国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

細胞培養(yǎng)基有哪些基本要求？2022/10/13

現(xiàn)代生物技術(shù)均通過細胞作為載體來進行，無論是基因治療、干細胞、克隆技術(shù)都在細胞內(nèi)進行的。細胞的生長需要一定的營養(yǎng)環(huán)境，用于維持細胞生長的營養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基，即指所有用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存細胞用的物質(zhì)，就其本意上講為人工模擬體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境，使細胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。它是提供細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的物質(zhì)基礎。細胞培養(yǎng)基其組成成分主要有：水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子及其他一些入核酸降解物、激素等。細胞培養(yǎng)基的基本要求體外培養(yǎng)的細胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應能滿

胰酶的配置方法你知道嗎？2022/10/11

胰酶配置方法：1、培養(yǎng)液配制，方便好用，對細胞影響小，并且培養(yǎng)液的ph值正好適合胰蛋白酶的溶解2、生理鹽水配制，要先調(diào)ph值7.2到7.4（①胰酶（1：250）2.5克②EDTA-Na0.3克③NaCl8.0克④KCl0.4克⑤Glucose1.0克⑥PhenolRed0.005克⑦Water1000mL磁力攪拌2-3小時，調(diào)pH7.8-8.0，過濾除菌。）3、pbs（0.1%胰酶溶液的配制：稱取胰酶粉末0.1g，先用少許滅菌過的PBS調(diào)成糊狀，然后補足到100ml。置室溫攪拌4小時或冰箱內(nèi)過夜

胰酶使用的注意事項2022/10/10

胰酶使用注意：1、在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。2、胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。貼壁細胞的消化：1、吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清2、加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細胞消化時間有所不同）3、顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細胞發(fā)

新生牛血清蛋白檢測指標2022/10/09

新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。經(jīng)大規(guī)?；旌虾蟪^濾制成成品，主要用于動物細胞培養(yǎng)，是醫(yī)藥生物技術(shù)產(chǎn)品的重要原材料之一，其質(zhì)量好壞直接影響細胞生長情況?？偟鞍缀渴切律Ｑ逍枰獧z查的指標。它屬于化學成分的初步分析。有人統(tǒng)計過國產(chǎn)新生牛血清的蛋白含量1，在比較各產(chǎn)區(qū)各年份后，發(fā)現(xiàn)其含量在3.7%~4.4%之間。進口新生牛血清并不與之*一致。因為國內(nèi)的血清常采自奶牛，而國外的血清常采自肉牛。蛋白質(zhì)是新生牛血清的主要成分，在細胞培養(yǎng)中起著維

血清融化后有沉淀怎么辦？影響細胞培養(yǎng)嗎？2022/09/29

血清沉淀主要是纖維蛋白等蛋白、磷酸鹽、脂類等經(jīng)凍融后析出，導致血清內(nèi)出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象，該現(xiàn)象與血清品質(zhì)無關(guān)，大部分品牌的血清都會有這種情況，不會影響細胞培養(yǎng)，只是培養(yǎng)時可能偶爾觀察到血清沉淀，注意區(qū)分血清沉淀和細胞污染即可。血清沉淀較多時可以將血清靜置后，盡量吸走上清，下部有大量沉淀的血清可以2000rpm離心5min后取上清與之前取的上清混合使用。血清反復凍融、高溫融化、融化不均、滅活等因素均有可能導致沉淀增多，血清融化時應盡量在4℃融化，每隔一段時間搖晃一下。HAKATA胎牛血清產(chǎn)品特點1、內(nèi)毒

動物血清的正確熱滅活方法2022/09/28

動物血清的熱滅活非常容易造成蛋白析出增多，若非必要，可以無需做此操作。若必須做動物血清的熱滅活，請嚴格遵守以下步驟：1、保證血清*融化狀態(tài)，溫度接近常溫。2、保證水浴溫度56℃、30分鐘的原則，在水浴過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子，使血清內(nèi)部受熱均勻，直至滅活時間結(jié)束。注意事項：溫度過高、時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多，甚至嚴重影響血清的品質(zhì)。在56℃水浴中，持續(xù)恒溫30分鐘。在此過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子，使其受熱均勻，減少蛋白的析出。為什么要熱滅活血清？加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活

細胞培養(yǎng)中常用培養(yǎng)基介紹2022/09/26

1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正?；驉盒栽錾陌准毎?，雜交瘤細胞的培養(yǎng)，是目前應用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱zui低必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細

