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2024
04-162024
04-11常見的六種細(xì)菌接種方法優(yōu)缺點(diǎn)講解
如何選擇細(xì)菌接種方法?細(xì)菌的接種方法有很多種,如劃線法、涂布法、傾注法、斜面接種法、液體培養(yǎng)基接種法、螺旋接種法等,其方法和應(yīng)用各有不同,小助手將一一解釋,以幫助實(shí)驗(yàn)人員選擇操作。一、劃線法用途:主要用于菌種分純,獲得單菌落。實(shí)驗(yàn)步驟:由接種環(huán)沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線(詳見圖1),微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,可在平板表面得到單菌落。優(yōu)點(diǎn):可以觀察菌落特征,對(duì)混合菌進(jìn)行2024
04-11用二氧化碳培養(yǎng)箱做海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)
海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1、儀器二氧化碳培養(yǎng)箱,解剖鏡,眼科鑷,眼科剪2、動(dòng)物新生鼠(SD大鼠)3、耗材DMEM/F12培養(yǎng)基、聚賴氨酸實(shí)驗(yàn)步驟:包被:培養(yǎng)前一天將培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶或皿用0.01%多聚賴氨酸包被過夜。第二天早上來吸除包被液在無菌超凈臺(tái)中自然晾干后放置于二氧化碳培養(yǎng)箱中備用。配制神經(jīng)元專用培養(yǎng)基(DMEM/F12培養(yǎng)基中添加1%谷氨酰胺,2%B27,1%雙抗)取腦:選取新生24h之內(nèi)的SD大鼠數(shù)只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,斷頭處死,無菌條件下分層剪開頭皮,顱骨,用彎鑷?yán)_腦區(qū)2024
04-102024
04-102024
04-092024
04-08如何快速估算每次實(shí)驗(yàn)放幾只動(dòng)物?
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循實(shí)行“3R原則”,包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的替代、減少和優(yōu)化原則,其中減少即指盡量減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量。查閱文獻(xiàn),并未發(fā)現(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)目有絕對(duì)要求,但在減少的同時(shí),一定要滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。統(tǒng)計(jì)學(xué)上要求一般至少每組有6個(gè)可用數(shù)據(jù),才有意義。一般小鼠的每組一般不少于10只;一般大鼠每組不少于6只;大動(dòng)物等級(jí)越高,價(jià)格越貴,根據(jù)情況可適當(dāng)減少,但一般不能少于4-5只。作為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)者,我們不僅僅知其然,也要知其所以然1、為什么要進(jìn)行樣本量估算?科學(xué)性要求:使研究設(shè)計(jì)更加嚴(yán)謹(jǐn)。倫理學(xué)考慮:對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研2024
04-08細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)如下:1、當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到其生長密度高處時(shí)(一般腫瘤細(xì)胞為80-100%,原代細(xì)胞和干細(xì)胞為80-90%,有些細(xì)胞為40-50%,熟知所養(yǎng)細(xì)胞的生長密度極限),移除舊培養(yǎng)液;2、用PBS洗滌兩次(舊培養(yǎng)中的鈣離子會(huì)抑制胰酶的活性),加入1ml胰酶消化液(以T25培養(yǎng)瓶為例),立即蓋好蓋子,把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞漂起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液2024
04-03TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡原理和經(jīng)驗(yàn)
TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡原理和經(jīng)驗(yàn)細(xì)胞凋亡中,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。由此,TUNEL成為了檢測DNA片段化(細(xì)胞凋亡)的方法。TUNEL檢測:使用2024
04-022024
03-272024
03-272024
03-26微生物檢驗(yàn)中培養(yǎng)基制備的注意事項(xiàng)
培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,因此對(duì)于微生物檢驗(yàn)而言,培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。培養(yǎng)基的主要作用有兩方面:①提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì);②培養(yǎng)基具有選擇性和差異性,可以選擇特定類型的細(xì)菌或真菌進(jìn)行培養(yǎng),并區(qū)分不同種類的微生物。因此,在微生物檢驗(yàn)中,必須對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制,只有優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基才能為微生物檢驗(yàn)提供精準(zhǔn)、可靠的檢測結(jié)果。培養(yǎng)基的概述培養(yǎng)基是用于保證微生物繁殖、鑒定、保持活力的物質(zhì),按照物理性質(zhì)可以分2024
03-26海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1、儀器CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱,解剖鏡,眼科鑷,眼科剪2、動(dòng)物新生鼠(SD大鼠)3、耗材DMEM/F12培養(yǎng)基、聚賴氨酸實(shí)驗(yàn)步驟:包被:培養(yǎng)前一天將培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶或皿用0.01%多聚賴氨酸包被過夜。第二天早上來吸除包被液在無菌超凈臺(tái)中自然晾干后放置于CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中備用。配制神經(jīng)元專用培養(yǎng)基(DMEM/F12培養(yǎng)基中添加1%谷氨酰胺,2%B27,1%雙抗)取腦:選取新生24h之內(nèi)的SD大鼠數(shù)只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,斷頭處死,無菌條件下分層剪開頭皮,顱骨,用彎鑷?yán)_2024
03-252024
03-252024
03-222024
03-21什么事是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的儀器設(shè)備?
在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學(xué)。通過研究生物大分子(核酸、蛋白質(zhì))的結(jié)構(gòu)、功能和生物合成等方面來闡明各種生命現(xiàn)象的本質(zhì)。研究內(nèi)容包括各種生命過程。比如光合作用、發(fā)育的分子機(jī)制、神經(jīng)活動(dòng)的機(jī)理、癌的發(fā)生等。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)包含了生物大分子制備和分析常用技術(shù)、蛋白質(zhì)與核酸的提取與分離、PCR技術(shù)、分子雜交與印跡技術(shù)、分子克隆技術(shù)、外源基因轉(zhuǎn)移技術(shù)、蛋白質(zhì)表達(dá)技術(shù)、分子標(biāo)記技術(shù)、分子改造技術(shù)、測序及人工合成技術(shù)、基因組學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)、生物芯片技術(shù)、生物信息學(xué)技術(shù)、RNA研究技術(shù)等。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)2024
03-212024
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