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通蔚試劑(上海)有限公司
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我司說明:操作ELISA試劑盒的5個方面??!!2020/09/29
ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應留神以下5個方面。1.跟著病況的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內的含量發(fā)作大幅動搖,因此有必要對標本進行預處理。間接法測定中,標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。2.加樣一般運用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶結合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。3.在成批手藝檢測中,還應留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時間不一
今日課堂:關于細胞的樣的保存,需做好這六步兩留意??!2020/09/22
◎操作步驟:1、在37℃5%CO2條件下將細胞加在處理的載玻片上,用培育基培育,時間通過預試驗確定;2、細胞長好后,用洗刷液洗2分鐘×3次,室溫下將其放入細胞固定液中固定30-60min,蒸餾水洗刷;3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細胞,(干燥后-20℃冰凍保存2周以上)4、雜交前將固定的細胞進行如下處理;順次在70%,90%,100%的乙醇中浸泡,脫水每次5min,用二甲苯洗刷,除掉殘留脂質順次在100%,90%,70%乙醇中浸泡,進行再水化,每次5min,后浸泡于洗刷液中;5、在37℃用胃蛋白
我司回答:動物血清如何做到質量保證的?2020/09/15
在細胞培育試驗中,血清一般作為基礎生長培育基的添加劑。而在試驗進程中是否挑選添加血清,主要依據(jù)基礎培育基化學成分,培育細胞的類型和培育系統(tǒng)而定。血清的質量大大的影響到試驗作用,不少客戶在購買時做出疑問:【動物血清】以何種條件做到質量保證的?今日我司技術員將為大家一一回答::血清的采集在出產(chǎn)進程中,全血運用無菌一次性塑料袋搜集,待凝聚后分離,搜集和冷凍貯存血清。操控初始搜集是操控終血清產(chǎn)質量量的關鍵因素。只要初始質料符合咱們的規(guī)范時才干答應出產(chǎn)第二:產(chǎn)質量料的挑選在商場存在兩個胎牛血清規(guī)范:美國農(nóng)
細談:選購細胞株注意事項2020/09/08
有些客戶需求購買國外細胞株,購買國外細胞株需求考慮的因素有如下幾點:1、細胞株的生物等級,由于有些細胞株及菌株歸于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。2、在購買國外細胞株時,需交待國外加比較多的干冰一般在13公斤以上,選用比較密封的泡沫盒加套紙箱。3、報關時盡量提供比較足夠的證明材料,防止擔擱時刻而導致干冰揮發(fā)完細胞株逝shi,甚至于被退回給發(fā)貨人。4、假如通過國外細胞株在國內的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內容:a.清晰的到貨時刻,這個時刻需注明的是工作日,仍是普通日。b.選用什么樣的運輸辦
我司詳解:ELISA試劑盒檢測有哪些范圍呢2020/09/01
ELISA試劑盒靈敏度高是一大優(yōu)點,而這其實也是和檢測樣本有些關聯(lián)的,我們一般說來,如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。一般來說,試劑盒曲線上的濃度是比較準確的,低于這個值因為與曲線是個“S”型結構有關,所以結果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應該看曲線上的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。那么ELISA試劑盒檢測哪些范圍呢?一般說來,診斷試劑的檢測范圍以ng/m
解析:適合培養(yǎng)基的保存環(huán)境條件2020/08/25
1、環(huán)境條件:各種未經(jīng)配制的培養(yǎng)基按其儲存條件保存,配制的培養(yǎng)基均應在潔凈的普通冰箱內2~8℃保存,以5℃左右為宜,不得凍結。否則,常因理化性質改變而不能再用。2、保存時限:①基礎營養(yǎng)培養(yǎng)基應在2周內用完。②生化鑒別培養(yǎng)基應在1周內用完。③選擇性分離鑒別培養(yǎng)基制成平板后當日用完。④未經(jīng)配制的培養(yǎng)基保存至有效期。培養(yǎng)基的保存:1、貯存培養(yǎng)基的冰箱內不得存放食品、飲料等無關物品。2、培養(yǎng)基管理員應按二日一次檢查培養(yǎng)基的外觀,如失水、沉淀、過期、棉花塞松弛或脫落等異常情況。發(fā)現(xiàn)問題及時處理。3、使用過
關于ELISA試劑盒應該注意的事項2020/08/18
