內(nèi)皮標(biāo)志物表達(dá)：高表達(dá)血管內(nèi)皮特異性標(biāo)志物，如 CD31（陽(yáng)性率 98%）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 2（VEGFR2，陽(yáng)性率 95%），同時(shí)表達(dá)血 - 視網(wǎng)膜屏障特征性蛋白 —— 緊密連接蛋白 Claudin-5（陽(yáng)性率 90%），其表達(dá)量是臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的 3 倍，體現(xiàn)眼部?jī)?nèi)皮的特殊性。

血管生成能力：在 Matrigel 基質(zhì)上可自發(fā)形成管狀結(jié)構(gòu)，24 小時(shí)內(nèi)管腔形成率達(dá) 85%（顯著高于其他內(nèi)皮細(xì)胞系），且能響應(yīng) VEGF 誘導(dǎo)發(fā)生遷移（遷移速率達(dá) 30μm / 小時(shí)），模擬脈絡(luò)膜新生血管的形成過(guò)程；體外血管通透性實(shí)驗(yàn)顯示其跨上皮電阻（TEER）值達(dá) 250Ω?cm2，接近體內(nèi)血 - 視網(wǎng)膜屏障的生理水平。

病原體敏感性：對(duì)瘧原蟲（如惡性瘧原蟲）具有特異性敏感性，感染后 48 小時(shí)裂殖體形成率達(dá) 35%，紅細(xì)胞黏附率是臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的 5 倍，可模擬瘧原蟲性視網(wǎng)膜病變的發(fā)病過(guò)程，為寄生蟲性眼病研究提供du特模型。

糖尿病視網(wǎng)膜病變模型：在高糖（25mM）條件下，RF/6A 細(xì)胞的 VEGF 分泌量提升 3 倍，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）mRNA 表達(dá)上調(diào) 4 倍，同時(shí)緊密連接蛋白表達(dá)下降 50%，TEER 值降至 100Ω?cm2，模擬糖尿病狀態(tài)下血 - 視網(wǎng)膜屏障的破壞過(guò)程，用于解析高糖誘導(dǎo)的血管滲漏機(jī)制。

脈絡(luò)膜新生血管機(jī)制解析：通過(guò)缺氧誘導(dǎo)（1% O?）發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子 1α（HIF-1α）表達(dá)量提升 5 倍，促血管生成因子 Ang-2 分泌增加 4 倍，而加入抗 VEGF 抗體可使管狀結(jié)構(gòu)形成率下降 70%，證實(shí) VEGF 在脈絡(luò)膜新生血管中的核心作用。

藥物篩選模型：基于其血管生成特性建立高通量抗血管生成藥物篩選體系，日均可檢測(cè) 200 種化合物。篩選出的新型小分子抑制劑可使 VEGFR2 磷酸化水平下降 80%，管狀結(jié)構(gòu)形成率降低 65%，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示其能減少激光誘導(dǎo)的猴脈絡(luò)膜新生血管面積 40%，為黃斑變性治療提供候選藥物。

藥物毒性評(píng)價(jià)：用于評(píng)估眼科藥物對(duì)血 - 視網(wǎng)膜屏障的影響，通過(guò)檢測(cè) TEER 值變化與 Claudin-5 表達(dá)，發(fā)現(xiàn)某抗新生血管藥物在高濃度下可使屏障完整性下降 30%，提示臨床使用需控制劑量，為用藥安全提供參考。

瘧原蟲感染機(jī)制：利用其對(duì)瘧原蟲的敏感性，發(fā)現(xiàn)惡性瘧原蟲蛋白 VAR2CSA 可通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面硫suan軟骨素 A，使內(nèi)皮細(xì)胞黏附能力提升 3 倍，進(jìn)而導(dǎo)致視網(wǎng)膜血管阻塞，為瘧原蟲性眼病的防治提供新靶點(diǎn)。

眼內(nèi)炎癥模型：經(jīng)脂多糖（LPS）刺激后，細(xì)胞的 IL-6 與 TNF-α 分泌量分別提升 10 倍與 8 倍，同時(shí)血管通透性增加 60%，模擬眼內(nèi)炎癥狀態(tài)下的內(nèi)皮功能紊亂，用于抗炎藥物的篩選與機(jī)制研究。

培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基添加 15% 胎牛血清、10ng/mL VEGF、1% 青mei素 - 鏈mei素，pH 維持在 7.2-7.4；為促進(jìn)屏障功能成熟，可添加 50nM 視黃huang酸培養(yǎng) 48 小時(shí)，使 TEER 值提升 40%。

傳代流程：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 70% 時(shí)，消化處理后按 1:4 比例接種，離心速度 1000rpm，24 小時(shí)貼壁率超 90%，避免過(guò)度融合（＞80% 會(huì)導(dǎo)致接觸抑制，影響血管生成功能）。

凍存保護(hù)：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細(xì)胞密度 1.5×10?個(gè) /mL，程序降溫至 - 80℃過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮，復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴 1 分鐘，直接接種至預(yù)涂明膠的培養(yǎng)瓶，存活率可達(dá) 85%。

血管生成檢測(cè)：細(xì)胞以 5×10?個(gè) / 孔接種至 Matrigel 包被的 24 孔板，培養(yǎng) 6 小時(shí)后開始形成管狀結(jié)構(gòu)，24 小時(shí)通過(guò) ImageJ 軟件定量分析管腔長(zhǎng)度與分支點(diǎn)數(shù)，結(jié)果變異系數(shù)＜10%。

屏障功能檢測(cè)：使用 Transwell 小室（孔徑 0.4μm）構(gòu)建單層細(xì)胞屏障，培養(yǎng) 72 小時(shí)后通過(guò) Millicell ERS-2 測(cè)定 TEER 值，或通過(guò)熒光su鈉通透性實(shí)驗(yàn)評(píng)估屏障完整性，與人類視網(wǎng)膜組織的相關(guān)性達(dá) 85%。

優(yōu)勢(shì)：

局限性：