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賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司
中級會(huì)員 | 第8年
重組人BMP2的制備方法通常包括以下步驟2025/03/12
重組人BMP2的制備方法通常包括以下步驟:1.基因工程手段:首先,將編碼BMP-2的基因插入到表達(dá)載體中,然后將其轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞,如大腸桿菌,使宿主細(xì)胞能夠表達(dá)BMP-2。2.蛋白表達(dá):在適宜的培養(yǎng)條件下,使轉(zhuǎn)入基因的細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵,大規(guī)模生產(chǎn)BMP-2蛋白。3.細(xì)胞破碎與包涵體提?。和ㄟ^高壓勻漿等方法破壞細(xì)胞壁,收集并漂洗包含BMP-2的包涵體。4.變性與復(fù)性:使用尿素等變性劑使蛋白復(fù)性,通過控制pH值和尿素濃度,以及應(yīng)用超濾膜技術(shù),使變性的BMP-2蛋白重新折疊恢復(fù)活性。5.純化:采用離子交換層
CRD系列無血清細(xì)胞凍存液使用常見問題匯總2025/03/07
1、常規(guī)的細(xì)胞凍存主要采用DMSO+血清的方式,賽爾瑞成進(jìn)行凍存液的無血清、低(無)DMSO、無蛋白這些方向持續(xù)開發(fā)的原因是什么?細(xì)胞凍存液的研發(fā)歷史可以追溯到20世紀(jì)中期,隨著細(xì)胞生物學(xué)和低溫生物學(xué)的發(fā)展,凍存液逐漸優(yōu)化和改進(jìn)。20世紀(jì)60年代,DMSO成為常用冷凍保護(hù)劑,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凍存。隨后,凍存液中開始添加胎牛血清(FBS)等成分,提供營養(yǎng)和保護(hù)。20世紀(jì)80年代,科學(xué)家優(yōu)化凍存液配方,調(diào)整DMSO和血清濃度,減少毒性并提高凍存效果。DMSO作為常用的冷凍保護(hù)劑,在較高濃度或長時(shí)間暴露
買大腸桿菌培養(yǎng)基送大腸桿菌專用破菌液或甘油菌2025/03/05
活動(dòng)內(nèi)容:購買1瓶賽多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基(規(guī)格:500mL)或1袋賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基(規(guī)格:10L),送2瓶大腸桿菌專用破菌液(規(guī)格:500mL)或1支甘油菌株(規(guī)格:0.5mL,TOP10、DH5a、Bl21(DE3)任選一種)注:1.活動(dòng)日期:截止到2025年3月31日;2.終端與經(jīng)銷活動(dòng)一致;3.本活動(dòng)最終解釋權(quán)歸賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司所有。一、賽多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基賽多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基是賽爾瑞成研發(fā)的一種適合于大腸桿菌生長和蛋白表達(dá)
重組人Flt3L的制備是一個(gè)復(fù)雜且精細(xì)的過程2025/02/24
重組人Flt3L的制備工藝是一個(gè)復(fù)雜且精細(xì)的過程,以下是對其制備工藝的詳解:1.基因構(gòu)建與載體選擇基因合成或克?。菏紫刃枰@取人Flt3L的基因序列,這可以通過從人體細(xì)胞中提取mRNA,經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,再通過PCR等技術(shù)擴(kuò)增出Flt3L基因;也可以根據(jù)已知的基因序列進(jìn)行人工合成。將得到的Flt3L基因插入到合適的表達(dá)載體中,該載體應(yīng)具備在宿主細(xì)胞中高效表達(dá)、穩(wěn)定遺傳等特性。載體元件選擇:表達(dá)載體通常含有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等元件。啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合并啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵部位,其活性強(qiáng)
重組人Flt3L存放條件有哪些?2025/02/21
重組人Flt3L是一種重要的細(xì)胞因子,其存放條件對保持其活性和穩(wěn)定性至關(guān)重要。1.低溫保存重組人Flt3L通常需要在低溫條件下保存,例如2~8℃的冷藏環(huán)境。這有助于減緩蛋白質(zhì)的降解和變性,從而保持其生物活性。2.避免反復(fù)凍融反復(fù)凍融會(huì)破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),導(dǎo)致其活性降低。因此,F(xiàn)lt3L應(yīng)避免多次凍融,以保持其最佳活性。3.避免光照長時(shí)間的光照,特別是紫外線,可能會(huì)引起蛋白質(zhì)的變性和失活。因此,F(xiàn)lt3L應(yīng)存放在避光的環(huán)境中,例如使用棕色玻璃瓶或其他遮光容器。4.無菌操作在處理和保存重組人Flt3L
