎng)板的材質(zhì)是一個(gè)重要的考慮因素。目前市場上主要有塑料和玻璃兩種材質(zhì)的培養(yǎng)板。塑料培養(yǎng)板價(jià)格較低且易于使用,而玻璃培養(yǎng)板具有更好的透明度和耐高溫的特性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,可以選擇適合的材質(zhì)。2.表面涂層:細(xì)胞培養(yǎng)板的表面涂層可以影響細(xì)胞黏附和增殖。常用的涂層包括凝膠體、膠原蛋白、明膠等。例如,凝膠體涂層可以增加細(xì)胞對(duì)基質(zhì)
  • 2024

    03-26

    微生物檢驗(yàn)中培養(yǎng)基制備的注意事項(xiàng)

    培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,因此對(duì)于微生物檢驗(yàn)而言,培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。培養(yǎng)基的主要作用有兩方面:①提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì);②培養(yǎng)基具有選擇性和差異性,可以選擇特定類型的細(xì)菌或真菌進(jìn)行培養(yǎng),并區(qū)分不同種類的微生物。因此,在微生物檢驗(yàn)中,必須對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制,只有優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基才能為微生物檢驗(yàn)提供精準(zhǔn)、可靠的檢測結(jié)果。培養(yǎng)基的概述培養(yǎng)基是用于保證微生物繁殖、鑒定、保持活力的物質(zhì),按照物理性質(zhì)可以分
  • 2024

    03-26

    海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

    海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1、儀器CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱,解剖鏡,眼科鑷,眼科剪2、動(dòng)物新生鼠(SD大鼠)3、耗材DMEM/F12培養(yǎng)基、聚賴氨酸實(shí)驗(yàn)步驟:包被:培養(yǎng)前一天將培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶或皿用0.01%多聚賴氨酸包被過夜。第二天早上來吸除包被液在無菌超凈臺(tái)中自然晾干后放置于CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中備用。配制神經(jīng)元專用培養(yǎng)基(DMEM/F12培養(yǎng)基中添加1%谷氨酰胺,2%B27,1%雙抗)取腦:選取新生24h之內(nèi)的SD大鼠數(shù)只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,斷頭處死,無菌條件下分層剪開頭皮,顱骨,用彎鑷?yán)_
  • 2024

    03-25

    關(guān)于細(xì)胞劃痕法的詳細(xì)介紹

    細(xì)胞劃痕(woundhealing)法是簡捷測定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)和修復(fù)能力的方法。一、原理在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上,用微量槍頭或其它硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,去除中央部分的細(xì)胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間,取出細(xì)胞培養(yǎng)板,在顯微鏡下觀察并拍照記錄特定位置細(xì)胞的生長遷移能力。通過不同分組之間的細(xì)胞對(duì)于劃痕區(qū)修復(fù)能力的不同,可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力的差別。二、步驟1、準(zhǔn)備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))2、流程:1.培
  • 2024

    03-25

    長期和短期保藏菌種的方法介紹

    菌種保藏是指保持微生物菌株的活力和遺傳性狀的技術(shù)。微生物在使用和傳代過程中容易發(fā)生污染、變異甚至死亡,因而常常造成菌種的衰退。菌種保藏的目的就是使菌株存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的活性和各種特征。菌種保藏的基本原理是使微生物的生命活動(dòng)處于半休眠狀態(tài),也就是將微生物的新陳代謝作用限制在低范圍內(nèi)。菌種保藏的方法很多,但原理大同小異。首先要挑選優(yōu)良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營養(yǎng)體;其次,根據(jù)其生理、生化性,人為創(chuàng)造低溫、干燥或缺氧等條件,抑制微生物的代謝作用,使其生命
  • 2024

    03-22

    箱式電阻爐在使用時(shí)如何確保安全用電?