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液或許會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響成果。3.各步加樣均應運用加樣器,并常常校正其準確性,以避免實驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,引薦運用排槍加樣。4.請每次測定的一起做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時后乘以總稀釋倍(×n×
細胞株的保存方法2020/08/11
1.紫外消毒30min后關閉紫外燈,開啟超凈臺正常工作狀態(tài),用酒精消毒操作者的雙手。2.將所需的培養(yǎng)基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內,點燃酒精燈,將培養(yǎng)基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上,瓶口對準酒精燈,且放在距離酒精燈近的位置,瓶蓋置于酒精燈的另一側。3.將培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈上消毒2-3次,旋開后分別再次消毒瓶口和瓶蓋2-3次,蓋放于酒精燈右側后將培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液懸空倒進污缸,
我司解析:神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)2020/08/04
因為神經(jīng)干細胞(NeuralStemCell)具有自我更新和多向分化的潛能,因而,可以選用懸浮神經(jīng)球培養(yǎng)的方法來獲得和研討。即將胚胎腦組織處理成單個細胞后,只有具有自我更新才能的細胞才能在培養(yǎng)液中克隆增殖成為懸浮的神經(jīng)球,并隨著傳代的進行,堅持增殖才能和向多種神經(jīng)子代細胞分化的才能。一、神經(jīng)干細胞的分別和傳代無菌條件下取重生SD大鼠(出世48h內)腦組織,D-Hanks液充分漂洗后,在解剖顯微鏡下剝離腦膜,準確分別海馬,用眼科剪將海馬剪碎后,再轉移到DMEM/F12(1:1)加B27和bFGF(
解析:ELISA試劑盒的運用過程2020/07/28
1.ELISA試劑盒用于檢測的樣品應保持新鮮.2.用戶在初度運用試劑盒時,應將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底.3.每次試驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2NH2SO4.丈量時先用此孔調OD值至零.4.要確保微量加樣器的準que性,能夠運用蒸餾水和電子天平進行確定(因為蒸餾水不含雜質,溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水能夠看作是lg200L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應該將其高量程和低量程進行確定.5.因為底物顯色劑對光及其靈敏,因此要避光保存.
夏日焦點:了解這三大操作原則,保你作出的培養(yǎng)基實驗2020/07/21
培養(yǎng)基種類繁多,根據(jù)其成分、物理狀態(tài)和用途可將培養(yǎng)基分成多種類型。不同類型的培養(yǎng)基有著不同的操作方法,但是基本的操作原則是不可打破的。在今天的技術解說中,我司為您分享:做培養(yǎng)基實驗的三大操作原則。1、配制培原則目的要明確,根據(jù)不同的微生物的營養(yǎng)要求配制針對強的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質、核酸、維生素等復雜的有機物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基*可以由簡單的無機物組成。2、操作要規(guī)范細菌培養(yǎng),要掌握溫度、濕度、時間、環(huán)境等因素,微生物限度檢驗細菌培養(yǎng)溫度為
今日詳解:實驗室細菌菌種的保存2020/07/14
1、甘油液保存法將已分純的待存菌接種于肉湯中,37℃培養(yǎng)18~24h,然后按5份肉湯溶液、2份甘油-生理鹽水保存液的比例分裝于滅菌的微量離心管或細胞凍存管中,貼上標簽,置-80℃~-20℃冰箱保存。此法操作簡便,不需要特殊設備,效果好,可以保存菌種3年左右,無變異現(xiàn)象,而且此方法還可以保存一些要求較高的特殊菌種,適用范圍廣。所以此方法適合實驗室普通菌種或特殊菌種的較長期的保存。2、濕牛奶凍存法將待存菌種于各自生長良好的平板培養(yǎng)基上,經(jīng)分純后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。用準備好的保護劑牛奶洗下菌苔,再用無菌毛
課堂解析:ELISA的技術點你知道有哪些?2020/07/07
1.細胞上清:處理前有必要是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可.假如濃度太高需稀釋時,用規(guī)范品稀釋液直接稀釋.2.腦脊液:處理前有必要是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可.假如濃度太高需稀釋時,用規(guī)范品稀釋液直接稀釋.3.血清血漿:請參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大,請將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,缺乏部分用規(guī)范品稀釋液補充至100ul.A.血清標本應是自然凝結后,取上清,防止在冰箱中凝結血液;B.血漿標本,引薦用EDTA的方法搜集若待測樣本不能及時檢測,標本搜集
