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ELISA的試劑盒的固相載體2011/11/04: 固相載體在ELISA測(cè)定過(guò)程中作為吸附劑和容器，不參與化學(xué)反應(yīng)?？勺鱁LISA中載體的材料很多，zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來(lái)的免疫學(xué)活性，加之它的價(jià)格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板zui為常用，于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板，上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè)，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的，放入座架后，大

幾種常用植物培養(yǎng)基2011/11/04: 組織培養(yǎng)是否成功，在很大程度上取決于對(duì)培養(yǎng)基的選擇。不同培養(yǎng)基有不同特點(diǎn)，適合于不同的植物種類和接種材料。開(kāi)展組織培養(yǎng)活動(dòng)時(shí)，應(yīng)對(duì)各種培養(yǎng)基進(jìn)行了解和分析，以便能從中選擇使用。下面介紹組織培養(yǎng)幾種常用培養(yǎng)基。1、MS培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基是目前普遍使用的培養(yǎng)基。它有較高的無(wú)機(jī)鹽濃度，對(duì)保證組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)和加速愈傷組織的生長(zhǎng)十分有利。由于配方中的離子濃度高，在配制、貯存、消毒等過(guò)程中，即使有些成分略有出入，也不致影響離子間的平衡。MS固體培養(yǎng)基可用來(lái)誘導(dǎo)愈傷組織，或用于胚、莖段、莖尖及花藥培養(yǎng)

培養(yǎng)基的質(zhì)量判斷2011/11/04: 1.外型:顏色、粉末細(xì)度都應(yīng)該均勻。2.溶解性:培養(yǎng)基能夠*溶解，這樣可以避免培養(yǎng)基內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的流失。3.pH值:pH值的測(cè)定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異。4.水分:培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成份很豐富，利于微生物的滋長(zhǎng)，因此水分的含量控制可以延長(zhǎng)有效期。5.冰點(diǎn)滲透壓:細(xì)胞必須生活在合適的滲透壓環(huán)境中；同時(shí)滲透壓值的測(cè)定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異。6.菌落總數(shù):粉末培養(yǎng)基不是無(wú)菌制劑，培養(yǎng)基本身的營(yíng)養(yǎng)成分很豐富，容易滋生微生物，因此菌落的控制可以延長(zhǎng)有效期7.細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn):可檢查細(xì)胞培養(yǎng)基是否有促生長(zhǎng)的能力，

動(dòng)物血清常見(jiàn)問(wèn)題2011/11/01: 血清是細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要的元素之一。在實(shí)驗(yàn)室操作中要注意及處理方法：1.血清保存:建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.解凍血清的方法:建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成

血清的主要作用2011/11/01: 血清指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。血清主要作用：1.提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。2.提供激素和各種生長(zhǎng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素、類固醇激素等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。3.提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。4.提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼

血清素2011/11/01: 血清素重吸收抑制劑就是5-羥色胺重吸收抑制劑，簡(jiǎn)稱SSRIs，百憂解（鹽酸氟西汀）的實(shí)質(zhì)，是新一類的效果好而副作用較小的抗抑郁藥物。是體內(nèi)產(chǎn)生的一種神經(jīng)傳遞素；不存在于食物中。但有著作表明有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可參與合成血清素，這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括色氨酸（一種氨基酸），Ω-3脂肪酸，鎂和鋅。血清素是調(diào)節(jié)神經(jīng)活動(dòng)的一種重要物質(zhì)。有些肌體組織當(dāng)受到某些藥物作用時(shí)，可以釋放出5-羥色胺，例如一個(gè)利血平分子可以使受作用的組織釋放出幾百個(gè)5-羥色胺分子，因而產(chǎn)生利血平的一系列生理作用。作為自體活性物質(zhì)，約90%合成和分布

三點(diǎn)鑒定抗血清質(zhì)量2011/11/01: 抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數(shù)主要有幾項(xiàng)：1．親和性（affinity）是指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強(qiáng)度，常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正／逆向反應(yīng)速度常數(shù)的比值，單位為稀釋度單位（L／mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結(jié)合下降50％；而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)（Kd），其單位為濃度單位（mol／L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，需選用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清

