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2024
04-09

關于胎牛血清，你知道多少？
一、什么是胎牛血清？胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結血液的液體部分，不含細胞、纖維蛋白和凝血因子，但含有大量對細胞生長至關重要的營養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養(yǎng)細胞的維持和生長至關重要。FBS還含有多種小分子，如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。FBS應用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細胞培養(yǎng)中，其濃度高達20%甚至更高，它提供許多促進細胞存活和增殖的必需營養(yǎng)素和生長因子。然而，需要注意的是，人類細胞培養(yǎng)物中的FBS可能會引入研究成果。用人類血清培養(yǎng)的人類
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04-09

血清使用常見問題，如何處理？
購買血清后，在使用的過程中，會遇到這樣那樣的問題，如何處理呢？讓我們一起來看看吧！一、血清保存的最好方法？建議血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶，建議無菌分裝于適當?shù)臏缇萜鲀?nèi)冷凍備用。二、如何解凍血清，才能保證其質(zhì)量不會受損？建議將血清從冷凍箱取出后，置于2℃～8℃冰箱中解凍，然后在室溫下全融，解凍過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。三、為什么血清在解凍后會出現(xiàn)絮狀沉淀？應該怎樣處理？血清中絮狀沉淀產(chǎn)生的原因有很多，其中最pu遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之
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04-09

選購胎牛血清需要注意什么？
胎牛血清（FBS）是最chang用的血清添加劑，因為它富含生長因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養(yǎng)基也逐漸走紅，但許多細胞系未必適用，并且存在費用較高和生長較慢等缺點。那么，研究人員在評估FBS的質(zhì)量時，需要注意些什么呢？目前，市場上存在著不同等級的FBS。由于FBS關乎細胞活力和實驗重復性等重要的參數(shù)，故在質(zhì)量方面是絕對不能含糊的。讓我們一起來看看哪些方面是需要注意的吧！一、可追溯性對于科學家而言，最大的風險也許是FBS的純度大打折扣，這可能導致細胞培養(yǎng)實驗的效果不佳。許多FBS的
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04-09

分子實驗室的有毒試劑，你知道多少？
分子生物學實驗室的有毒試劑，你知道多少？一起來看看吧一、DMSO(二甲基亞砜)DMSO，用途廣泛，用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機溶劑的極為重要的非質(zhì)子極性溶劑。對皮膚有極qiang的滲透性，有助于藥物向人體滲透。也可作為農(nóng)藥的添加劑。也是一種十分重要的化學試劑。DMSO也是一種滲透性保護劑，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，減輕自由基對細胞損害，改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。但是研究表明，DMSO存在嚴重的毒性作用，與蛋
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04-09

Zymo DNA/RNA小量提取試劑盒(R2002)現(xiàn)貨供應
產(chǎn)品名稱：ZymoDNA/RNA小量提取試劑盒(R2002)現(xiàn)貨供應產(chǎn)品貨號：R2002產(chǎn)品品牌：Zymo產(chǎn)品簡介：ZymoDNA/RNA小量提取試劑盒旨在從各種樣品輸入（例如糞便，土壤，植物，水和生物膜）中純化DNA和RNA，這些樣品可用于微生物組或宏基因組分析。ZymoBIOMICS™創(chuàng)新裂解系統(tǒng)消除了與不同生物體（例如革蘭氏陰性/陽性細菌，真菌，原生動物和藻類）不相等裂解效率相關的偏差。提供的DNA/RNAShield™在環(huán)境溫度下保存核酸，提供樣品的無偏分子快照。該程序使用ZymoSpi
2024
04-09

