人急性單核細胞性白血病細胞 THP-1

細胞描述：   
該細胞從一名1歲的患有急性單核細胞性白血病的男孩的外周血中分離建立。該細胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細胞，細胞膜和包漿內均沒有免疫球蛋白，表達C3R和FcR；可受佛波酯TPA誘導向單核系方向分化；可做為轉染宿主。

人急性單核細胞性白血病細胞 THP-1增殖能力取決于細胞取材、培養(yǎng)技術、培養(yǎng)條件等綜合因素。請按照正確的培養(yǎng)方法來解凍、傳代，以此保證細胞具備良好的增殖能力，方便您的后繼研究順利進行。    

質量控制：   
本細胞經過了檢測，不含有細菌、真菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原體。 

 培養(yǎng)條件：
37℃，5% CO2，pH值7.2~7.4，無菌恒溫培養(yǎng)。

 生長特性：

懸浮生長　
用途：   
本產品只提供給進一步的科研使用，不可應用于治療等其他方面。

 細胞相關操作：

細胞復蘇

1. 37°C水浴預熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞，用血小球計數(shù)板進行細胞計數(shù)，按細胞密度4-5×105/ml接種到25ml細胞培養(yǎng)瓶中；
5.置于37°C，5% CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

 細胞傳代

1.取細胞計數(shù)(詳見細胞凍存)，當細胞密度達到1.0-3.0×106/ml時（不要超過3.0×106cells/ml），可傳代；

2.37°C水浴預熱培養(yǎng)基；

3.在超凈臺中，加適量預熱好的培養(yǎng)基到無菌搖瓶中，以細胞終密度為4-5×105/ml接種細胞（也可1000rpm，5min離心后棄上清，用預熱好的培養(yǎng)基重懸并調整細胞密度為5.0×105/ml），25ml細胞培養(yǎng)瓶中；
4.置于37°C，5% CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

 細胞凍存

1.細胞計數(shù)：

1)洗凈晾干血小板計數(shù)板和蓋玻片，將蓋玻片*覆蓋計數(shù)區(qū)；

2)充分混勻細胞，取少量(0.1-0.5ml)細胞懸液與等體積的染色液臺盼藍混合，移液器吹吸混合均勻，用移液器取20ul混合液從蓋玻片兩端(與中間凹槽平行的兩端)分別打入細胞，以細胞懸液剛好浸濕蓋玻片為佳；

3)顯微鏡下，數(shù)四個計數(shù)區(qū)的總細胞數(shù)，無活性細胞染成藍色，活細胞不被染色；

4)細胞密度=細胞總數(shù)/4×10000×2；

這里10000是不變的，因為計數(shù)的細胞是在體積為1mm×1mm×0.1mm即10-4cm3計數(shù)池內，1cm3=1ml，將四個計數(shù)區(qū)的細胞數(shù)除以4取平均數(shù)，乘2是補償加等體積臺盼藍形成的稀釋。

5)細胞活性=活細胞數(shù)/細胞總數(shù)×*。

注:細胞密度高時，可調整細胞懸液和臺盼藍的比例，計數(shù)時乘以相應的稀釋倍數(shù)即可。

2.當細胞密度達到傳代密度且細胞活性在90%以上時，可以凍存細胞。

3.37°C水浴預熱培養(yǎng)基。

4.在超凈臺中將要凍存的細胞移入離心管，1000rpm離心5min。

5.棄上清，用90%培養(yǎng)液 10%DMSO的混合液重懸細胞，并調整細胞密度為4-6×106/ml。

6.將細胞懸液分裝到凍存管中(1-1.5ml/管)。

7.將裝有細胞的凍存管放入程序降溫凍存盒，-20°C放1-2h后，-80°C過YE，然后快速轉移到液氮中。

 收到復蘇好的細胞的處理方法：
1. 先從外包裝盒拿出離心管，在離心管表面噴一層酒精，并小心去掉封口膜；

2. 將離心管中的細胞在超凈工作臺內取出一部分進行細胞計數(shù)（詳見細胞凍存）。

3. 如細胞密度小于3×106/ml，可直接將離心管中的細胞轉移到T25瓶中，置于37°C，5% CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4. 如細胞密度超過3×106/ml，操作步驟參照（細胞傳代）。