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伊萊博生物科技(上海)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
C57BL/6J小鼠玻璃體注射方法2024/11/25
1.C57BL/6J小鼠腹腔注射麻醉劑,觀察小鼠呼吸均勻、肌肉松弛、四肢無(wú)活動(dòng),胡須無(wú)觸碰反應(yīng),可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2.小鼠右眼滴入托比卡胺擴(kuò)瞳藥,充分?jǐn)U瞳。3.小鼠右眼用無(wú)菌生理鹽水沖洗干凈后滴入局部丙美卡因。4.在顳側(cè),用34G針頭由角膜后緣1mm位置插入玻璃體腔內(nèi),針頭先垂直進(jìn)入,然后傾斜,慢慢注射病毒,注射完畢,慢慢抽出針頭。5.術(shù)畢滴加左氧氟沙星眼液預(yù)防感染。6.將小鼠放入37℃加熱墊上復(fù)蘇。伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)
C57BL/6J小鼠前房注射方法2024/11/20
1.C57BL/6J小鼠腹腔注射麻醉劑,觀察小鼠呼吸均勻、肌肉松弛、四肢無(wú)活動(dòng),胡須無(wú)觸碰反應(yīng),可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2.小鼠右眼滴入托比卡胺擴(kuò)瞳藥,充分?jǐn)U瞳。3.小鼠右眼用無(wú)菌生理鹽水沖洗干凈后滴入局部藥丙美卡因。4.用34G針頭由角膜緣平行進(jìn)入,緩慢注入前房5μl微珠。5.術(shù)畢滴加左氧氟沙星眼液預(yù)防感染。6.將小鼠放入37℃加熱墊上復(fù)蘇。伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平方米,擁有先進(jìn)的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫(kù)、樣本保存庫(kù)等。
類器官培養(yǎng)技術(shù)2024/11/08
類器官是一種原代組織來(lái)源的成體干細(xì)胞體外自組裝成的3D器官型結(jié)構(gòu),可分化為多個(gè)器官特異性的細(xì)胞類型,并能夠表現(xiàn)出細(xì)胞與細(xì)胞之間、細(xì)胞與其周圍基質(zhì)之間的相互作用和空間位置形態(tài),在體外重現(xiàn)人體真實(shí)器官的一些關(guān)鍵功能和結(jié)構(gòu),并具有穩(wěn)定的表型和遺傳學(xué)特征。作為新興的生物學(xué)模型,類器官具有細(xì)胞系和動(dòng)物模型所不具有的優(yōu)勢(shì),其細(xì)胞組成和結(jié)構(gòu)更加類似人體組織,可提供一個(gè)高度生理相關(guān)的系統(tǒng),是基礎(chǔ)研究的模型。同時(shí),類器官模型相對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物更加經(jīng)濟(jì),且時(shí)效性更高,可以提高研究效率。
伊萊博生物科研平臺(tái)組成部分有哪些?2024/11/08
實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)平臺(tái):實(shí)驗(yàn)室開展細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞儀、病理染色、Q-PCR實(shí)驗(yàn)、Westernblot、生化和酶聯(lián)免疫、高效液相色譜等常規(guī)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),并提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和培訓(xùn);02實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心是目前國(guó)內(nèi)基于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型構(gòu)建的平臺(tái),可以提供大動(dòng)物和小動(dòng)物的模型構(gòu)建服務(wù),動(dòng)物進(jìn)出口服務(wù),無(wú)菌動(dòng)物飼養(yǎng)等;03科研課題設(shè)計(jì):協(xié)助客戶基于課題、樣本庫(kù)開展前沿課題設(shè)計(jì),指導(dǎo)完成課題設(shè)計(jì)、基金申請(qǐng)撰寫等;04高通量技術(shù)服務(wù):蛋白組學(xué)(iTRAQ/TMT、SILAC)、代謝組學(xué)(LC-MS、GC