Zymo石蠟樣品DNA/RNA小提試劑盒(R1009)現(xiàn)貨供應
產(chǎn)品名稱：Zymo石蠟樣品DNA/RNA小提試劑盒(R1009)現(xiàn)貨供應產(chǎn)品貨號：R1009產(chǎn)品品牌：Zymo產(chǎn)品簡介：Zymo石蠟樣品DNA/RNA小提試劑盒提供了一種簡單可靠的方法，用于從同一福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織樣品中分離一種洗脫液中的總核酸（DNA/RNA）或兩種不同餾分中的DNA和RNA。該產(chǎn)品的du特化學性質(zhì)已被優(yōu)化，可最da程度地回收DNA以及大小RNA種類。只需使用脫石蠟溶液將組織脫石蠟，使用蛋白酶K消化，加熱以逆轉化學交聯(lián)，然后使用ZymoSpin™色譜柱技術進行
2024
04-08

這些測序方法，你知道嗎？
測序，測的是DNA的序列，也就是測定DNA中脫氧核糖核苷酸的排列順序，它是將DNA化學信號轉變?yōu)橛嬎銠C可處理的數(shù)字信號的一個過程，我們能從這些經(jīng)過科學計算得出的數(shù)字信號中找尋到生命之間的奧秘。根據(jù)測序技術出現(xiàn)的時間以及讀長、通量等特征，分為一代測序、二代測序、三代測序。下面的這些測序方法，你知道嗎？讓我們一起來看看吧！一、一代測序一代測序技術，也被稱為Sanger測序。其利用了雙脫氧核苷酸會終止PCR的原理。比如：一條序列為ATCGCTA，我們進行3次的雙脫氧核苷酸，第一次加入雙脫氧核苷酸A和正
2024
04-08

NGS測序之文庫構建
由于二代測序讀長的限制，不可能一下將一個很長的基因序列測通，因此需要先將長基因序列隨機片段化成小片段，這樣的話，這些片段就可以覆蓋整個基因組。所以需要構建文庫。一、文庫構建的步驟文庫構建大致步驟類似，但是各有各自du特的點，例如，RNAseq里miRNA，lncRNA，mRNA方法各有差異，具體方法以后有機會再補充。這里以Illumina的PE文庫為例，其流程圖如下圖。二、文庫構建詳細步驟（1）DNA片段化（FragmentDNA）使用超聲、酶或者加熱的方式將DNA樣品打碎成小片段，一般在300
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04-08

NGS測序為什么需要文庫構建?
NGS即Next-generationsequencing，又叫第二代測序技術或者高通量測序技術或者下一代測序技術。文庫是DNA/RNA樣本在測序前做的一系列準備，因為原始的核酸樣本無法直接用于測序，只有經(jīng)過處理的樣本才能滿足測序平臺的要求，比如在DNA樣本兩端添加測序bi備的接頭；樣本量不足時，可以通過PCR擴增達到上機的要求等。NGS測序為什么需要文庫構建?讓我們一起來看看吧！一、DNA文庫構建的內(nèi)容（1）片段化及末端修復（2）加接頭（3）PCR注意：此處忽略磁珠純化的步驟。RNA樣本的文庫
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04-08

凍存細胞后續(xù)如何處理？
凍存細胞在收到貨后，后續(xù)如何進行處理呢？如何復蘇呢？一文讓你了解清楚！一、收到凍存細胞如何處理收到凍存細胞后，請打開包裝箱，檢查箱內(nèi)干冰是否充足，凍存管是否融化，若已經(jīng)融化，請拍照留存，并聯(lián)系客服，若無異常，請及時將凍存管置于超低溫冰箱內(nèi)保存，若長時間不使用，必須在超低溫冰箱內(nèi)過夜后轉移至液氮中保存。二、凍存細胞如何復蘇取100mm培養(yǎng)皿并做好標記，加入預熱好的12ml完quan培養(yǎng)基，將凍存管放入37℃水浴鍋中，輕輕搖晃凍存管，待細胞懸液完quan溶解后，轉移至安全柜中操作。用無菌吸管吸取溶解
2024
04-08