無血清細(xì)胞凍存液對比傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢2025/02/12
細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法,其中細(xì)胞凍存液,作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液,不僅僅是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,在細(xì)胞的購買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等,從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑,在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中,可使冰點(diǎn)降低,提高細(xì)胞膜對水的通透性,
重組蛋白表達(dá)服務(wù)-賽爾瑞成2025/02/06
重組蛋白表達(dá)服務(wù)-賽爾瑞成大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)是較早被采用,也是目前掌握的較為熟悉的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。大腸桿菌作為用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)格地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點(diǎn),而且其表達(dá)外源基因產(chǎn)物的水平遠(yuǎn)高于其它基因表達(dá)系統(tǒng)。因此大腸桿菌是目前應(yīng)用廣泛的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)也更適合于分子量較小重組蛋白的制備。重組蛋白表達(dá)服務(wù)-賽爾瑞成的優(yōu)勢:1.20年的大腸桿菌原核蛋白表達(dá)制備的經(jīng)驗(yàn);2.擁有多種自主優(yōu)化
重組人BMP4的制備工藝說明2025/01/20
重組人BMP4的制備工藝說明如下:1.基因構(gòu)建與表達(dá)載體選擇基因合成或克?。簭娜梭w組織中提取總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)等技術(shù)獲得BMP-4的cDNA?;蛘吒鶕?jù)已知的BMP-4基因序列進(jìn)行人工合成。將獲得的BMP-4基因片段插入到合適的表達(dá)載體中,如質(zhì)粒載體,構(gòu)建重組表達(dá)載體。常用的表達(dá)載體包括pET系列、pcDNA系列等,這些載體通常含有啟動(dòng)子、選擇標(biāo)記基因和多克隆位點(diǎn)等元件,以便于后續(xù)的基因表達(dá)和篩選。表達(dá)宿主選擇:可以選擇大腸桿菌、酵母細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等作為表達(dá)宿主。
如何檢測重組人BMP4的活性?2025/01/17
以下是一些檢測重組人BMP4活性的方法:1.細(xì)胞水平檢測堿性磷酸酶活性檢測:BMP-4可以誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生堿性磷酸酶。將重組人BMP-4與特定的細(xì)胞系共同培養(yǎng),如ATDC-5細(xì)胞等,在一定時(shí)間后,通過檢測細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶的活性來反映BMP-4的活性。常用的方法是采用比色法或化學(xué)發(fā)光法等檢測堿性磷酸酶對特定底物的催化作用,從而確定其活性水平。細(xì)胞增殖和分化檢測:BMP-4能夠促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞等向成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等方向增殖和分化。將重組人BMP-4作用于間充質(zhì)干細(xì)胞等靶細(xì)胞,經(jīng)過一段時(shí)間的培養(yǎng)后,通過
以下是對重組蛋白純化要求的分析2024/12/26
重組蛋白純化是生物學(xué)研究中的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù),旨在從生物體中分離并純化目標(biāo)重組蛋白,以便研究其特定功能和結(jié)構(gòu)。重組蛋白純化的意義:1.提高蛋白質(zhì)純度:通過一系列分離和純化步驟,去除細(xì)胞裂解液中的雜質(zhì)和非目標(biāo)蛋白,從而獲得高純度的重組蛋白。2.保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性:高純度的重組蛋白有助于減少實(shí)驗(yàn)誤差,提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和重復(fù)性。3.支持后續(xù)研究和應(yīng)用:純化的重組蛋白可用于結(jié)構(gòu)解析、功能研究、藥物篩選等多個(gè)領(lǐng)域的深入研究和應(yīng)用。以下是對重組蛋白純化要求的分析:1.親和標(biāo)簽的選擇:選擇親和標(biāo)簽時(shí)需要考慮的