大鼠急性全層皮膚缺損模型的建立2024/10/25
在動(dòng)物背部脊柱兩側(cè)旁2cm,用特制打孔器或利刀全層切除皮膚。創(chuàng)面形狀一般選擇圓形或方形,直徑大小可根據(jù)實(shí)驗(yàn)自行設(shè)計(jì),深至皮下,但不要傷及脊柱旁的脂肪和筋膜。此模型可用于評(píng)價(jià)藥物療效和觀察創(chuàng)傷愈合的自然過(guò)程。1.麻醉:3%的麻醉溶液,大鼠腹腔內(nèi)注射麻醉。2.清洗消毒:將大鼠固定在恒溫手術(shù)臺(tái)上,使用刀片進(jìn)行背部剃毛,溫水擦凈背部皮膚,安爾碘消毒兩遍。3.構(gòu)建皮膚缺損:用滅菌打孔器作標(biāo)記,使用滅菌眼科剪沿大鼠背部標(biāo)記剪開皮膚,制作兩個(gè)圓形(直徑10mm)全層皮膚缺損。加入20μL金葡菌懸浮液(108C
國(guó)自然熱點(diǎn)追蹤——核心代謝改變?nèi)绾斡绊懰幬矧?qū)動(dòng)的抗腫瘤免疫2024/10/18
腫瘤的惡性轉(zhuǎn)化和進(jìn)展伴隨著多種代謝途徑的變化,主要體現(xiàn)在以下三個(gè)方面。首先,一些關(guān)鍵的酶編碼基因發(fā)生突變,如異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)或IDH2,在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和某些類型的白血病中常見,導(dǎo)致2-羥基戊二酸(2HG)的積累,從而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。其次,一些致癌蛋白或抑癌因子的遺傳或表觀遺傳改變也直接影響代謝途徑,例如KRAS的激活突變和腫瘤蛋白p53(TP53)的失活已證實(shí)會(huì)影響代謝。第三,癌細(xì)胞能夠根據(jù)腫瘤微環(huán)境的變化調(diào)整自身的代謝,如在缺氧條件下通過(guò)低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)重編代謝。雖然這
鼠腎缺血再灌注損傷模型2024/10/18
腎缺血再灌注損傷(renalischemia/reperfusioninjury,IRI)模型是一種典型的缺氧型腎小管損傷動(dòng)物模型,也是目前用于研究急性腎損傷(AKI)及慢性腎臟疾?。–KD)的最主要的動(dòng)物模型,在臨床中,大約50%的AKI發(fā)生都是由腎缺氧造成的,腎的IRI往往發(fā)生在手術(shù),燒傷等情形中。1.雌性C57BL/6小鼠麻醉后,左側(cè)腹部去毛,消毒備皮。2.腹部中線切開,暴露左側(cè)腎臟,分離腎蒂。3.用3號(hào)手術(shù)線活結(jié)結(jié)扎腎蒂25分鐘。4.打開手術(shù)線活結(jié)后,目視證實(shí)腎臟再灌注。5.然后關(guān)閉切口
去卵巢致骨質(zhì)疏松模型2024/10/12
模型建立的原理:成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞在人體骨代謝中有較為重要的作用。成骨細(xì)胞的作用是調(diào)節(jié)骨組織的形成,而破骨細(xì)胞的作用是溶骨,二者相輔相成,共同參與骨的成長(zhǎng)和改建。若其中一類細(xì)胞過(guò)度活躍都會(huì)引起疾病,如成骨細(xì)胞過(guò)于活躍就會(huì)發(fā)生骨質(zhì)增生,而破骨細(xì)胞過(guò)度活躍就會(huì)引起骨質(zhì)疏松。小鼠雙側(cè)卵巢摘除術(shù)(ovariectomy,OVX),建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型,雌激素對(duì)破骨細(xì)胞的抑制作用減弱,破骨細(xì)胞的數(shù)量增加、壽命延長(zhǎng),導(dǎo)致其骨吸收功能增強(qiáng)。方法:1.麻醉10周齡的C57BL/6J雌性小鼠,腹部剃毛。2.