細胞穩(wěn)定轉染和瞬時轉染有哪些區(qū)別？
在細胞實驗中，細胞轉染是一項常用的技術，用于引入外源基因、表達蛋白或沉默目標基因等。其中，細胞的穩(wěn)定轉染和瞬時轉染是兩種常見的轉染方式。細胞穩(wěn)定轉染和瞬時轉染有哪些區(qū)別？讓我們一起來看看吧！類別特點適用范圍穩(wěn)定轉染長期穩(wěn)定表達目標基因長期功能研究和穩(wěn)定表達需求的實驗可通過篩選和擴增獲得穩(wěn)定表達的細胞系長期細胞培養(yǎng)和細胞系建立使用脂質(zhì)體、病毒載體或DNA轉染等方法大規(guī)模蛋白表達和基因敲入研究瞬時轉染快速實現(xiàn)臨時的基因表達短期功能研究和臨時表達需求的實驗無需篩選和擴增細胞系短期細胞培養(yǎng)和快速結果分析
2024
04-08

封閉液有哪幾種？怎么選？
完整的Western實驗過程比較長，經(jīng)常會出現(xiàn)沒有結果，或者是顯色后背景高了，背景高，目的蛋白顏色對比不明顯，要么看不清，圖片展示不理想，更別說進行數(shù)據(jù)分析了。顯色背景高的原因有很多:封閉問題，洗脫問題，一抗二抗問題等。其中最xian著的就是封閉問題。最常見的封閉就是脫脂奶粉和牛血清白蛋白（BSA），當然還有血清，魚皮明膠，聚乙烯吡咯烷酮，封閉液。我們到底應該選擇哪種封閉液？怎么選擇呢？讓我們一起來看看不同的封閉液的優(yōu)缺點吧！一、脫脂奶粉最pian宜而且最好買的封閉劑就屬脫脂奶粉了。通常封閉液的
2024
04-08

磁珠法核酸提取都分為哪幾個步驟？
核酸作為一切分子生物學研究的基礎，其提取通常是開啟生物學研究的第一步，而且提取的核酸質(zhì)量高低也是決定下游實驗成敗的關鍵因素之一。常見的核酸提取方法有酚氯仿抽提法、高鹽沉淀法、柱式法和磁珠法，其中，磁珠法核酸提取都分為哪幾個步驟？讓我們一起來看看吧！第一步：裂解核酸必須從細胞或其他生物物質(zhì)中釋放出來，細胞裂解可通過機械作用、化學作用、酶作用等方法實現(xiàn)。其中，酶作用主要是通過加入溶菌酶或蛋白酶（蛋白酶K、植物蛋白酶或鏈霉蛋白酶）以使細胞破裂，核酸釋放。蛋白酶還能降解與核酸結合的蛋白質(zhì)，促進核酸的分離
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04-08

流式細胞儀分為哪些類別？
自1973年世界di一臺商用流式細胞儀問世以來，經(jīng)過近50年的發(fā)展流式細胞儀在結構上發(fā)生了一系列的演變：由簡單到復雜、由單激光到多激光、由單色到多色、由分析到分選、從傳統(tǒng)流式到質(zhì)譜流式&光譜流式等。流式細胞儀分為哪些類別？讓我來帶你了解了解！1.分析型流式細胞儀用于快速分析檢測細胞組分及顆粒懸液，通過同時檢測分析液流中細胞上多種信號，對細胞加以細致的區(qū)分鑒別，目前臨床檢驗和科學研究主要使用此類流式細胞儀。2.分選型流式細胞儀用于快速分離獲取目的細胞，在分析檢測基礎上，通過分選模塊對細胞加以分離。
2024
04-08

流式細胞術在科研方面有哪些應用？
流式細胞術（FCM）是一種對處在快速流動中的細胞或其它生物微粒逐個進行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術。它集計算機技術、激光技術、流體力學、熒光標記技術、單克隆抗體技術、細胞免疫學于一體，按照細胞或生物顆粒的物理或化學性質(zhì)，同時具有分析和分選細胞或生物顆粒的功能。流式細胞術在科研方面有哪些應用？讓我們一起來看看吧！一、細胞凋亡檢測在正常細胞中，細胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）位于胞漿側。細胞凋亡中期，PS外翻。AnnexinV是一種Ca2+依賴的對PS具有高度親和力的磷脂結合蛋白，因此可以用熒光標
2024
04-08

