2025-06-27
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保存溫度
-20℃保存
注意事項(xiàng)
注意微生物污染
有效期
一年
儀器準(zhǔn)備
1. 細(xì)胞計(jì)數(shù)器
2. 超低溫冰箱或液氮
3. 超凈工作臺(tái)
2. 超低溫冰箱或液氮
3. 超凈工作臺(tái)
耗材準(zhǔn)備
1. 一次性手套
2. 細(xì)胞凍存管
2. 細(xì)胞凍存管
使用注意事項(xiàng)
1. 注意在超凈工作臺(tái)內(nèi)無菌操作，盡量避免污染；
2. 初次使用融化后可在4℃保存1個(gè)月，但應(yīng)減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效；
3. 雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)應(yīng)定期復(fù)蘇，檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性；
2. 初次使用融化后可在4℃保存1個(gè)月，但應(yīng)減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效；
3. 雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)應(yīng)定期復(fù)蘇，檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性；
使用方法
1. 培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)晚期，顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無污染等，取狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作。如為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，用消化并用培養(yǎng)基終止消化，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；如為懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
2. 500~1000g離心5min，棄上清。
3. 加入適量的細(xì)胞凍存液（無血清），重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1~10x106/ml，置于凍存管中，密閉，不要擰得太緊，避免彎曲變形。
4. 一般遵循1℃/min的速率進(jìn)行冷凍。亦可采用4℃ 20min, -20℃ 30min,-70℃ 過夜,最后置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ)。
2. 500~1000g離心5min，棄上清。
3. 加入適量的細(xì)胞凍存液（無血清），重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1~10x106/ml，置于凍存管中，密閉，不要擰得太緊，避免彎曲變形。
4. 一般遵循1℃/min的速率進(jìn)行冷凍。亦可采用4℃ 20min, -20℃ 30min,-70℃ 過夜,最后置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ)。
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