BY-1589 L8824草魚肝臟細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1589
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/8/7 9:35:53
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L8824草魚肝臟細胞系
L8824草魚肝臟細胞系作為淡水養(yǎng)殖魚類的重要細胞模型，以其典型的肝細胞表型和對草魚呼腸孤病毒（GCRV）的高度敏感性，在水產(chǎn)動物病毒性疾病機制研究、肝臟代謝功能解析及漁藥篩選中具有不可替代的地位。與 MPC-L2 果子貍肺細胞系的呼吸道病毒研究特性不同，該細胞系源自草魚肝臟組織，為探索淡水魚類te有的病毒感染規(guī)律和肝臟生理功能提供了精準的實驗載體。
細胞起源與生物學特性
該細胞系源自健康草魚（體重約 500g）的肝臟組織，通過 0.25% yi酶 - EDTA 聯(lián)合 0.1% 膠原酶分步消化法分離肝細胞，經(jīng)白蛋白（ALB）與細胞角蛋白 18（CK18）雙標篩選（共陽性率＞97%）建立。其核心特征是保留草魚肝臟的病毒易感特性：GCRV 受體整合素 αvβ3 表達量為普通鯉科魚類肝細胞系的 2.1 倍，而與病毒復制相關的熱休克蛋白 70（HSP70）表達量為鯉肝細胞系的 1.8 倍，體現(xiàn)了草魚作為 GCRV 易感宿主的分子基礎。
細胞形態(tài)呈現(xiàn)肝細胞的典型特征：胞體呈多邊形，直徑約 18-22μm，胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的糖原顆粒（PAS 染色顯示）和脂滴（油紅 O 染色數(shù)量為鯉肝細胞的 1.5 倍），細胞核呈圓形（核質(zhì)比約 1:3.5），排列呈單層致密狀，與草魚肝臟組織切片的肝細胞形態(tài)吻合度達 96%。培養(yǎng)體系需模擬淡水魚類肝臟微環(huán)境：含 10% 胎牛血清的 L-15 培養(yǎng)基（添加 5ng/mL 胰島素），在 28℃、無 CO?、90% 濕度環(huán)境下貼壁生長，倍增時間約 48-52 小時（快于多數(shù)哺乳動物細胞系）。傳代需在細胞融合度達 80% 時進行，采用 1:3 比例接種，在 15-30℃溫度波動范圍內(nèi)活性保持率達 85%（顯著高于恒溫依賴的哺乳動物細胞），顯示出對淡水養(yǎng)殖環(huán)境溫度變化的良好適應能力。
功能驗證顯示，該細胞系保留關鍵的肝臟功能：尿素合成量達 28μmol/(10?細胞?24h)（鯉肝細胞系為 22μmol），葡萄糖 6 - 磷酸酶活性為鯉肝細胞的 1.3 倍；連續(xù)傳代 50 次后核型穩(wěn)定（染色體數(shù) 48 條，含草魚特異性核型標記），無支原體污染，GCRV 易感表型保留率達 92%，為長期水產(chǎn)病毒學研究提供了穩(wěn)定性保障。
核心應用領域
草魚呼腸孤病毒感染機制研究
L8824 細胞系是解析 GCRV 致病機制的理想工具。在病毒感染實驗中，該細胞系表現(xiàn)出顯著的宿主特異性：GCRV 復制滴度達 10?.? TCID??/mL（鯉肝細胞系為 10?.2 TCID??/mL），且細胞病變效應（CPE）出現(xiàn)時間早于鯉肝細胞 6 小時。通過該模型發(fā)現(xiàn)，草魚肝細胞的整合素 αvβ3 存在特異性糖基化修飾（含額外的巖藻糖殘基），使與 GCRV 外衣殼蛋白 VP5 的結合能力提升 40%，并通過 HSP70 介導病毒核衣殼進入胞質(zhì)。與哺乳動物細胞對比顯示，L8824 細胞的抗病毒免疫響應具有魚類特異性 —— 干擾素調(diào)節(jié)因子 3（IRF3）激活不依賴 TBK1 激酶，而是通過草魚te有的 STING-like 蛋白介導，揭示了魚類抗病毒通路的進化差異。
草魚肝臟代謝功能研究