有哪些微生物會污染培養(yǎng)的細胞？
由于體外培養(yǎng)的細胞自身沒有抵抗污染的能力，而在培養(yǎng)基中加抗生素的抗污染能力也是有限的，一般在細胞受到污染早期或污染較輕時，能及時處理并除去污染物，部分細胞還有可能得到挽救。通常情況下，會有哪些微生物會污染培養(yǎng)的細胞？一、霉菌污染污染的多是曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物，一般肉眼可見，較易被發(fā)現(xiàn)，短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁。倒置顯微鏡下可以看見細胞之間有縱橫交錯穿行的絲狀，樹枝狀或管狀菌絲，并漂浮在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈
2024
04-08

腫瘤組織的原代細胞培養(yǎng)有哪些注意事項？
原代培養(yǎng)是直接從生物體組織或器官的一部分進行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。腫瘤組織的原代細胞培養(yǎng)技術為腫瘤研究及治療提供充足的細胞來源是癌癥在體外研究的重要工具，與體內(nèi)研究相輔相成。但目前腫瘤細胞原代培養(yǎng)成功率不高的許多問題還需繼續(xù)探討與研究。腫瘤組織的原代細胞培養(yǎng)有哪些注意事項？讓我們一起來看看吧！注意點一：取材部位的選擇非常重要，應在癌細胞集中、細胞活力較好的部位取材，盡量避免在壞死區(qū)取材；注意點二：取材后應盡快培養(yǎng)，最好不要超過24h，如需耽擱時間，可將組織塊于培養(yǎng)液中浸泡，放置于冰浴或4℃冰箱；注
2024
04-08

核酸提取(磁珠法)常見的六大問題
核酸提取的方法很多，如煮沸裂解法、酚氯仿抽法、濃鹽法、陰離子去污劑法、異硫氰酸胍/苯酚法（Trizol法）、CTAB法原理（植物DNA提取經(jīng)典方法）、離心柱純化、磁珠法提取等，今天我們來看看核酸提取(磁珠法)常見的六大問題，從而更好的了解磁珠法提取核酸。Q：是不是誤區(qū)越多，提取效果越好？A：不是，磁珠的主要特點是既可以分散于液體中，也可以在外加磁場作用下以固態(tài)方式和液相分離，ren何試劑體系，磁珠和液體的比例都應該是有一定閾值的，超過一定的比例，過多的磁珠將因為無法均勻分散于液體中，而喪失其分散
2024
04-08

Elisa的檢測方法有哪些？
酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。Elisa的檢測方法有哪些？讓我們一起來看看吧！常見的有直接法、間接法、競爭法基雙抗夾心法，其中直接法和競爭法應用較少，應有最多的是雙抗夾心法，讓我們一一來看看它們是如何操作的吧！一、直接法將抗原固定于ELISA班上，然后用酶標抗體直檢測抗原。相較于其他類型的ELISA實驗，直接ELI
2024
04-08

如何利用流式進行細胞凋亡（Cell Apoptosis）分析
磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)是一種細胞膜活性物質(zhì)，正常細胞中，其位于細胞膜脂質(zhì)雙層內(nèi)側,在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內(nèi)側翻轉到細胞膜的表面。凋亡早期：磷脂膜(PS)外翻，但是細胞膜保持完整性，因此PI（與DNA結合）染色為陰性。AnnexinV是一種磷脂結合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，可以與凋亡早期外翻的磷脂膜(PS)結合。凋亡中晚期：磷脂膜(PS)外翻，但是細胞膜被破壞，AnnexinV和PI分別與磷脂酰絲氨酸和DNA結合。壞死細胞：沒有細胞膜，PI與

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