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CD光譜 vs FTIR:哪種技術(shù)更適合分析蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)?檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì的結(jié)構(gòu)決定其功能,而二級結(jié)構(gòu)是dànbáizhì結(jié)構(gòu)層級中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。螺旋、折疊、無規(guī)卷曲等結(jié)構(gòu)變化,常常伴隨著dànbáizhì功能的轉(zhuǎn)變,甚至失活。因此,jīngzhǔn解析dànbáizhì二級結(jié)構(gòu),不僅對于基礎(chǔ)研究至關(guān)重要,也廣泛應用于藥物研發(fā)、生物制劑穩(wěn)定性評估以及結(jié)構(gòu)功能關(guān)系研究等領(lǐng)域。目前,圓二色譜(CD光譜)和傅里葉變換紅外光譜(FTIR)是zuì常用于dànbáizhì二級結(jié)構(gòu)分析的兩種光譜技術(shù)。它們各具優(yōu)勢,也各有局限。那么,究竟哪一種更適合你的研究需求?


一、CD光譜:快速、靈敏,但依賴于樣本純度

1、原理與優(yōu)勢

CD光譜利用圓偏振光與手性分子之間的相互作用來分析dànbáizhì的構(gòu)象。α-螺旋、β-折疊和無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)在190–250 nm波長范圍內(nèi)表現(xiàn)出特征性CD信號,因此通過擬合參考光譜庫,可快速估算各類二級結(jié)構(gòu)的比例。CD光譜尤其適用于以下場景:


  • 動態(tài)監(jiān)測dànbáizhì在不同pH、溫度或溶劑條件下的構(gòu)象變化

  • 對于單一構(gòu)象蛋白,獲取清晰的二級結(jié)構(gòu)分布

  • 可在較低樣品濃度下進行測定(通常為0.1–1 mg/mL)


2、局限性

盡管CD光譜靈敏度高,但也對樣品質(zhì)量要求嚴格,尤其對雜質(zhì)、緩沖液吸收和非dànbáizhì背景干擾較為敏感。此外,CD譜圖的解釋依賴于參考數(shù)據(jù)庫擬合算法,難以用于混合構(gòu)象或高復雜度樣品的jīngquè解讀。


二、FTIR:穩(wěn)定性強、適用性廣,但分辨率有限

1、原理與優(yōu)勢

FTIR通過檢測分子振動吸收,尤其是酰胺I帶(約1600–1700 cm?1)的吸收峰,來推斷dànbáizhì的二級結(jié)構(gòu)。這一區(qū)間對α-螺旋、β-折疊和無規(guī)卷曲的振動模式高度敏感。FTIR具有以下優(yōu)點:


  • 能夠分析固態(tài)、液態(tài)甚至凍干dànbáizhì樣品

  • 對緩沖液成分不敏感,適用于復雜基質(zhì)

  • 適合高濃度樣品,尤其適用于藥物制劑中的結(jié)構(gòu)評估

  • 與溫度控制配合,可用于熱穩(wěn)定性研究


2、局限性

盡管FTIR適用范圍廣,但其二級結(jié)構(gòu)定量精度相對較低,且在多組分重疊峰區(qū)域,結(jié)構(gòu)分辨率受限。此外,水對酰胺I區(qū)的吸收干擾需通過專門方法(如差譜技術(shù))加以校正。


三、CD光譜 vs FTIR:如何選擇?


CD光譜 vs FTIR:哪種技術(shù)更適合


四、實踐建議:以目標為導向,選用或聯(lián)合技術(shù)

在dànbáizhì二級結(jié)構(gòu)研究中,并不存在“zuì優(yōu)技術(shù)”,只有“zuì合適方法”。如果研究目標是快速篩查構(gòu)象變化,CD光譜無疑是優(yōu)選;若需要在復雜背景或高濃度樣品中評估結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性,則FTIR更具優(yōu)勢。值得強調(diào)的是,兩者并非對立,而是互補 —— 許多研究也采用CD與FTIR聯(lián)合策略,以獲得更全面、準確的結(jié)構(gòu)信息。


在dànbáizhì二級結(jié)構(gòu)分析實踐中,實驗設(shè)計、樣品處理、譜圖解析等每一步都對數(shù)據(jù)質(zhì)量至關(guān)重要。百泰派克生物科技依托*的質(zhì)譜平臺,提供dànbáizhì圓二色譜分析服務(wù)。我們的技術(shù)團隊能夠根據(jù)客戶研究目標定制zuì優(yōu)實驗方案,助力科研與開發(fā)高效推進。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),對蛋白序列進行分析。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務(wù),助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。



三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1.技術(shù)*,*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務(wù)可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

CD光譜 vs FTIR:哪種技術(shù)更適合




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù);

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務(wù)需求;

5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!



CD光譜 vs FTIR:哪種技術(shù)更適合分析蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)?檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹


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