小鼠單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)2024/09/27
腎纖維化作為慢性腎衰竭進(jìn)展的終末歸途之一,其發(fā)生及發(fā)展一直是學(xué)術(shù)界的熱點(diǎn)研究課題。單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)(unilateralureteralobstruction,UUO),是構(gòu)建腎纖維化的模型。UUO在短期內(nèi)就可構(gòu)建出良好的腎小管和腎間質(zhì)的纖維化癥狀,通常為7-14d,具有重復(fù)率高、損傷小、死亡率低等優(yōu)點(diǎn)。1.麻醉6-8周齡的C57BL/6小鼠。2.腹部剃毛備皮。3.打開腹腔,撥開腸管,確定右側(cè)輸尿管。4.在UUO模型中,在右輸尿管的兩個(gè)點(diǎn)結(jié)扎,并在它們之間切開。5.在UUO模型后的14天處死小鼠
過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的小鼠皮膚白斑模型2024/09/12
動(dòng)物:雌性C57小鼠,體重20±2g。建模:麻醉小鼠,從背部皮膚上刮下毛發(fā)并擦洗。使用過(guò)氧化氫(5%)每天涂抹兩次,持續(xù)6周,在此期間,允許小鼠正常飲食。正常對(duì)照組小鼠涂抹蒸餾水。模型評(píng)估:在最后一次涂藥12小時(shí)后,犧牲小鼠,取血和皮膚。皮膚的HE染色病理分析等。伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長(zhǎng)江軟件園。2022年1月與上海交通大學(xué)藥學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新,不僅在人類基因密碼等方面取得重大進(jìn)展,還建立了包含腫瘤生物學(xué)、病
大鼠松果體取材實(shí)驗(yàn)2024/09/12
松果體是位于丘腦上部的神經(jīng)內(nèi)分泌腺,分泌褪黑激素。這種激素參與許多生理過(guò)程的控制,包括晝夜節(jié)律、光周期哺乳動(dòng)物的生殖功能、體溫、免疫、心血管系統(tǒng)。1.解剖:位于兩大腦半球和小腦之間。2.取材:大鼠麻醉,剝離出完整的大腦、小腦、腦干,注意不要破壞腦膜。3.位置:圖1成年大鼠松果體;圖2新生大鼠松果體。伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平方米,擁有先進(jìn)的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫(kù)、樣本保存庫(kù)等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心近1800平方米,可滿
生物信息學(xué)研究平臺(tái)2024/08/30
生物信息學(xué)(bioinformatics)是研究生物信息的搜索、處理、分析和解釋等各方面的一門學(xué)科,通過(guò)綜合利用分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué),以及信息技術(shù)等來(lái)研究生物學(xué)的問(wèn)題,從而揭示復(fù)雜的生物數(shù)據(jù)背后,所具有的生物現(xiàn)象和規(guī)律。Bioinformatics是一門交叉學(xué)科,從生物計(jì)算、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)到臨床醫(yī)學(xué)都有廣泛的應(yīng)用。研究領(lǐng)域:服務(wù)內(nèi)容:分析思路:伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平方米,擁有先進(jìn)的儀器設(shè)備
蛋白質(zhì)絕對(duì)定量2024/08/09
項(xiàng)目背景:經(jīng)典的蛋白質(zhì)絕對(duì)定量主要依賴于抗體和重組蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,例如ELISA。研究人員利用串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行多蛋白質(zhì)同時(shí)絕對(duì)定量的新方法-MRM/PRM。MRM/PRM是質(zhì)譜技術(shù)的一種擴(kuò)展,用于對(duì)特定的蛋白質(zhì)或肽進(jìn)行高靈敏度和高選擇性的定量分析。特別適合于生物樣本中低豐度蛋白質(zhì)的檢測(cè)。這種方法在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中具有重要意義,尤其是在尋找生物標(biāo)志物和研究疾病機(jī)制方面。案例展示:血液中6種蛋白質(zhì)同時(shí)進(jìn)行MRM分析GlobalStabilityofPlasmaProteomesforMassSpectr
蛋白質(zhì)鑒定以及定量蛋白質(zhì)組學(xué)2024/08/09