重組蛋白純化的工藝過程2024/12/23
重組蛋白純化是生物制藥過程中的關(guān)鍵步驟,其目的在于從復(fù)雜的生物混合物中提取出高純度的目標(biāo)蛋白。重組蛋白純化的工藝過程涉及多個(gè)階段,以下是對這些階段的詳細(xì)介紹:1.樣品準(zhǔn)備預(yù)處理:在準(zhǔn)備好所有設(shè)備及耗材后,對目的蛋白進(jìn)行預(yù)處理,去除雜質(zhì)、組織、脂肪等,保證樣品的生物活性。裂解細(xì)胞:如果目標(biāo)蛋白存在于細(xì)胞內(nèi),需要通過機(jī)械或化學(xué)方法裂解細(xì)胞,釋放出目標(biāo)蛋白。2.初步分離離心:利用離心技術(shù)將大部分細(xì)胞碎片和未破裂的細(xì)胞分離出去。過濾:通過過濾器進(jìn)一步去除較大的雜質(zhì)顆粒。3.層析法純化離子交換色譜:基于蛋
細(xì)胞因子新品∣重組人/小鼠FGF8b & 重組人M-CSF2024/12/09
重組人/小鼠FGF8b重組人/小鼠成纖維細(xì)胞生長因子8b背景介紹成纖維細(xì)胞生長因子8(fibroblastgrowthfactor8,F(xiàn)GF8)是成纖維細(xì)胞生長因子(FGFs)家族的成員之一。在原腸胚時(shí)期和與細(xì)胞的早期分化過程中起著重要作用,并與腦、顱面器官、臟器、骨骼、四肢的形成有著重要的關(guān)系,是胚胎發(fā)育中重要的生長因子。在正常成人體內(nèi),F(xiàn)GF8于腎臟、前列腺、睪丸、乳腺、骨髓和外周血白細(xì)胞中低水平表達(dá)。但在前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌與某些炎癥部位FGF8呈現(xiàn)過量表達(dá)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),其對激素依
Human OSM(重組人抑瘤素M,Oncostatin M)-賽爾瑞成2024/11/21
HumanOSM(重組人抑瘤素M,OncostatinM)-賽爾瑞成背景介紹1986年Zarling等從PMA活化U937細(xì)胞培養(yǎng)上清中分離純化到一種因子,這種因子有明顯抑制A375人黑素瘤細(xì)胞生長而命名為抑瘤素-M(oncostatinM,OSM)。OSM屬于白細(xì)胞介素-6家族成員,它主要由免疫細(xì)胞產(chǎn)生,例如活化的T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等。OSM是一種參與調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、骨組織代謝、肝臟再生、誘導(dǎo)心肌細(xì)胞的去分化、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生其他細(xì)胞因子和生長因子,并刺激血管生成的多效性分
細(xì)胞因子新品∣高活性重組人激活素A(recombinant human Activin A)2024/11/07
背景介紹激活素A(ActivinA)是一種功能強(qiáng)大的多功能細(xì)胞因子,屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)超家族的成員。ActivinA廣泛表達(dá)于各種細(xì)胞和組織中,具有很強(qiáng)的生物活性,作用廣泛,功能多樣,是迄今為止研究最多的激活素。ActivinA發(fā)揮作用時(shí),首先與表面II型激活素受體(ActIIRA或ActRIIB)結(jié)合,隨后募集和磷酸化I型激活素受體(ActRI),磷酸化的ActRI又進(jìn)一步激活Smad2和Smad3。ActivinA主要通過Smad2/3蛋白發(fā)出信號(hào),它們與Smad4形成復(fù)合物
細(xì)胞因子新品∣高活性重組人抑瘤素M (Oncostatin M,OSM)2024/11/01
背景介紹1986年Zarling等從PMA活化U937細(xì)胞培養(yǎng)上清中分離純化到一種因子,這種因子有明顯抑制A375人黑素瘤細(xì)胞生長而命名為抑瘤素-M(oncostatinM,OSM)。OSM屬于白細(xì)胞介素-6家族成員,它主要由免疫細(xì)胞產(chǎn)生,例如活化的T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等。OSM是一種參與調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、骨組織代謝、肝臟再生、誘導(dǎo)心肌細(xì)胞的去分化、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生其他細(xì)胞因子和生長因子,并刺激血管生成的多效性分子。目前的體外研究已證明,OSM在造血、細(xì)胞生長分化、炎癥反應(yīng)、代謝
細(xì)胞因子新品│高活性重組人TPO(重組人血小板生成素)2024/10/29