血清保存時(shí)需注意的事項(xiàng)2011/11/01: 血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。我們?cè)诒４嫜宓臅r(shí)候需要注意以下幾點(diǎn)，以便順利完成您的實(shí)驗(yàn)：1、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)

培養(yǎng)基的鑒別2011/11/01: 一、EMB培養(yǎng)基:常用于鑒別E.coli蛋白胨10g乳糖5g蔗糖5g磷酸氫二鉀2g伊紅Y0.4g美藍(lán)0.065g蒸餾水1000gpH7.2二、2216E培養(yǎng)基配方:分離海洋微生物的培養(yǎng)基配方,蛋白胨5g酵母膏1g磷酸高鐵0.01g瓊脂15~20g陳海水1000ml煮沸氫氧化鈉（5%）的溶液調(diào)PH值7.6~7.8.三、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基:可用于檢測(cè)水中大腸桿菌的含量,首先按以下組成配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基,蛋白胨10gNaCl5g,瓊脂15~20g.將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000mL，調(diào)節(jié)pH為7.6

使用無(wú)血清培養(yǎng)基2011/10/27: 在即將出版的3月份的《生物技術(shù)趨勢(shì)》（TrendsinBiotechnology）雜志中，來(lái)自責(zé)任醫(yī)藥醫(yī)師協(xié)會(huì)（PhysiciansCommitteeforResponsibleMedicine）的科學(xué)家和醫(yī)生倡導(dǎo)大家都使用無(wú)血清的培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)細(xì)胞。平時(shí)科研人員所使用的胎牛血清是通過(guò)穿刺胎牛心臟獲得的，在這個(gè)過(guò)程中通常不采用任何麻醉劑。zui近，隨著科技不斷進(jìn)步人類細(xì)胞可以在沒(méi)有動(dòng)物血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，這讓科學(xué)家和研究人員在做細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候可以更加安全，同時(shí)也更加人道。文章的作者M(jìn)egh

生物培養(yǎng)基2011/10/27: 絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無(wú)機(jī)鹽和代謝添加劑。MEM/F12這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現(xiàn)應(yīng)用于快速生長(zhǎng)的細(xì)胞，同MEM含有相同的營(yíng)養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基，應(yīng)仔細(xì)了

培養(yǎng)基種類與特點(diǎn)2011/10/27: 培養(yǎng)基有許多種類，根據(jù)不同的植物和培養(yǎng)部位及不同的培養(yǎng)目的需選用不同的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的產(chǎn)生zui早是Sacks（1680）和Knop（1681），他們對(duì)綠色植物的成分進(jìn)行了分析研究，根據(jù)植物從土中主要是吸收無(wú)機(jī)鹽營(yíng)養(yǎng)，設(shè)計(jì)出了由無(wú)機(jī)鹽組成的Sacks和Knop溶液，至今仍在作為基本的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基得到廣泛應(yīng)用。以后根據(jù)不同目的進(jìn)行改良產(chǎn)生了多種培養(yǎng)基，White培養(yǎng)基在40年代用得較多，現(xiàn)在還常用。而到60和70年代則大多采用MS等高濃度培養(yǎng)基，可以保證培養(yǎng)材料對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需要，并能生長(zhǎng)快、分化快，且

天然細(xì)胞培養(yǎng)基——血清天然細(xì)胞培養(yǎng)基——血清 2011/10/27: 天然培養(yǎng)基是指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期，體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。目前廣泛使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是*。血清種類,目前用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因：來(lái)源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理

細(xì)胞培養(yǎng)基的幾點(diǎn)基本要求2011/10/27: 現(xiàn)代生物技術(shù)均通過(guò)細(xì)胞作為載體來(lái)進(jìn)行，無(wú)論是基因治療、干細(xì)胞、克隆技術(shù)都在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的。細(xì)胞的生長(zhǎng)需要一定的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，用于維持細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基，即指所有用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存細(xì)胞用的物質(zhì)，就其本意上講為人工模擬體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長(zhǎng)和繁殖的能力。它是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。細(xì)胞培養(yǎng)基其組成成分主要有：水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機(jī)離子及其他一些入核酸降解物、激素等。細(xì)胞培養(yǎng)基的基本要求---體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基

