BY-1512 RNLEC/HL-029兔正常肺上皮細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
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- 更新時間 2025/8/7 16:40:15
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RNLEC/HL-029兔正常肺上皮細胞系
RNLEC/HL-029兔正常肺上皮細胞系作為兔源正常肺組織研究的標(biāo)準(zhǔn)模型,以其純粹的正常肺上皮特性和穩(wěn)定的生理功能表現(xiàn),在肺臟生理機制研究、肺部疾病對照分析及藥物安全性評價中具有不可替代的地位。與 OCU-L1 家兔肺細胞系側(cè)重病理研究不同,該細胞系源自家兔健康肺組織的肺泡上皮區(qū)域,為解析正常肺功能及疾病狀態(tài)下的異常變化提供了關(guān)鍵基準(zhǔn)。
細胞起源與生物學(xué)特性
RNLEC/HL-029 兔正常肺上皮細胞系源自無特定病原體(SPF)級家兔的肺臟肺泡上皮組織,通過酶解消化結(jié)合流式細胞分選(CD74?/CD326?雙陽性篩選)建立。其分離過程嚴(yán)格保留正常肺泡 Ⅱ 型上皮細胞的表型,與 OCU-L1 的支氣管上皮屬性差異顯著,該細胞系高表達肺泡特異性標(biāo)志物表面活性蛋白 C(SP-C,97% 陽性)、肺泡上皮細胞黏附分子(EP-CAM,96% 陽性),低表達支氣管標(biāo)志物 CCSP(<1%),細胞純度較原代正常肺細胞提升 60%。
細胞形態(tài)呈典型的立方上皮樣,大小均一(直徑約 17-21μm),排列成單層鵝卵石狀,細胞核呈圓形(核質(zhì)比約 1:4.5),較 OCU-L1 的柱狀形態(tài)更具肺泡上皮特征。在培養(yǎng)特性上,最適體系為含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基(添加 10ng/mL 肝細胞生長因子),在 37℃、5% CO?環(huán)境下貼壁生長,倍增時間約 48-52 小時(長于 OCU-L1)。傳代需在細胞融合度達 60%-70% 時進行,推薦傳代比例 1:2,過度融合會導(dǎo)致表面活性物質(zhì)分泌功能下降(SP-B 表達降低 40%)。
功能鑒定顯示,該細胞系無微生物污染,染色體核型正常(44 條,未見異常核型),連續(xù)傳代 25 次后仍保持正常肺上皮細胞的生理特征,肺泡表面活性物質(zhì)分泌能力穩(wěn)定(每 10?細胞 24 小時分泌量達 12μg),為長期對照實驗提供了可靠基準(zhǔn)。
核心應(yīng)用領(lǐng)域
肺臟生理功能機制研究
RNLEC/HL-029 細胞系是解析正常肺功能的理想模型。在肺泡液體清除機制研究中,該細胞系表現(xiàn)出典型的鈉通道依賴性液體轉(zhuǎn)運能力,阿米洛利(鈉通道抑制劑)可使其清除率下降 72%,而 OCU-L1 的液體轉(zhuǎn)運效率僅為其 55%。通過該模型發(fā)現(xiàn),β?腎上腺素受體激動劑可使肺泡液體清除率提升 1.8 倍,且這一過程依賴 AQP5 水通道蛋白,為理解正常肺的水液平衡機制提供了直接證據(jù)。
肺部疾病研究的陰性對照
在肺部疾病模型中,該細胞系作為正常對照的價值尤為突出。在肺腺癌體外模型中,對比 RNLEC/HL-029 與癌變細胞系發(fā)現(xiàn),后者的遷移能力是正常細胞的 4.3 倍,E - 鈣粘蛋白表達下降 65%,而 OCU-L1 因本身具有一定的病理易感性(如鱗狀化生傾向),不適合作為嚴(yán)格對照。在肺纖維化研究中,該細胞系可清晰反映正常細胞與纖維化細胞的差異:纖維化模型細胞的膠原蛋白 Ⅰ 表達量是其 8.2 倍,而 OCU-L1 的基礎(chǔ)表達量就偏高(是 RNLEC/HL-029 的 2.1 倍),影響對照精度。
藥物安全性評價
RNLEC/HL-029 細胞系為肺部用藥的安全性評估提供了標(biāo)準(zhǔn)化平臺。在吸入式藥物毒性測試中,該細胞系的 LD??(半數(shù)致死濃度)測定結(jié)果與動物肺組織損傷程度的相關(guān)性達 0.91,顯著高于 OCU-L1(0.76)。某新型抗生素的安全性評價顯示,當(dāng)濃度超過 80μg/mL 時,該細胞系的活力下降 40%,且出現(xiàn)緊密連接破壞(ZO-1 表達減少),提示可能存在肺毒性風(fēng)險,為臨床劑量設(shè)計提供了重要參考。
與 OCU-L1 細胞系的差異及協(xié)同
兩者雖同屬兔肺上皮細胞系,但功能定位互補:RNLEC/HL-029 作為 “正?;鶞?zhǔn)”,提供生理狀態(tài)參考;OCU-L1 作為 “病理模型”,模擬疾病過程。在急性肺損傷研究中,OCU-L1 可模擬損傷后的炎癥反應(yīng)(IL-6 分泌增加 5 倍),而 RNLEC/HL-029 則作為正常對照,清晰顯示損傷導(dǎo)致的功能變化(如表面活性物質(zhì)分泌減少 60%),兩者結(jié)合可全面反映疾病的病理生理過程。
優(yōu)勢與局限性
其核心優(yōu)勢在于:嚴(yán)格保留正常肺上皮的生理特性,是理想的陰性對照模型;肺泡上皮特異性高,適合研究肺泡層面的功能;與體內(nèi)正常肺組織的相關(guān)性強,實驗結(jié)果外推價值高。局限性表現(xiàn)為:對病毒的敏感性較低(僅為 OCU-L1 的 30%),不適合病毒分離;增殖速率較慢,大規(guī)模實驗成本較高。
研究意義與展望
RNLEC/HL-029 細胞系的建立,填bu了兔源正常肺上皮基準(zhǔn)模型的空白,為肺部研究提供了標(biāo)準(zhǔn)化的 “正常參照系”。未來通過建立 3D 肺泡類器官模型(目前單層培養(yǎng)的肺泡功能模擬度約 60%),可進一步提升生理功能的模擬精度。作為肺臟研究的 “標(biāo)尺”,它將持續(xù)為疾病機制解析、藥物研發(fā)提供可靠對照,推動肺部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的精準(zhǔn)發(fā)展。
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