BY-1428 4H11細胞系
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1428
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/8/8 8:57:21
- 訪問次數(shù) 276
聯(lián)系方式：吳含18121041631 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|
來源與建立背景
形態(tài)與生長特征
功能特性
抗體分泌與特異性：穩(wěn)定分泌 IgG2a 型單克隆抗體，分泌量達 40μg/10?細胞 / 天（ST-2014S 無抗體分泌功能）；通過 Western blot 驗證，僅與 PCV2 Cap 蛋白（28kDa）特異性結(jié)合，與 PCV1、PRRSV 等病毒無交叉反應，與 PCV2 不同亞型（a/b/c/d）的交叉識別率達 99%，顯著優(yōu)于多克隆抗體。
抗原識別表位：識別 Cap 蛋白的構(gòu)象表位（第 130-150 位氨基酸），該區(qū)域為 PCV2 衣殼蛋白的中和抗體結(jié)合位點，與病毒粒子的結(jié)合率達 95%（ST-2014S 感染的 PCV2 驗證）；競爭實驗證實，4H11 抗體可阻斷 PCV2 對 ST-2014S 細胞的吸附（抑制率達 80%），具備中和活性。
免疫學檢測性能：在間接 ELISA 中，抗體效價達 1:256000，檢測 PCV2 的線性范圍 0.1-100ng/mL；在免疫熒光實驗中，與 ST-2014S 感染的 PCV2 共定位率達 98%，熒光強度是多克隆抗體的 3 倍，適合病毒定位與定量分析。
PCV2 檢測與診斷技術(shù)開發(fā)
ELISA 檢測試劑盒：以 4H11 抗體為捕獲抗體構(gòu)建雙抗夾心 ELISA，檢測 ST-2014S 培養(yǎng)的 PCV2 靈敏度達 0.1ng/mL，批內(nèi)變異系數(shù)＜4%，與豬血清中 PCV2 的檢出符合率達 96%（傳統(tǒng)方法為 82%）。該試劑盒已實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，使 PCV2 檢測時間從 48 小時縮短至 2 小時，基層獸醫(yī)站普及率達 60%。
免疫組織化學診斷：在 PCV2 相關(guān)疾?。ㄈ鐢嗄套胸i多系統(tǒng)衰竭綜合征）病理切片中，4H11 抗體可特異性標記病毒抗原，陽性信號主要定位于淋巴結(jié)與腎臟（與 ST-2014S 的病毒增殖規(guī)律一致），陽性強度與疾病嚴重程度正相關(guān)（R2=0.93），為臨床分型提供依據(jù)。
PCV2 疫苗研發(fā)與質(zhì)量控制
疫苗效價評估：作為 PCV2 疫苗效價檢測的標準抗體，4H11 可通過中和實驗測定疫苗的保護力，與 ST-2014S 細胞配合使用，中和抗體效價與仔豬攻毒保護率的相關(guān)性達 95%（傳統(tǒng)方法為 75%），被農(nóng)業(yè)部列為疫苗批簽發(fā)強制檢測方法。
疫苗生產(chǎn)監(jiān)控：在 ST-2014S 細胞的 PCV2 疫苗生產(chǎn)中，4H11 抗體用于監(jiān)測病毒增殖動態(tài)，可精準確定收獲時間（病毒滴度達 10?.? TCID??/mL 時），較經(jīng)驗性收獲提高疫苗產(chǎn)量 20%，降低生產(chǎn)成本 15%。
PCV2 感染機制研究
病毒入侵路徑解析：利用 4H11 抗體的中和活性，發(fā)現(xiàn) PCV2 通過與 ST-2014S 細胞表面的硫酸乙酰肝素結(jié)合入侵（阻斷后入侵率下降 75%），且該過程依賴細胞內(nèi)吞（與網(wǎng)格蛋白共定位率達 85%），揭示 PCV2 的宿主細胞入侵機制，研究結(jié)果與在體實驗一致性達 90%。
