美國ABI 7500 型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)

7500型快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500將PCR熱循環(huán)，熒光檢測和各種應(yīng)用分析軟件結(jié)合在一起，可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應(yīng)管中PCR擴(kuò)增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可以馬上得到定量結(jié)果，無需凝膠電泳分析，無需純化PCR產(chǎn)物，無需進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)操作。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting或RNase-protection assays相比，7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)具有時(shí)間省，靈敏度高，準(zhǔn)確性好和線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。

儀器特點(diǎn)：

●五色熒光同時(shí)檢測支持各種應(yīng)用需要，支持染料包括：FAM™/SYBR® Green I，VIC®/JOE™，NED™/TAMRA™/Cy3®，ROX™/Texas-Red®和Cy5®；

●更好的激發(fā)光源設(shè)計(jì)使長波長紅色熒光的檢測靈敏度大大提高；

●支持標(biāo)準(zhǔn)的96孔板快速反應(yīng)模式，大大降低實(shí)時(shí)定量PCR所需要的時(shí)間。

軟件特點(diǎn)：

●反應(yīng)板設(shè)置指南軟件使實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)非常簡單，包括復(fù)雜的多色熒光實(shí)驗(yàn)；

●可選擇快速、標(biāo)準(zhǔn)或者9600反應(yīng)模式；

●實(shí)時(shí)監(jiān)測擴(kuò)增曲線；

●實(shí)驗(yàn)過程中可以增加PCR循環(huán)數(shù)；

●自動設(shè)置熒光基線，自動計(jì)算熒光閾值使數(shù)據(jù)分析大大簡化；

●可在同一反應(yīng)板采用多種標(biāo)準(zhǔn)曲線對靶基因進(jìn)行定量，可以簡化工作流程以及下游產(chǎn)物分析；

●基因表達(dá)相對定量軟件提供強(qiáng)大的結(jié)果分析顯示，可以自動將多達(dá)10塊96孔板基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)同時(shí)分析，并自動去除無關(guān)項(xiàng)數(shù)據(jù)；

●自動SNP分析軟件可以簡單直觀的圖表輸出分型結(jié)果并自動進(jìn)行分型質(zhì)量評分；

●解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單，觀察方便，可以在儀器運(yùn)行時(shí)觀察解離曲線數(shù)據(jù)；

●觀察實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線時(shí)可以非常方便的標(biāo)定所對應(yīng)的樣品孔位置；

●光源使用時(shí)間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序。

美國ABI 7500 型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)主要應(yīng)用：

基于相對定量分析的基因表達(dá)分析

以標(biāo)準(zhǔn)曲線為基礎(chǔ)的病原體定量分析

定性的PCR擴(kuò)增后核酸序列的SNP基因型分析

以陽性內(nèi)對照為基礎(chǔ)的陽性/陰性結(jié)果判定

儀器性能：

7500型快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)經(jīng)過驗(yàn)證可以達(dá)到如下性能指標(biāo)：

9個(gè)數(shù)量級的線性范圍；

可以檢測20 μL反應(yīng)體積單一報(bào)告熒光TaqMan®實(shí)驗(yàn)中僅10個(gè)起始拷貝數(shù)的模板，其可置信度高達(dá)99.7%。

技術(shù)參數(shù)：

熱循環(huán)系統(tǒng)：珀耳帖效應(yīng)系統(tǒng)

加熱塊規(guī)格：96孔加熱塊

可選耗材：96孔反應(yīng)板與光學(xué)蓋膜

          96孔反應(yīng)板與光學(xué)平蓋

          0.1mL 8連管與光學(xué)平蓋

支持容量：10-30 μL

樣本升降溫速率：快速模式：±3.5℃/秒

標(biāo)準(zhǔn)模式：±1.6℃/秒

9600模式：－1.6-＋0.8℃/秒

加熱塊zui高升降溫速率：5.5℃/秒

溫度范圍：4℃-100℃

溫度精度：設(shè)置值/顯示溫度的±0.25℃(35℃至95℃)(時(shí)鐘啟動后3分鐘開始測量)

溫度均一性：±0.5℃(35℃至95℃)(時(shí)鐘啟動后30秒開始測量)

光學(xué)系統(tǒng)：五色激發(fā)光濾光片，五色發(fā)射光濾光片和CCD成像系統(tǒng)

安裝時(shí)已校準(zhǔn)染料：SYBR® Green I, FAM™, VIC™, JOE™, NED™, TAMRA™, ROX™,Texas Red®, Cy3™, Cy5™

被動參照染料：ROX™

數(shù)據(jù)采集：對所有反應(yīng)孔收集的所有五色濾片的數(shù)據(jù)（無論何種反應(yīng)板設(shè)置），試驗(yàn)結(jié)束后反應(yīng)板設(shè)置可修改。

定量PCR運(yùn)行時(shí)間：快速模式不超過2小時(shí)

快速模式不超過40分鐘

軟件：應(yīng)用軟件（基于標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量、相對標(biāo)準(zhǔn)曲線、基于比較Ct值的相對定量、融解曲線分析、

存在/不存在、基于或非基于實(shí)時(shí)擴(kuò)增的基因分型）

引物分析軟件（用于客戶自行設(shè)計(jì)引物和探針）

大小重量：

尺寸（寬×深×高）：34×45×49厘米

重量：34千克