培養(yǎng)的細胞出現(xiàn)細菌污染怎么判斷？2022/09/23

培養(yǎng)的細胞出現(xiàn)細菌污染怎么判斷？細菌污染的細胞過夜培養(yǎng)后，培養(yǎng)基會顯著變黃，培養(yǎng)瓶內(nèi)肉眼可見細菌沉淀，晃動培養(yǎng)基會有渾濁現(xiàn)象，顯微鏡下觀察細胞可以看到很細的沙狀物覆蓋整個培養(yǎng)瓶底部。細胞碎片與污染的分辨可以通過過夜培養(yǎng)判斷，過夜不會渾濁的主要是細胞碎片及代謝產(chǎn)物，過夜會明顯變黃渾濁的可以判斷為污染。細胞出現(xiàn)細菌污染一般1-2天即會爆發(fā)至肉眼可見狀態(tài)，細菌污染一般不會交叉污染，及時處理掉污染的細胞即可。培養(yǎng)的細胞出現(xiàn)細菌污染怎么判斷？細菌污染的細胞過夜培養(yǎng)后，培養(yǎng)基會顯著變黃，培養(yǎng)瓶內(nèi)肉眼可見細菌

細胞凍存時，培養(yǎng)基、血清、DMSO按什么比例配制？2022/09/22

DMSO是目前常用的細胞凍存保護劑，一般使用時終濃度控制在5~10%，最佳濃度取決于細胞類型。一般來說，存活率比較高的細胞系，培養(yǎng)基、血清、DMSO按照7：2：1的比例新鮮配制使用。細胞計數(shù)后，用配制好的細胞凍存液重懸細胞，至5×10^6~1×10^7cells/mL，然后1~1.5mL/管分裝凍存。對于存活率較低的細胞系，或者需要長時間保存的細胞系，可以增加凍存液中的血清濃度，血清和DMSO按9：1的比例配制。另外，還有商品化的無血清凍存液可以選擇，不需要預先配制。一般會含有多種保護劑成分，適

細胞培養(yǎng)瓶的使用方法2022/09/21

細胞培養(yǎng)瓶使用方法：1.擰開蓋子，用傾斜或者泵打的方式將培養(yǎng)基注入細胞工廠內(nèi)，細胞懸液緩慢流入細胞工廠各層中。蓋上蓋子，靜止。2.緩慢將細胞工廠測立，有加液口的一側(cè)背向自己，靜置使細胞懸液緩慢均勻流入各層中。3.側(cè)向旋轉(zhuǎn)90度，保持進液口朝上，靜置使細胞懸液緩慢均勻流入各層中。4.雙手握住進液口的一面，緩慢放平，避免液體大幅度晃動。5.移致合適的細胞培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。6.培養(yǎng)結(jié)束后，將培養(yǎng)基倒入收集容器。細胞培養(yǎng)瓶的性能特點：省時省空間，1個10層細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積相當于36個T-175細胞培養(yǎng)

ELISA實驗出現(xiàn)“花板”怎么解決？2022/09/20

酶聯(lián)免疫吸附試驗(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay，ELISA)于1971年分別由瑞典學者和荷蘭學者報道，開創(chuàng)了運用酶標記免疫技術(shù)進行液體標本中微量物質(zhì)測定的實驗方法。其原理是抗原或抗體的固相化及抗原抗體的酶標記。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，由此進行定性或定量分析。該實驗因其靈敏度較高，特異性較好，操作較簡單，可大批量操作而廣泛應用于多種傳染性疾病的篩查工作中。然而，“花板"現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會給實驗者判讀結(jié)果帶來

溶液的顏色與澄清度如何比對2022/09/16

溶液顏色顏色是通過眼、腦和我們的生活經(jīng)驗所產(chǎn)生的一種對光的視覺效應。人對顏色的感覺不僅僅由光的物理性質(zhì)所決定，比如人類對顏色的感覺往往受到周圍顏色的影響。有時人們也將物質(zhì)產(chǎn)生不同顏色的物理特性直接稱為顏色。濁度是指溶液對光線通過時所產(chǎn)生的阻礙程度，它包括懸浮物對光的散射和溶質(zhì)分子對光的吸收。水的濁度不僅與水中懸浮物質(zhì)的含量有關(guān)，而且與它們的大小、形狀及折射系數(shù)等有關(guān)。個人的理解是濁度是顏色的一種特殊表現(xiàn)形式。顏色：定性分析,檢測場景應在均勻的自然光下，標準的白平衡為背景，（標準白平衡背景的面積應

