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產(chǎn)品名稱：熱賣細胞，Nthy-ori 3-1細胞，人正常甲狀腺細胞

細胞規(guī)格：株

質(zhì)控標準：無支原體、無污染、符合標準

運輸方式：新鮮運輸和凍存管運輸

24小時：18916413500（張昕）

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，質(zhì)粒的相關(guān)知識：
一.如何閱讀質(zhì)粒圖譜
*步：首先看 Ori 的位置，了解質(zhì)粒的類型（原核/真核/穿梭質(zhì)粒）。
第二步：再看篩選標記，如抗性，決定使用什么篩選標記。
--Ampr   水解β-內(nèi)酰胺環(huán)，解除氨芐的毒性；
--tetr   可以阻止四環(huán)素進入細胞；
--camr   生成氯霉素羥乙?；苌?，使之失去毒性；
--neor(kanr)氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 使G418（長那霉素衍生物）失活；
--hygr   使潮霉素β失活。
第三步：看多克隆位點（MCS）。它具有多個限制酶的單一切點，便于外源基因的插入。如果在這些位點外有外源基因的插入，會導(dǎo)致某種標志基因的失活，從而便于篩選。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。
第四步：再看外源DNA插入片段大小。質(zhì)粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA段。一般來說，外源DNA段越長，越難插入，越不穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化效率越低。
第五步：是否含有表達系統(tǒng)元件，即啟動子－核糖體結(jié)合位點－克隆位點－轉(zhuǎn)錄終止信號，這是用來區(qū)別克隆載體與表達載體。在克隆載體中加入一些與表達調(diào)控有關(guān)的元件即成為表達載體。選用哪種載體，要以實驗?zāi)康臑橐罁?jù)。
二.如何選擇載體
把目的基因通過基因工程手段送到生物細胞（受體細胞），需要運載工具（交通工具）攜帶外源基因進入受體細胞，這種運載工具就叫做載體（vector）。基因工程所用的vector實際上是用來攜帶目的基因片段進入受體細胞的DNA。
選擇載體主要依據(jù)構(gòu)建的目的，同時要考慮載體中應(yīng)有合適的限制酶切位點。如果構(gòu)建的目的是要表達一個特定的基因，則要選擇合適的表達載體。
,載體選擇主要考慮下述3點：
1. 構(gòu)建DNA重組體的目的：克隆載體/表達載體。
2. 載體的類型：
克隆載體的克隆能力：根據(jù)克隆片段大?。ù筮x大，小選?。Ｈ?lt;10kb選質(zhì)粒。
表達載體：根據(jù)受體細胞類型：原核/真核/穿梭，E.coli/哺乳類細胞表達載體。
原核表達載體要選擇合適的啟動子及相應(yīng)的受體菌；表達真核蛋白時需注意閱讀框錯位問題；表達天然蛋白和融合蛋白所需載體亦有區(qū)別。
3. 選用質(zhì)粒做載體的4點要求：
（1）選分子量小的質(zhì)粒，即小載體（1-1.5kb）：不易損壞，在細菌里面拷貝數(shù)也多（也有大載體）；
（2）一般使用松弛型質(zhì)粒在細菌里擴增不受約束，一般10個以上的拷貝，而嚴謹型質(zhì)粒<10個。
（3）必需具備一個以上的酶切位點，有選擇的余地；
（4）必需有易檢測的標記，多是抗生素的抗性基因。
無論選用哪種載體，首先都要獲得載體分子，然后采用適當?shù)南拗泼笇⑤d體DNA進行切割，獲得載體片段，以便于與目的基因片段進行連接。

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