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BY-1124 G1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞系

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號 BY-1124
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時間 2025/8/8 7:34:54
  • 訪問次數(shù) 261

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上海乾思生物科技有限公司 我們只做一件事,認(rèn)真做好試劑盒!

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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實驗耗材和消耗品、儀器設(shè)備。

供貨周期 現(xiàn)貨
G1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞系
在細(xì)胞周期調(diào)控與胚胎發(fā)育研究領(lǐng)域,G1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞系憑借其du特的熒光標(biāo)記特性與穩(wěn)定的干細(xì)胞潛能,成為可視化追蹤細(xì)胞周期進(jìn)程、解析胚胎干細(xì)胞命運決定機(jī)制的重要工具,為干細(xì)胞生物學(xué)與發(fā)育生物學(xué)研究提供了創(chuàng)新的實驗?zāi)P汀?/span>
細(xì)胞特性與標(biāo)記原理:該細(xì)胞系源自 C57BL/6 小鼠囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán),通過基因編輯技術(shù)將綠色熒光蛋白(GFP)基因精準(zhǔn)整合至 G1 期特異性表達(dá)的細(xì)胞周期蛋白 D1(Cyclin D1)啟動子下游,使細(xì)胞進(jìn)入 G1 期時自發(fā)表達(dá) GFP,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)明亮的綠色熒光,而處于 S、G2、M 期時熒光信號顯著減弱,為實時監(jiān)測細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換提供了直觀標(biāo)記。細(xì)胞形態(tài)呈典型胚胎干細(xì)胞特征,圓形或橢圓形,核質(zhì)比高達(dá) 1:1.2,細(xì)胞核大而清晰,核仁明顯,細(xì)胞緊密聚集形成克隆狀生長,邊緣光滑,克隆內(nèi)部細(xì)胞連接緊密。核心參數(shù)穩(wěn)定:qun體倍增時間約 18-22 小時,連續(xù)傳代 40 次后仍保持正常核型(40 條染色體,XY 性別決定);流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示,G1 期熒光陽性細(xì)胞比例約 45%,與細(xì)胞周期自然分布規(guī)律一致;干細(xì)胞標(biāo)志物 Oct4、Sox2、Nanog 免疫熒光染色均呈強陽性,表明其未分化狀態(tài)穩(wěn)定;細(xì)胞純度達(dá) 96%,無微生物污染,保障了實驗的可靠性與重復(fù)性。
科研應(yīng)用價值:在細(xì)胞周期調(diào)控研究中,該細(xì)胞系可通過熒光強度變化動態(tài)追蹤 G1 期向 S 期轉(zhuǎn)換的時間節(jié)點,結(jié)合 EdU 摻入實驗,能精準(zhǔn)量化不同處理因素(如細(xì)胞因子、小分子抑制劑)對 G1 期滯留時間的影響,為解析細(xì)胞周期檢查點調(diào)控機(jī)制提供可視化數(shù)據(jù)。在胚胎干細(xì)胞分化研究中,當(dāng)細(xì)胞向神經(jīng)外胚層分化時,G1 期熒光持續(xù)時間延長約 30%,而向中胚層分化時熒光信號提前減弱,揭示了細(xì)胞周期時相變化與譜系定向分化的關(guān)聯(lián),為探索干細(xì)胞命運決定的時序調(diào)控規(guī)律提供了關(guān)鍵證據(jù)。此外,該細(xì)胞系可用于構(gòu)建嵌合體小鼠模型,通過熒光追蹤觀察供體細(xì)胞在早期胚胎發(fā)育中的增殖與分化軌跡,其在囊胚注射后的嵌合率達(dá) 82%,為研究胚胎干細(xì)胞在體內(nèi)的動態(tài)分布提供了理想工具。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:需在滋養(yǎng)層細(xì)胞(如經(jīng)絲裂mei素 C 處理的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)上培養(yǎng),或使用含 LIF(白血病抑制因子)的無血清培養(yǎng)基維持未分化狀態(tài),培養(yǎng)基推薦采用 DMEM/F12 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加 15% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸、0.1mM β- 巰基乙醇及 1% 抗生素混合液。培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?、95% 濕度的恒溫培養(yǎng)箱,每日觀察熒光強度變化以監(jiān)測細(xì)胞周期狀態(tài)。傳代時采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化,待克隆邊緣細(xì)胞松動后終止消化,傳代比例 1:3-1:5,每 24-36 小時傳代一次,避免克隆過度生長導(dǎo)致分化。凍存液配方為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 20% FBS+10% DMSO,經(jīng)程序降溫后存入液氮,復(fù)蘇后細(xì)胞存活率達(dá) 90% 以上,熒光標(biāo)記特性在復(fù)蘇后 3 代內(nèi)即可wan全恢復(fù)。運輸方式建議采用干冰冷凍運輸,收到后立即復(fù)蘇培養(yǎng),且該細(xì)胞系僅限科研使用,禁止用于人體相關(guān)實驗。
該細(xì)胞系以其精準(zhǔn)的 G1 期熒光標(biāo)記、穩(wěn)定的干細(xì)胞特性及便捷的可視化操作,在細(xì)胞周期動態(tài)研究與胚胎發(fā)育機(jī)制探索中具有不可替代的價值,為揭示干細(xì)胞增殖與分化的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了強大的實驗支撐。

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