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◇樣本制備
1. 懸浮細胞:取大約 1×107個細胞,低速離心收集,棄去培養(yǎng)液,加入1ml PBS懸浮細胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細胞,棄去PBS,放入-70℃冰箱保存。
2. 貼壁細胞:取大約1×107個貼壁細胞,胰酶消化后加入PBS懸浮細胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細胞,棄去PBS,放入-70℃冰箱保存。
3. 組織:采集新鮮組織(注意:生物體死亡后10分鐘內(nèi)取材料并保存好),組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,切為小塊,放入-70℃冰箱中保存。
樣本量:組織樣本,質(zhì)量大于100mg;細胞樣本,細胞數(shù)大于1×106;
◇蛋白質(zhì)抽提:
實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑),勻漿后抽提總蛋白(或核蛋白)。實驗對象為細胞樣品(細胞培養(yǎng)),每份樣品取1×106~1×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑)抽提總蛋白(或核蛋白)。標本也可交給我們處理,組織標本每個10元,核蛋白或膜蛋白每個30元。
◇收費標準:
每張膜上做一種目的蛋白和相應的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個樣品。每張膜的費用是:800元。一抗另計,抗體為進口單克隆抗體,我公司可代購,其它試劑免費。
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