一、產(chǎn)品簡介
人單核細(xì)胞分選試劑盒 #SN3401
本試劑盒采用陰選的方式，通過無柱磁極分離人PBMC中的單核細(xì)胞（ CD11b+CD14+）。分離過程中抗體和磁珠不會接觸單核細(xì)胞，能夠最 大限度保持單核細(xì)胞最原始的狀態(tài)。
. 操作簡便
. 純度最高可達(dá)92%
. 約30分鐘完成分離
試劑盒通過生wu素偶聯(lián)的抗體標(biāo)記非單核細(xì)胞，再將細(xì)胞和鏈霉親和素納米磁珠孵育偶聯(lián)，然后通過磁極進(jìn)行無柱分離。目標(biāo)細(xì)胞只需倒入一 個新的管中即可分離，分離后的細(xì)胞可立即用于后續(xù)應(yīng)用，如流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)和功能實驗等。
試劑盒組分
產(chǎn)品名稱 | 存儲條件 | 緩沖液成分 | 功能 |
EasyIso TM Human FcR Blocker | 4°C保存，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 封閉FcR受體，降低抗體非特異性結(jié)合 |
EasyIso TM Human Monocyte Isolation Cocktail | 4°C保存，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 識別非單核細(xì)胞抗體混合液，標(biāo)記非目的細(xì)胞 |
EasyIso TM Streptavidin Nanobeads | 4°C保存，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠結(jié)合非單核細(xì)胞，通過磁極去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline 運輸條件： 4°C運輸
設(shè)備和試劑要求
. 緩沖液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
. 耗材：70 μm無菌尼龍濾網(wǎng)；無菌離心管
. 儀器：離心機(jī) ，磁力架
溫馨提示
. 請采用預(yù)冷的FACS buffer進(jìn)行細(xì)胞分選
. 推薦采用淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行密度梯度離心分離PBMC，不建議采用紅細(xì)胞裂解液
. 采用FACS Buffer而不是PBS進(jìn)行操作 ，能夠提高細(xì)胞得率
. 確保FACS Buffer滲透壓穩(wěn)定，免疫細(xì)胞較為敏感
. 確保每一步無菌操作，謹(jǐn)防污染
操作步驟
步驟 |
說明 |
劑量和時間 |
1 | 準(zhǔn)備PBMC單細(xì)胞懸液至指定濃度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso TM Human FcR Blocker至樣品中 | 100 μL/mL |
3 | 加入EasyIso TM Human Mococyte Isolation Cocktail至樣品中 | 100 μL/mL |
4 | 抗體和細(xì)胞孵育 | 4℃孵育15 min |
5 | 震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads | 混勻30 s |
6 | 加Streptavidin Nanobeads至樣品中 | 100 μL/mL |
7 | 輕柔混勻磁珠和細(xì)胞，孵育 | 4℃孵育15 min |
8 | 加入FACS Buffer到樣品中，輕輕混勻 | 總體積加入至2.5 mL （ 5 mL流式管） 總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管) |
9 | 樣品置于磁力架上 ，使磁珠吸附 | 單孔磁力架吸附（ 3 min） 聯(lián)排磁力架吸附（ 5 min） |
10 | 傾斜磁力架，將樣品倒入新的收集管中，收集樣品 | 細(xì)胞分離成功 |
如圖：采用Immuno-X系列產(chǎn)品（#SN3401）分離PBMC中的單核細(xì)胞。（A）分選前，單核細(xì)胞比例約占PBMC細(xì)胞的16.9% ，采用 （#SN3401）分離健康人PBMC中單核細(xì)胞，采用CD11b和CD14的流式抗體進(jìn)行染色 ，分選后的單核細(xì)胞純度高達(dá)90.7%。
人單核細(xì)胞分選試劑盒——英諾思生物代理——天津益元利康生物科技有限公司
成立于2018年，坐落于天津經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、 細(xì)胞生物學(xué)等多個方向，專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷售，經(jīng)營的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、Elabscience、GeneTex、Gentaur、immunostar、Invitrogen、invivogen、Kerafast等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務(wù)，努力成長為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。
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