人虹狀體上皮細(xì)胞細(xì)胞免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。為使客戶能盡快開(kāi)展實(shí)驗(yàn)，我們提供的細(xì)胞均處于對(duì)數(shù)生*，且每次發(fā)貨匯合率達(dá)到70%的細(xì)胞，收到細(xì)胞后即可開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。公司建立了嚴(yán)格的細(xì)胞鑒定流程，所提供的原代細(xì)胞均需經(jīng)過(guò)細(xì)胞類(lèi)型特異性標(biāo)記物、細(xì)胞形態(tài)學(xué)等檢測(cè)，保證細(xì)胞純度在90%以上；同時(shí)也需經(jīng)過(guò)微生物檢測(cè)，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類(lèi)型的細(xì)菌。
培養(yǎng)條件：DMEM-H /F12 10%FBS
傳代方法：1:3-1:5傳代，每周換液2-3次
細(xì)胞規(guī)格：5×105cells
細(xì)胞保存：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。
細(xì)胞用途：僅供科研使用，不得應(yīng)用于臨床。
人虹狀體上皮細(xì)胞細(xì)胞凍存：
凍存液現(xiàn)配：按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基)。取生長(zhǎng)狀態(tài)量好的細(xì)胞進(jìn)行凍存處理，
對(duì)于貼壁細(xì)胞：
1 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次；
2胰酶消化；
3加培養(yǎng)基中止消化，有的細(xì)胞是加血清中止；
4離心收集細(xì)胞，不同細(xì)胞離心率不一樣（以上僅為貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞收集就用第四部）；
5吸出離心管上清液，加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞，移到凍存管，放4度半小時(shí)，-20 度兩小時(shí)，-70度隔夜，再放液氮*保存
細(xì)胞復(fù)蘇：
從冰箱里取出細(xì)胞冷凍管，立即放入37℃震動(dòng)水浴槽中快速解凍。待凍存管中細(xì)胞混合液*融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從冷凍管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。
離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考：1000~2000rpm，4℃，3-5分），移去上清液。
清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液。
加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻10細(xì)胞混合液。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。鏡檢后，可根據(jù)需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
注意：細(xì)胞復(fù)蘇和凍存的關(guān)鍵是使細(xì)胞快速通過(guò)0-20度這個(gè)階段，以減少冰晶的形成。但又不能過(guò)快，所以建議使用程序降溫盒。沒(méi)條件可以使用棉花包裹，4度40-60min，然后直接-80，效果也是非常好。

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