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簡介:

PicoGreen dsDNA定量試劑是一種特異性結(jié)合雙鏈DNA (dsDNA)的飽和熒光染料,激發(fā)波長為480 nm,發(fā)射波長為520 nm,與大多數(shù)熒光計和熒光酶標儀兼容。PicoGreen僅與dsDNA結(jié)合后才發(fā)出熒光,不受核苷酸和單鏈核酸的影響,產(chǎn)生的熒光強度與dsDNA濃度成正比,且無序列依賴性,非常適合于dsDNA的定量檢測,可檢出25 pg/ml~1 μg/ml濃度范圍內(nèi)的dsDNA。PicoGreen dsDNA定量試劑有以下優(yōu)勢:1 靈敏度高:可檢測低至200 pg的dsDNA,節(jié)省寶貴樣品;2 特異性強:在等摩爾的RNA存在的條件下,對dsDNA具有特異性;3 耐受性好:耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖,可以直接定量PCR擴增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA。4 易于使用——只需在樣品中加入染料,等待5分鐘,然后讀數(shù)即可,且適用于96和384孔板;與大多數(shù)基于熒光的酶標儀和熒光計兼容。5 適用范圍廣:可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活分析、基因組DNA定量以及復雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。

一.染料工作液的配置 PicoGreen dsDNA定量試劑取出后回溫至室溫,該試劑是以100 µL 200×的濃縮液形式保存于無水DMSO中的。實驗當天,根據(jù)實驗用量用1×TE(10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 7.5)按1:200 的比例稀釋PicoGreen濃縮液。

注意事項

1 由于試劑容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。

2 PicoGreen試劑見光易降解,所以應(yīng)將配好的溶液用鋁箔包住或放置暗處避光保存。

3 溶液最好在配制好數(shù)小時內(nèi)使用,以保證優(yōu)良結(jié)果。



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