ELISA質(zhì)量控制--質(zhì)量控制血清2011/10/26: ELISA是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè)，既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA的影響因素較多，加強(qiáng)質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。質(zhì)控血清是已有靶值的血清，在每次的常規(guī)檢驗(yàn)中加入一份或數(shù)份，通過(guò)所得結(jié)果來(lái)了解本次檢驗(yàn)的情況。質(zhì)控血清檢驗(yàn)的結(jié)果如能控制其誤差在一定范圍內(nèi)，就說(shuō)明該檢驗(yàn)沒(méi)有發(fā)生不允許的誤

培養(yǎng)基的簡(jiǎn)介2011/10/26: 培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素、色素、激素和血清。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在2~6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，現(xiàn)在均改制成粉末。

近年來(lái)新建立的與補(bǔ)體有關(guān)的血清學(xué)試驗(yàn)2011/10/26: （一）單擴(kuò)散溶血試驗(yàn)（singleradialhemolysis）又稱固相溶血試驗(yàn)。根據(jù)抗原（如綿羊紅細(xì)胞）與相應(yīng)抗體相遇形成的免疫復(fù)合物，可通過(guò)傳統(tǒng)途徑激活補(bǔ)體，使綿羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血，其溶血程度與特異抗體滴度成正比的原理設(shè)計(jì)而成。現(xiàn)以鼻疽為例說(shuō)明其操作原則。取鼻疽抗原致敏的綿羊紅細(xì)胞加入融化的瓊脂糖凝膠中，混合均勻，澆注反應(yīng)盤(pán)，制成致敏的反應(yīng)盤(pán)，打孔，隨后將被檢血清和補(bǔ)體的等量混合物加入到上述致敏反應(yīng)盤(pán)孔中，于室溫下感作3～4小時(shí)，陽(yáng)性者，在孔的周?chē)l(fā)生明顯的溶血環(huán)，其直徑在8.1mm以上。（

配制培養(yǎng)基的原則2011/10/26: 1、選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):總體而言，所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水及能源，但由于微生物營(yíng)養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡(jiǎn)單的元機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物，因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基*可以（或應(yīng)該）由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。例如，培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌（Thiobacillusthiooxdans）的培養(yǎng)基組成見(jiàn)表3.9。在該培養(yǎng)基配

培養(yǎng)基的滅菌原理及方法2011/10/26: 所謂滅菌就是殺死一切微生物，包括微生物的營(yíng)養(yǎng)體和芽孢，這一概念不同于消毒。后者是指消滅一切致病微生物（病原體）。在發(fā)酵生產(chǎn)中為什么要滅菌呢？主要有以下幾點(diǎn)原因：如不滅菌，會(huì)使生物反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物，因雜菌的消耗而損失，造成生產(chǎn)能力的下降；雜菌也會(huì)產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，這就使產(chǎn)物的提取更加困難，造成得率降低，產(chǎn)品質(zhì)量下降；有些雜菌會(huì)分解產(chǎn)物，使生產(chǎn)失?。浑s菌大量繁殖后，會(huì)改變反應(yīng)液的pH值，使反應(yīng)異常；如果發(fā)生噬菌體污染，生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解，使生產(chǎn)失敗。一、培養(yǎng)基滅菌的原理和方法:滅菌的方法很多，在實(shí)驗(yàn)室可

抗血清鑒定2011/10/26: 抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數(shù)主要有幾項(xiàng)：1．親和性（affinity）是指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強(qiáng)度，常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正／逆向反應(yīng)速度常數(shù)的比值，單位為稀釋度單位（L／mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結(jié)合下降50％；而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)（Kd），其單位為濃度單位（mol／L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，需選用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清

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