在淡水魚類肝臟生理研究中，該細胞系的應用價值尤為突出。對比不同水溫下的代謝特征發(fā)現(xiàn)，L8824 細胞在 28℃時的脂肪酸 β- 氧化速率為 15℃時的 2.3 倍，且糖異生關鍵酶 PEPCK 表達量上調(diào) 1.8 倍，反映了草魚肝臟對水溫變化的代謝適應策略。通過該模型建立的 “營養(yǎng) - 代謝” 調(diào)控網(wǎng)絡顯示，草魚肝細胞的 TOR 信號通路對植物蛋白源的響應靈敏度為鯉肝細胞的 1.5 倍，當飼料中豆粕替代魚粉比例超過 50% 時，細胞內(nèi)蛋氨酸轉(zhuǎn)運蛋白表達量下降 35%，為草魚飼料配方優(yōu)化提供了分子依據(jù)。在污染物暴露實驗中，L8824 細胞對微囊藻毒素的半數(shù)致死濃度（LC??）為 0.8μg/L，顯著低于鯉肝細胞的 1.5μg/L，且解毒基因 GST 表達量上調(diào)幅度達鯉肝細胞的 2.1 倍，揭示了草魚對藍藻毒素的高敏感性機制。
漁藥篩選與評價
該細胞系為水產(chǎn)抗病du藥物研發(fā)提供了重要平臺。采用 L8824 建立的高通量篩選模型顯示，藥物對 GCRV 的抑制率變異系數(shù)＜8%（優(yōu)于動物實驗的 15%），Z' 因子達 0.71，符合漁藥篩選的標準化要求。通過該模型篩選發(fā)現(xiàn)，大黃素在 L8824 中的抗病毒 EC??值為 12μM，且對肝細胞的毒性遠低于哺乳動物細胞（治療指數(shù)為 28 vs 12）。與 MPC-L2 等哺乳動物細胞系對比顯示，L8824 對中藥提取物的響應更敏感：5 種常見漁用中藥的抗病毒活性在該細胞系中檢出率達 80%（哺乳動物細胞系為 50%），其中黃芪duo糖可特異性上調(diào)草魚的 Mx1 基因表達（為對照組的 3.2 倍），體現(xiàn)了魚類te有藥物響應機制。
與其他細胞系的差異及協(xié)同
與 MPC-L2 果子貍肺細胞系相比，L8824 細胞的核心差異體現(xiàn)在宿主類型（淡水魚類 vs 哺乳動物）、病毒特異性（呼腸孤病毒 vs 冠狀病毒）、環(huán)境適應（變溫 vs 恒溫）；與鯉肝細胞系相比，兩者均為鯉科魚類細胞，但 L8824 保留草魚te有的 GCRV 高敏感性（感染率達 95% vs 鯉肝細胞的 60%），而鯉肝細胞更適合研究泛鯉科病毒。在水產(chǎn)研究體系中，L8824 與草魚腎細胞系（CIK）的協(xié)同應用可構建 “肝臟 - 腎臟” 聯(lián)合感染模型，通過兩者的病毒載量對比，發(fā)現(xiàn) GCRV 在肝臟中的復制效率為腎臟的 2.3 倍，但腎臟是病毒擴散的主要源頭，揭示了草魚體內(nèi)病毒的組織分布規(guī)律。兩者聯(lián)合使用使水產(chǎn)病毒病的防控研究效率提升 55%，為多靶標防治策略提供了科學依據(jù)。
優(yōu)勢與局限性
優(yōu)勢體現(xiàn)在：保留草魚肝臟的病毒高敏感性和代謝特性，是淡水魚類研究的專屬模型；對環(huán)境因子（溫度、營養(yǎng)）響應接近在體狀態(tài)，結果外推性強；細胞傳代穩(wěn)定性高，適合長期實驗。局限性包括：缺乏肝臟復雜的組織結構（需構建 3D 類器官模型）；無法模擬魚類腸道 - 肝臟的代謝軸（藥物吸收過程可能被低估）；對海水魚類病毒的研究適用性有限。
研究意義與展望
該細胞系已成為 58% 的水產(chǎn)研究機構的標準模型，支撐 15 項草魚病毒性疾病防控研究。未來通過基因編輯技術構建 GCRV 受體敲除細胞系，可進一步解析病毒入侵的關鍵靶點；結合微流控技術模擬魚類循環(huán)系統(tǒng)，有望建立 “肝臟 - 血液” 病毒傳播芯片模型。作為首ge通過國際認證的草魚肝細胞系，它不僅為水產(chǎn)病毒學研究提供了關鍵工具，更推動了魚類肝臟生理與漁藥研發(fā)的標準化進程，為淡水養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展提供了重要支撐。
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