如何選購(gòu)預(yù)染超低分子蛋白質(zhì)Marker（3.3kD-31.0kD）
貨 號(hào) ： PR1900
規(guī) 格 ： 20T(200µ1)
保存 ： -20℃保存，有效期為一年。避免反復(fù)凍融，建議分裝凍存。

產(chǎn)品說(shuō)明：
    本產(chǎn)品包含預(yù)染的3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成，分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD?？梢杂糜谥苯佑^察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。經(jīng)Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠電泳時(shí)以及轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5條藍(lán)色的蛋白條帶。 本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉， 每種預(yù)染蛋白含量約為40µg，配有一支1×上樣緩沖液。

使用說(shuō)明: 
     1. 開封后，溶于200 µ1 1×上樣緩沖液，可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝，每管10 µl，-20℃貯存，每次取一管使用，避免反復(fù)凍融。
     2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。

電泳示意圖：

凝膠的配置方法: 

凝膠制備及染色注意事項(xiàng): 
    1. 先配制分離膠，聚合后再配制夾層膠，后配制濃縮膠，3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時(shí)，30v跑1-2小時(shí)后，待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí)，把電壓調(diào)100v，電泳結(jié)束，整個(gè)電泳過(guò)程大約需要6-8小時(shí)。
    2. 電泳之后可將膠置于固定液中固定 20 分鐘，再進(jìn)行染色，能得到較好的蛋白條帶；如時(shí)間不允許，也可不進(jìn)行固定直接染色。如果使用配方 7 進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性，請(qǐng)選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號(hào):P1300)，該產(chǎn)品具有染色快，無(wú)毒，靈敏性高等特點(diǎn)，是常規(guī)染色液的替代品。
    3. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少，因此如該多肽含有過(guò)多的極性氨基酸(堿性或酸性)，則會(huì)影響其在SDS-PAGE 圖上的條帶遷移率，即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
    4. 由于 SDS-PAGE 的圖譜上，蛋白質(zhì)對(duì)數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為 15,000-200,000，因此對(duì)于分子量小于 10000 的蛋白質(zhì)或多肽的分子量，只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì)，推斷其是否落入預(yù)測(cè)的分子量范圍。
    5. 由于超低分子量多肽（3000及3000以下），極易從凝膠上浸出，因此染色及脫色時(shí)間不宜太長(zhǎng)，脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過(guò)久，否則條帶會(huì)消失。
北京索萊寶自產(chǎn) 預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker（3.3kD-31.0kD) 

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附: 小分子蛋白質(zhì)SDS-PAGE 電泳試劑配制
1. 49.5% T 3 % C (配制夾層股和濃縮膠)
丙烯酰胺 48g
甲叉雙丙烯酰胺 1.5g
用ddH 2 0溶解后定容100ml
2. 49. 5 % T 6 % C (配制分離膠)
丙烯酰胺 46. 5g
甲叉雙丙烯酰胺 3. 0g
用ddH 2 0溶解后定容100ml
3. 凝膠緩沖液
Tris堿 182g
ddH 2 0 300ml
用HCl調(diào)節(jié)pH值8.45
用ddH 2 0定容 500ml
再加入SDS 1.5g
4 . 10×陽(yáng)極緩沖液(下槽緩沖液〕
Tris堿 121. 1 g
ddH 2 0 400ml
用HCl調(diào)pH值8.9
用ddH 2 0定容 500ml
5. 陰極緩沖液(上槽緩沖液)
Tris堿 12 .11g
Tricine 17.92g
SDS 1g
用ddH 2 0定容1000ml
此溶液不用調(diào)節(jié)pH值
6. 固定液
0.5% 戊二醛
30% 乙醇
用ddH 2 0定容100ml
7. 染色液
50% 甲醇
10% 乙酸
0.2% 考馬斯亮藍(lán)G-250
用ddH 2 0定容500ml

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