項(xiàng)目背景:通過(guò)LC-MS/MS技術(shù)對(duì)樣本進(jìn)行非靶向掃描分析,將質(zhì)譜數(shù)據(jù)與該物種理論數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),以鑒定樣本中的蛋白質(zhì)及其序列。適用于IP、Co-IP的膠點(diǎn)、膠條或溶液等樣本的蛋白鑒定以及新物種蛋白質(zhì)表達(dá)鑒定。傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)組學(xué)定量技術(shù)分為非標(biāo)記定量和標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué):非標(biāo)記定量方法稱為L(zhǎng)abel-free,標(biāo)記定量技術(shù)包括基于標(biāo)簽的TMT/iTRAQ和同位素標(biāo)記的SILAC。鑒于質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展,數(shù)據(jù)非依賴采集(DIA)模式也得到廣泛的應(yīng)用。案例展示:質(zhì)譜用于互作蛋白質(zhì)鑒定(CoIP樣本)定量蛋
蛋白質(zhì)翻譯后修飾2024/08/09
項(xiàng)目背景:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-TranslationalModification,PTM)是指在翻譯后,蛋白質(zhì)在其氨基酸鏈上經(jīng)歷的化學(xué)修飾,這些修飾可以影響蛋白質(zhì)的功能、活性、穩(wěn)定性和細(xì)胞定位。PTM是細(xì)胞調(diào)控的重要機(jī)制,分別通過(guò)添加、去除或更換不同的化學(xué)基團(tuán)來(lái)調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的性質(zhì)。常見的PTM包括:磷酸化、糖基化、甲基化、乙?;⒎核鼗?。其中磷酸化在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝調(diào)節(jié)、細(xì)胞周期控制等生物過(guò)程起著關(guān)鍵作用。案例展示:人體內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化存在組織特異性
小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離方法2024/08/02
1.C57BL/6小鼠脫頸處死。2.腹部剃毛,75%酒精消毒。3.用注射器吸取10mL冷的生理鹽水,提起小鼠腹中部的皮膚和腹膜,讓針頭從提取處穿刺進(jìn)入小鼠腹腔,緩緩?fù)谱⑸睇}水。4.輕揉小鼠腹部數(shù)次,靜置3min,使液體在腹腔內(nèi)充分流動(dòng)。5.用鑷子提起下腹皮膚,使與腹膜分開,在鑷子提取處將皮膚剪開一個(gè)小口,再撕開整個(gè)腹部皮膚,使腹膜暴露。6.將注射器針頭插入縫隙處抽取腹腔液。7.將腹腔液在250g下離心5分鐘。8.將細(xì)胞重懸在含有10%FBS的RPMI1640培養(yǎng)基中,并在37°C、5%CO2的
小動(dòng)物核磁共振成像技術(shù)2024/07/23
一、小動(dòng)物核磁共振成像原理核磁共振成像(NuclearMagneticResonanceImaging,簡(jiǎn)稱NMRI),也稱磁共振成像(MagneticResonanceImaging,簡(jiǎn)稱MRI),依據(jù)所釋放的能量在物質(zhì)內(nèi)部不同結(jié)構(gòu)環(huán)境中不同的衰減,通過(guò)外加梯度磁場(chǎng)檢測(cè)所發(fā)射出的電磁波,即可得知構(gòu)成這一物體原子核的位置和種類,據(jù)此可以繪制成物體內(nèi)部的結(jié)構(gòu)圖像。二、小動(dòng)物核磁共振成像特點(diǎn)1.無(wú)電離輻射性(放射線)損害;2.無(wú)骨性偽影;3.多方向(橫斷、冠狀、矢狀切面等)、多參數(shù)快速成像;4.高度
小鼠睪丸網(wǎng)注射方法2024/07/19
小鼠睪丸網(wǎng)注射方法1.麻醉C57BL/J小鼠。2.術(shù)野備用,碘伏消毒。3.在恥骨聯(lián)合上方做1.5cm的切口,拉出一側(cè)睪丸和附睪。4.在體視顯微鏡下,將抽好轉(zhuǎn)染液的胰島素針度的角度插進(jìn)睪丸網(wǎng)與輸出管連接的凸起處,緩慢將轉(zhuǎn)染液注入睪丸生精小管中。5.每側(cè)睪丸網(wǎng)注射50ul轉(zhuǎn)染液,使得睪丸表面大部分生精小管變藍(lán)。6.注射后,停針2min。實(shí)驗(yàn)服務(wù):1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq3.蛋白
10-12周齡雌性大鼠卵巢顆粒細(xì)胞的原代培養(yǎng)2024/07/08
1.10-12周齡雌性SD大鼠,皮下注射孕馬血清促性腺激素(PregnantMareSerumGonadotropin,PMSG)60IU,48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉,可見白色的脂肪組織,拉出脂肪組織,可見到粉紅色的卵巢,摘除卵巢。4.取卵巢放入預(yù)冷的含雙抗的緩沖液中,用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡,釋放顆粒細(xì)胞。6.
3-4周齡雌性大鼠卵巢顆粒細(xì)胞的原代培養(yǎng)2024/06/28
1.3-4周齡雌性SD大鼠,皮下注射孕馬血清促性腺激素(PregnantMareSerumGonadotropin,PMSG)60IU,48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉,可見白色的脂肪組織,拉出脂肪組織,可見到粉紅色的卵巢,摘除卵巢。4.取卵巢放入預(yù)冷的含雙抗的緩沖液中,用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡,釋放顆粒細(xì)胞。6.將懸
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