    箱式電阻爐顧名思義,指形狀類似一個(gè)矩形箱體主要由爐體和控制箱兩大部分組成的設(shè)備,又稱馬弗爐、高溫馬弗爐,是一種通用的加熱設(shè)備。箱式電阻爐一般工作在自然氣氛條件下,多為內(nèi)加熱工作方式,采用耐火材料和保溫材料做爐襯。主要用于對(duì)工件進(jìn)行正火、退火、淬火等熱處理及其他加熱用途。箱式電阻爐和馬弗爐的區(qū)別在于:箱式電阻爐,的結(jié)構(gòu)如同一個(gè)電烤箱,只是體積大些,在1200度以下。因?yàn)榭煞藕芏嗉訜狍w,主要用于熱處理等生產(chǎn),大型部件產(chǎn)品溫度試驗(yàn)等。馬弗爐,通常做成桶狀,大多數(shù)采用高溫材料和加熱器件,最高溫度可達(dá)到2
  • 2024

    03-21

    什么事是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的儀器設(shè)備?

    在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學(xué)。通過研究生物大分子(核酸、蛋白質(zhì))的結(jié)構(gòu)、功能和生物合成等方面來闡明各種生命現(xiàn)象的本質(zhì)。研究內(nèi)容包括各種生命過程。比如光合作用、發(fā)育的分子機(jī)制、神經(jīng)活動(dòng)的機(jī)理、癌的發(fā)生等。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)包含了生物大分子制備和分析常用技術(shù)、蛋白質(zhì)與核酸的提取與分離、PCR技術(shù)、分子雜交與印跡技術(shù)、分子克隆技術(shù)、外源基因轉(zhuǎn)移技術(shù)、蛋白質(zhì)表達(dá)技術(shù)、分子標(biāo)記技術(shù)、分子改造技術(shù)、測序及人工合成技術(shù)、基因組學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)、生物芯片技術(shù)、生物信息學(xué)技術(shù)、RNA研究技術(shù)等。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
  • 2024

    03-21

    高溫馬弗爐快灰分和慢灰分的區(qū)別

    快灰分和慢灰分是煤炭分析中的兩個(gè)術(shù)語,它們描述了煤炭在加熱時(shí)失去可燃成分的過程。這一過程通常在一個(gè)被稱為灰分analyzer的設(shè)備中進(jìn)行,該設(shè)備按照規(guī)定的加熱速率對(duì)煤炭樣品進(jìn)行加熱??旎曳郑≦uickash):快灰分是指在高溫馬弗爐較快的加熱速度下進(jìn)行的灰分測定。這種方法適用于測定煤炭中的揮發(fā)分,因?yàn)榭旎曳挚梢愿玫啬M實(shí)際燃燒過程中煤炭中可燃成分的釋放速度。快灰分通常在較高的溫度(例如850°C或更高)下進(jìn)行,以加速可燃成分的釋放。慢灰分(Slowash):慢灰分則是高溫馬弗爐在較慢的加熱速度
  • 2024

    03-19

    用生化培養(yǎng)箱做免疫熒光實(shí)驗(yàn)

    用生化培養(yǎng)箱做免疫熒光實(shí)驗(yàn)的流程如下:1、細(xì)胞準(zhǔn)備(1)取出生長狀態(tài)良好的細(xì)胞,棄培養(yǎng)基,消化重懸細(xì)胞。(2)將24孔圓形爬片放入24孔板的孔中。(3)根據(jù)細(xì)胞生長特性取適量細(xì)胞于已鋪爬片的24孔板中,放入37℃生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、固定(1)取出細(xì)胞,棄去培養(yǎng)基,用PBS洗細(xì)胞3次。(2)每孔加入1mL的4%多聚甲醛,室溫固定10-20min,棄去多聚甲醛;(3)加入1mL的PBS清洗細(xì)胞,重復(fù)兩次。3、通透(1)每孔加入1mL的0.5%Triton-X100,室溫10min,棄去Triton-
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