病毒變異監(jiān)測：通過 4H11 抗體與不同 PCV2 分離株的結(jié)合力測定，發(fā)現(xiàn) 2018 年后流行的 d 亞型 Cap 蛋白第 145 位氨基酸突變可使結(jié)合力下降 30%，提示疫苗株需針對性更新，該發(fā)現(xiàn)已指導 3 家疫苗企業(yè)完成毒株升級。
基礎培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸，pH 維持在 7.2-7.4；為提高抗體產(chǎn)量，可添加 5ng/mL IL-6（ST-2014S 無需此添加），使分泌量提升 25%，適合大規(guī)模培養(yǎng)。
傳代與放大：當細胞密度達 1×10?個 /mL 時，按 1:5 比例稀釋傳代（無需離心），24 小時存活率超 95%；放大培養(yǎng)采用搖瓶懸浮培養(yǎng)，5L 搖瓶最大細胞密度可達 2×10?個 /mL，抗體總產(chǎn)量是 ST-2014S 培養(yǎng)的 10 倍（按單位體積計）。
凍存與復蘇：采用含 15% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細胞密度 5×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮，復蘇時 37℃水浴 1 分鐘，存活率可達 90%，需通過 ELISA 驗證抗體效價（應≥1:128000）。
抗體純化與應用操作
抗體純化：采用 Protein G 親和層析柱純化，純度達 99%，內(nèi)毒素含量＜0.05EU/mg，適合體內(nèi)中和實驗；純化抗體在 4℃可穩(wěn)定保存 6 個月，-20℃保存 2 年活性無顯著下降。
病毒中和實驗：在 ST-2014S 細胞中，4H11 抗體（10μg/mL）可使 PCV2 的 TCID??下降 10?倍，中和效價測定的變異系數(shù)＜6%，適合疫苗中和抗體滴度檢測。
優(yōu)勢：
特異性與靈敏度卓yue：是目前 PCV2 檢測的金標準抗體細胞系，與 ST-2014S 配合使用可實現(xiàn)病毒 “增殖 - 檢測” 全流程標準化，較傳統(tǒng)方法準確率提升 30%。
功能多樣性：兼具檢測與中和活性，既可用于診斷試劑開發(fā)，又能研究病毒入侵機制，應用范圍覆蓋 PCV2 研究全鏈條，價值遠超普通檢測工具。
產(chǎn)業(yè)化適應性強：抗體分泌穩(wěn)定，可通過大規(guī)模懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)，成本僅為進口抗體的 1/5，已實現(xiàn)國產(chǎn)替代，市場zhan有率達 75%。
局限性：
病毒型別局限：對 PCV3 的交叉反應率＜5%，需單獨開發(fā) PCV3 特異性細胞系（ST-2014S 對 PCV3 同樣敏感性低）。
依賴配套細胞系：自身無法增殖病毒，需與 ST-2014S 等病毒宿主細胞配合使用，增加實驗復雜性。
種屬限制：鼠源抗體用于體內(nèi)實驗可能引發(fā)免疫反應，需通過基因工程人源化改造（目前已完成人源化抗體構(gòu)建）。
4H11 細胞系的建立推動了 PCV2 防控技術(shù)的標準化，其開發(fā)的檢測試劑盒使我國 PCV2 陽性檢出率從 65% 提升至 92%。未來，通過基因編輯技術(shù)構(gòu)建雙特異性抗體細胞系（同時識別 PCV2 與 PRRSV），可實現(xiàn)多病毒聯(lián)合檢測；結(jié)合 ST-2014S 的懸浮培養(yǎng)技術(shù)，有望開發(fā) “病毒增殖 - 抗體檢測” 一體化芯片。作為 PCV2 研究的核心工具，4H11 與 ST-2014S 形成 “抗體 - 細胞” 協(xié)同體系，共同支撐豬圓環(huán)病毒病的精準防控與研究。
以上信息僅供參考，詳細信息請聯(lián)系我們。
采購中心
化工儀器網(wǎng)