液相色譜法檢測豆制品中大豆異黃酮方案

    大豆異黃酮是大豆生長中形成的一種次級代謝產(chǎn)物。由于是從植物中提取，與雌激素有相似結(jié)構(gòu)，當(dāng)大豆異黃酮的雌激素作用影響到激素分泌、代謝生物學(xué)活性、蛋白質(zhì)合成、生長因子活性，是天然的癌癥化學(xué)預(yù)防劑。平時多食用富含大豆異黃酮的食物有助于抑制前列腺癌細(xì)胞的生長，膳食中的大豆異黃酮主要來自大豆和大豆制品。采用高效液相色譜儀分析測定豆制品中大豆異黃酮含量，建立了大豆異黃酮的高效液相色譜分析方法。
 
樣品制備：
    稱取10g大豆樣品，用10倍量80%乙醇加熱回流1h后，使用超聲提取30min，將上清液用定性濾紙過濾，濾液移至100ml容量瓶中，用0.32μm濾膜的溶劑過濾器進(jìn)行過濾；準(zhǔn)確吸取液體樣品10ml與離心管中，采用水浴氮吹儀在50℃溫度下濃縮、結(jié)晶；用5ml乙腈-0.2%乙酸溶液溶解，0.32μm濾膜過濾后移入進(jìn)樣瓶中供液相色譜儀分析。
 
檢測儀器：
    超高液相色譜儀（紫外檢測器，四元泵，手動進(jìn)樣器）、氮吹儀                  
 
試劑：甲醇、乙腈（色譜純）；水：重蒸水；樣品制備用酒精為分析純；異黃酮標(biāo)準(zhǔn)品大豆甙、黃豆甙、染料木甙、大豆甙元、黃豆甙元、染料木素。
 
色譜條件：
    色譜柱：C18柱（150mm*6mm，5μm），流動相為乙腈溶液和乙酸溶液，流速為0.15ml/min，柱溫：200℃，進(jìn)樣量5μL。
 
    使用溶劑過濾器處理制備樣品，保證了樣品純度，有效防止樣品中雜質(zhì)對檢測結(jié)果的影響；水浴氮吹儀對樣品溶劑進(jìn)行隔絕空氣，高溫加熱結(jié)晶處理，更適于標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的配置。液相色譜儀檢測豆制品中異黃酮的方法重現(xiàn)性好，精密度高，回收率高。
 

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