ELISA競爭檢測法原理介紹2022/09/14

競爭法一般分為直接競爭法和間接競爭法，這里我們以直接競爭法為例進行原理講解。直接競爭法，其基本原理是：將合適濃度的包被抗體包被于微孔板中，加入無關(guān)蛋白載體封閉未結(jié)合位點，加入標準品（樣本）和生物素標記的抗原物質(zhì)進行競爭結(jié)合，經(jīng)合適的溫度和一定時間的孵育，洗滌后，加入HRP標記的鏈霉親和素進行反應，TMB顯色，微孔板中顏色的深淺與待測物的濃度呈負相關(guān)。該方法一般用來檢測具有較少表位的小分子物質(zhì)，當然，這種方法也可以用來檢測大分子抗原物質(zhì)甚至是抗體。檢測大分子抗原物質(zhì)時，由于空間位阻的影響，使得該檢

ELISA載體的形狀主要有三種2022/09/13

固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器，不參與化學反應?？勺鱁LISA中載體的材料很多，*常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性，加之它的價格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板最為常用，專用于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板，上標準的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標本的檢測，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的，放入座架后，大小與

細菌培養(yǎng)的相關(guān)知識2022/09/08

細菌培養(yǎng)是一種用人工方法使細菌生長繁殖的技術(shù)。細菌在自然界中分布極廣，數(shù)量大，種類多，它可以造福人類，也可以成為致病的原因。大多數(shù)細菌可用人工方法培養(yǎng)，即將其接種于培養(yǎng)基上，使其生長繁殖。培養(yǎng)出來的細菌用于研究、鑒定和應用。細菌培養(yǎng)是一個復雜的技術(shù)。一、培養(yǎng)條件編輯培養(yǎng)時應根據(jù)細菌種類和目的等選擇培養(yǎng)方法、培養(yǎng)基，制定培養(yǎng)條件（溫度、pH值、時間，對氧的需求與否等）。一般操作步驟為先將標本接種于固體培養(yǎng)基上，做分離培養(yǎng)。再進一步對所得單個菌落進行形態(tài)、生化及血清學反應鑒定。培養(yǎng)基常用牛肉湯、蛋白

細胞因子的作用你知道嗎？2022/09/07

細胞因子（CK）是由活化免疫細胞和非免疫細胞（如某些基質(zhì)細胞）合成分泌的能調(diào)節(jié)細胞生理功能、參與免疫應答和介導炎癥反應等多種生物學效應的小分子多肽或糖蛋白，是不同于免疫球蛋白和補體的又一類免疫分子。根據(jù)來源最初將活化淋巴細胞產(chǎn)生的細胞因子稱為淋巴因子（LK），將單核-吞噬細胞產(chǎn)生的細胞因子稱為單核因子（MK）。目前根據(jù)功能，細胞因子大致分為以下六類：白細胞介素；干擾素（IFN）；腫瘤壞死因子（TNF）；集落刺激因子（CSF）；生長因子和趨化因子。細胞因子生物學功能1.介導和調(diào)節(jié)免疫應答2.參與炎

牛血清白蛋白(BSA)在實驗中的用處！2022/09/05

牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。主要成分蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白，球蛋白。多肽——血小板促生長因子能促細胞分裂，是多肽家庭的主要成員之一，是主要的促細胞增殖因子；成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等，血清中含量雖很少，但對細胞生長也有一定作用。激素——胰島素：促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸，與

細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑膠蟲污染怎么辦？2022/09/01

“黑膠蟲”可寄生于動物細胞，也可以生存于培養(yǎng)基中，依靠細胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生，并隨細胞傳代而傳代?？梢姟昂谀z蟲”是一種異養(yǎng)生物。我們在細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑膠蟲后污染怎么辦？下面有幾個處理建議，我們一起來了解下吧！1．換好一點的血清，這樣可以有效減少“小黑點”的形成。一般的血清都不要去滅活處理，為什么呢？因為經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱滅活

細胞培養(yǎng)遇到培養(yǎng)液渾濁是什么原因？2022/08/31

細胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染.他們在細胞培養(yǎng)中污染的特點如下：1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯.2、支原體：黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一.而且它不能用過濾的辦法除去.支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢si

細胞污染有哪些常見的原因你知道嗎？2022/08/29

細胞污染的常見原因細菌細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。真菌一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不像細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。支原體黑色的，培養(yǎng)液一般會渾濁。國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它