背景介紹早在1958年,Kelemen等人就發(fā)現(xiàn)在血小板減少癥病人或動(dòng)物的血漿中,存在一種物質(zhì),可以促進(jìn)巨核細(xì)胞的成熟及血小板的生成,稱之為血小板生成素(Thrombopoietin,TPO)。但是直到1994年,5個(gè)研究小組采用反相或常規(guī)生物技術(shù),從不同樣本中幾乎同時(shí)純化得到TPO,才使得TPO在各個(gè)領(lǐng)域的研究迅速發(fā)展。TPO,又稱為巨核細(xì)胞生長發(fā)育子(megakaryocytegrowthdevelopmentfactor,MGDF),是調(diào)節(jié)巨核細(xì)胞增殖、分化、成熟和介導(dǎo)血小板生成的最主要調(diào)
大腸桿菌培養(yǎng)基,選擇增強(qiáng)型LB液體培養(yǎng)基2024/10/17
傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基是一種應(yīng)用廣泛和普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供無機(jī)鹽。賽爾瑞成推出一款液體、無菌、即用型大腸桿菌培養(yǎng)基——賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基!賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基是在傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來,能夠較傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基大大提高菌體密度。同時(shí),可用作大腸桿菌的原核表達(dá)培養(yǎng)基(注:需添加誘導(dǎo)劑),可以提高目的蛋白表達(dá)量數(shù)倍。使用賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌培養(yǎng)時(shí),操
賽多培噬菌體抑制劑,解決噬菌體污染難題!2024/10/11
噬菌體是一類侵害細(xì)菌(包括放線菌)的病毒,又稱細(xì)菌病毒,由于它的個(gè)體比細(xì)菌小數(shù)百倍,可以附著于塵埃上隨風(fēng)飄移,因此能長久地?cái)U(kuò)散和傳播到一定的范圍,并能脫離寄主而存活。它在寄主細(xì)胞內(nèi)能大量迅速繁殖子代噬菌體,如在十幾分鐘至一個(gè)小時(shí)左右,一個(gè)細(xì)胞感染一個(gè)噬菌體后可以釋放出數(shù)十個(gè)至數(shù)百個(gè)子代噬菌體。一旦發(fā)生噬菌體污染,會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵異常、倒罐,使科研和工業(yè)生產(chǎn)遭到嚴(yán)重?fù)p失。在發(fā)酵工業(yè)中,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵菌浸染噬菌體后,就要從菌種,培養(yǎng)基,環(huán)境,發(fā)酵系統(tǒng)管路,地溝,污水池,排風(fēng)口等進(jìn)行全面的消毒排查,消毒流程十分繁
重組人白介素2的主要作用是什么?2024/09/18
重組人白介素2(RecombinantHumanInterleukin-2,簡稱rIL-2)是一種通過基因工程技術(shù)制備的蛋白質(zhì),其結(jié)構(gòu)和功能與人體自然產(chǎn)生的白介素2(IL-2)相似。白介素2是一種細(xì)胞因子,主要由活化的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生,對免疫系統(tǒng)具有重要的調(diào)節(jié)作用。重組人白介素2的主要作用如下:1.促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖:重組人白介素能夠刺激T淋巴細(xì)胞的增殖和分化,增強(qiáng)免疫應(yīng)答。2.增強(qiáng)NK細(xì)胞活性:重組人白介素能夠提高自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)的活性,增強(qiáng)其對腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的殺傷能力。3.誘導(dǎo)
白介素1β (IL-1β ),重組人白介素1β -賽爾瑞成2024/09/14
白細(xì)胞介素-1β(Interleukin—1β,IL-1β)主要由先天免疫系統(tǒng)的細(xì)胞:單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,也可以從上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、滑膜細(xì)胞、神經(jīng)元、肥大細(xì)胞以及膠質(zhì)細(xì)胞如小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞等細(xì)胞中釋放。IL-1β的釋放主要涉及三個(gè)步驟,即:(1)產(chǎn)生生物活性不強(qiáng)的原IL-1β;(2)Caspase-1裂解原IL-1β,產(chǎn)生成熟的、具有生物活性的IL-1β;(3)將成熟的IL-1β分泌到細(xì)胞外環(huán)境。IL-1β生物學(xué)功能IL-1β作為一種關(guān)鍵的促炎細(xì)胞因子,參與多種自身免疫
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