小鼠口腔粘膜成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞分離自口腔粘膜組織；口腔（oral cavity）是消化道的起始部分。前借口裂與外界相通，后經(jīng)咽峽與咽相續(xù)?？谇粌?nèi)有牙、舌等器官。口腔的前壁為唇、側(cè)壁為頰、頂為腭、口腔底為黏膜和肌等結(jié)構(gòu)?？谇唤枭?、下牙弓分為前外側(cè)部的口腔前庭（oral vestibule）和后內(nèi)側(cè)部的固有口腔（oral cavity proper）；當(dāng)上、下頜牙咬合時(shí)，口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶(hù)收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶(hù)收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

SW1990細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人胸膜瘤細(xì)胞,SMC-1細(xì)胞 雜交瘤(B類(lèi));Z51B3C10H12A12G2F7E7  小腸粘膜上皮細(xì)胞Many   SHG-44細(xì)胞，膠質(zhì)瘤細(xì)胞 NCTC克隆929細(xì)胞,L129細(xì)胞 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系 人原代子宮平滑肌細(xì)胞 大鼠原代腸巨噬細(xì)胞

BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原

BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein

CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白

ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit

Porcine ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒

侵襲性大腸桿菌(EIEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforMIGF/CXCL9(Humanmonocyteierferongammainducingfactor)ELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子

體液賴(lài)(lysine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次

ELISAKitMHC/BoLA牛主要組織相容性復(fù)合體

心肌肌鈣蛋白1   英文名稱(chēng)：   cardiac oponin 1   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CTn1

Ⅰ型膠原C端肽   英文名稱(chēng)：   C-telopeptide of type Ⅰ collagen   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CTX-Ⅰ

   英文名稱(chēng)：   Cytochrome C   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   Cytochrome C

CXC趨化因子受體1   英文名稱(chēng)：   CXC chemokine receptor 1   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CXCR1

小鼠口腔粘膜成纖維原代細(xì)胞小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cytokine receptor (sCKR) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)試劑盒

HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit 人鳥(niǎo)脫羧酶(ODC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Mouse25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit小鼠25羥基3

飲料比色法定量試劑盒20次

MouseL-phenylalanine,LPAELISAKit小鼠苯(LPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL1R2重組小鼠 IL1R2 / CD121b 蛋白 Protein

二氫二醇脫氫酶2(DDH2)重組蛋白 Recombinant Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2)

KIR2DL4重組人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

ACVR1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)