我司解析:關于細胞轉染技術的那些事2020/06/30
轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。跟著基因與蛋白功用研討的深化,轉染目前已成為實驗室工作中常常涉及的基本辦法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于經(jīng)過物理辦法將基因導入細胞的范例;化學介導辦法許多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染辦法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導辦法,有較為原始的原生質體轉染,和現(xiàn)在比較多見的各種介導的轉染技術。抱負細胞轉染辦法,應該具有轉染功率高、細胞du性小等優(yōu)點。需求指出的一點,不管采用哪種轉染技術,要獲
ELISA 試劑盒測定外源性物質2020/06/23
外源性物質常常是由于用于ELISA試劑盒測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。(1)標本溶血由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA測定中,會導致非特異性顯色,干擾測定結果。為克服上述干擾作用,標本采集時必須注意避免溶血。(2)標本受細菌污染因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性
解析:如何擇取胎牛血清的質量2020/06/16
胎牛血清是一種性狀、外觀淺澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。如何擇取胎牛血清的質量:1、內毒素標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍。可見,內毒素含量偏高不影響質量,除非含量*,預示著已經(jīng)污染。2
血清和血漿有何差異?2020/06/10
血漿相當于結締組織的細胞間質。是血液的重要組成部分,呈淡液體。血漿的無機鹽主要以離子狀況存在,正負離子總量持平,堅持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經(jīng)-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學成分常在必定規(guī)模內不斷地改變,其間以葡萄糖、蛋白質、脂肪和激素等的濃度容易受營養(yǎng)狀況和機體活動狀況的影響,而無機鹽濃度的改變規(guī)模較小。血漿的理化特性相對恒定是內環(huán)境穩(wěn)態(tài)的首要體現(xiàn)。血清血液凝結分出的淡通明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反響被激活,血
ELISA操作有何難?2020/06/03
ELISA具有敏感性高、特異性強、操作簡單等優(yōu)點,被廣泛應用于各種抗原和抗體的測定,為輔助臨床診斷與生物科研起到了積極的推動作用。但ELISA測定中影響因素較多,操作過程中每個環(huán)節(jié)都會對試驗結果產(chǎn)生影響,出現(xiàn)錯誤的結果。試劑的因素試劑的選擇:試劑的選擇是保證血液檢測質量的關鍵要素。雖然國家采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,但不同廠家的試劑在使用效果上仍存在在差異。要選購度相對高、具有“三證”的試劑,不要用無批號的試劑,選用與儀器配套的試劑。更不要使用過期的試劑和混用不同批號的試劑。操作
揭秘我司:細胞培養(yǎng)基本條件2020/06/01
1、合適的細胞培養(yǎng)基合適的細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、血清目前,大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細胞培養(yǎng)液中重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。3、無菌無毒細胞培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。在體外培養(yǎng)的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質污染,或者自身代謝物質積累,可導致細胞中毒死亡。
控制微生物代謝生產(chǎn)的新方法2020/05/27
微生物經(jīng)過基因工程改造后可用于生產(chǎn)各種有用的化合物,包括塑料,生物燃料和藥品。但是,在許多情況下,這些產(chǎn)品的合成需要與維持微生物生長的代謝途徑競爭。為了優(yōu)化微生物生產(chǎn)所需化合物的能力、同時維持其自身生長,麻省理工學院的科學家設計了一種方法,可以誘導細菌在不同時間在不同的代謝途徑之間進行切換。這種轉換開關被插入到細胞基因組中,由微生物種群密度的變化觸發(fā),無需人工干預。利用這種轉換,研究人員可以將兩種不同的微生物產(chǎn)物的產(chǎn)量提高十倍。文章發(fā)表在PNAS上。麻省理工學院的研究生ChristinaDinh
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