產(chǎn)品名稱：肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10015

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
TRAF1/Biotin 生物素化壞死因子受體相關(guān)因子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(human) 癌易感基因1抗原(人)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體  TRAF3/CD40bp 0.1ml

Sidekick 1 英文名稱： 細胞粘附分子伴侶蛋白1抗體 0.2ml

ELAVL2 + ELAVL4 英文名稱： ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS-2(Ser731) 磷酸化胰島素受體底物2抗體 規(guī)格 0.1ml

BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(human) 癌易感基因1抗原(人)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CX3CR1/FITC 熒光素標記抗CX3C趨化因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DCTN1/Dynactin 1 動力蛋白激活蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Guinea IgG/APC 熒光素APC標記豚鼠IgG 0.1ml

Stathmin 英文名稱： 白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體 0.1ml

(2NP-AHD)呋喃妥因代謝物單克隆抗體 小鼠單抗 0.05

 CX3CR1/FITC 熒光素標記抗CX3C趨化因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

Phospho-FADD (Ser191) 英文名稱： 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml

C型鈉尿肽抗體  CNP/CNPase 0.1ml

 phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、兔、馬、犬、豬、磷酸化原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PIK3C3/PI3 kinase type 3 磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  human IgA/Biotin 生物素化羊抗人IgAMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基Toxoplasma gondii RFLP基因分析試劑盒20次人甲酰甲硫（fMet）ELISA試劑盒,

Trypanosoma congolense RFLP基因分析試劑盒20次人尿游離皮質(zhì)醇（UFC）ELISA試劑盒,

Hepatitis B virus RFLP基因分析試劑盒20次人血清素/血清（ST）ELISA試劑盒,

Human cytomegalovirus （HCMV）RFLP基因分析試劑盒20次人胸腺肽（Thymosin）ELISA試劑盒,

human herpesviruses RFLP基因分析試劑盒20次人高敏甲狀腺素（u-T4）ELISA試劑盒,

C. albicans RFLP基因分析試劑盒20次人TU3A蛋白（TU3A）ELISA試劑盒,

C. glabrata RFLP基因分析試劑盒20次人角化因子（KAF）/雙調(diào)蛋白（AR）ELISA試劑盒,

C. tropicalis RFLP基因分析試劑盒20次小鼠可溶性CD30（sCD30）ELISA試劑盒,

C. krusei RFLP基因分析試劑盒20次小鼠內(nèi)皮素1（ET-1）ELISA試劑盒,

C. guilliermondii RFLP基因分析試劑盒20次大鼠葉酸（FA）ELISA試劑盒,

C. parapsilosis RFLP基因分析試劑盒20次大鼠醛固酮（ALD）ELISA試劑盒,

Cr. Neoformans RFLP基因分析試劑盒20次兔子間粘附分子2（ICAM-2/CD102）ELISA試劑盒,

A. fumigatus RFLP基因分析試劑盒20次布氏瓊脂   用于彎曲桿菌分離（SN標準）- 布氏瓊脂

F. solani RFLP基因分析試劑盒20次L-異亮甲酯鹽酸鹽

Helicobacter pylori RFLP基因分析試劑盒20次Apiosylskimmin Apiosylskimmin