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BY-1415 MM-S10獼猴皮膚細(xì)胞系

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  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào) BY-1415
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2025/8/8 9:19:12
  • 訪問(wèn)次數(shù) 213
產(chǎn)品標(biāo)簽

獼猴皮膚細(xì)胞MM-S10

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供貨周期 現(xiàn)貨
MM-S10獼猴皮膚細(xì)胞系
MM-S10獼猴皮膚細(xì)胞系是從老年獼猴背部皮膚組織分離建立的成纖維細(xì)胞系,因保留靈長(zhǎng)類皮膚老化的典型特征與創(chuàng)面愈合的慢反應(yīng)特性,成為皮膚老化機(jī)制研究、慢性創(chuàng)面修復(fù)及抗衰老藥物篩選的特色模型。其與人類老年皮膚成纖維細(xì)胞的高度同源性(基因表達(dá)譜相似度 94%),為解析皮膚衰老與修復(fù)障礙的分子機(jī)制提供了接近臨床的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),尤其在光老化研究與促愈藥物開(kāi)發(fā)中具有不可替代的價(jià)值。
一、細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來(lái)源與建立背景

MM-S10 細(xì)胞系源自 15 歲齡獼猴(相當(dāng)于人類 50 歲)的背部皮膚組織,2016 年由中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所通過(guò)膠原酶消化法建立,經(jīng) 35 代傳代純化后形成穩(wěn)定細(xì)胞系(“MM” 代表獼猴,“S10” 為皮膚來(lái)源的第 10 株克?。?。該細(xì)胞系保留了老年皮膚成纖維細(xì)胞的功能特征,其建立填bu了靈長(zhǎng)類皮膚老化模型的空白,解決了年輕細(xì)胞系無(wú)法模擬衰老相關(guān)修復(fù)障礙的問(wèn)題,為老年皮膚疾病研究提供了理想工具。
  1. 形態(tài)與生長(zhǎng)特征

細(xì)胞呈成纖維樣形態(tài),與年輕皮膚細(xì)胞系(如 MM-S7)相比,胞體更扁平、胞質(zhì)內(nèi)脂褐素顆粒增多(油紅 O 染色陽(yáng)性率 35%),細(xì)胞核呈不規(guī)則形,核仁模糊。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,倍增時(shí)間約 58-64 小時(shí)(顯著長(zhǎng)于 MM-S7 的 40-46 小時(shí)),傳代比例 1:2,每周換液 2 次以維持細(xì)胞密度在 2×10?-6×10?個(gè) /cm2。細(xì)胞凍存復(fù)蘇存活率超 80%,連續(xù)傳代 40 次后仍保持穩(wěn)定的老化表型,端粒長(zhǎng)度較年輕細(xì)胞縮短 30%,符合衰老細(xì)胞的生物學(xué)特征。
  1. 功能特性

  • 標(biāo)志物表達(dá):高表達(dá)成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)標(biāo)志物波形蛋白(Vimentin,陽(yáng)性率 98%),但 Ⅰ 型膠原蛋白分泌量?jī)H為 MM-S7 的 50%,基質(zhì)金屬蛋白酶 - 1(MMP-1)表達(dá)量提升 2 倍,呈現(xiàn)衰老相關(guān)的基質(zhì)代謝失衡特征;同時(shí)表達(dá)衰老標(biāo)志物 p16???(陽(yáng)性率 45%)和 β- 半乳糖苷酶(陽(yáng)性率 50%),與人類老年皮膚成纖維細(xì)胞表型一致。

  • 病毒敏感性:對(duì)水痘 - 帶狀皰疹病毒(VZV)的易感性顯著高于年輕細(xì)胞系,感染效率達(dá) 90%,48 小時(shí)病毒滴度達(dá) 10? PFU/mL,感染后 18 小時(shí)即出現(xiàn)細(xì)胞病變(較 MM-S7 提前 6 小時(shí)),模擬老年個(gè)體對(duì)皮膚病毒的易感特性。

  • 修復(fù)功能特征:在體外劃痕模型中,24 小時(shí)劃痕閉合率僅 35%(MM-S7 為 70%),細(xì)胞遷移速率 18μm / 小時(shí)(約為年輕細(xì)胞的 40%);低氧環(huán)境下 VEGF 分泌量?jī)H為 MM-S7 的 30%,呈現(xiàn)慢性創(chuàng)面的修復(fù)遲鈍表型。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 皮膚老化機(jī)制研究

  • 光老化模型構(gòu)建:經(jīng) UVB(20mJ/cm2)照射后,MM-S10 細(xì)胞的活性氧(ROS)水平提升 4 倍,MMP-1 表達(dá)量增加 3 倍,Ⅰ 型膠原蛋白降解率達(dá) 60%,同時(shí)出現(xiàn) DNA 損傷標(biāo)志物 γ-H2AX 陽(yáng)性率提升至 55%,wan美模擬人類皮膚光老化的分子特征,用于解析紫外線誘導(dǎo)衰老的信號(hào)通路。

  • 衰老代謝組學(xué)分析:通過(guò)代謝組學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),MM-S10 細(xì)胞的煙xian胺腺嘌呤二核苷酸(NAD?)水平較年輕細(xì)胞下降 40%,Sirtuin 1(SIRT1)活性降低 50%,補(bǔ)充 NAD?前體可使細(xì)胞遷移速率提升 60%,證實(shí) NAD?代謝失衡在衰老相關(guān)修復(fù)障礙中的關(guān)鍵作用。

  1. 慢性創(chuàng)面修復(fù)研究

  • 糖尿病創(chuàng)面模型:在高糖(25mM)條件下,MM-S10 細(xì)胞的凋亡率達(dá) 30%(正常糖環(huán)境為 8%),TGF-β1 信號(hào)通路激活效率下降 50%,α-SMA 表達(dá)量?jī)H為正常水平的 25%,模擬糖尿病老年患者的創(chuàng)面愈合障礙,用于篩選靶向修復(fù)藥物。

  • 促愈藥物機(jī)制解析:發(fā)現(xiàn)某植物提取物可通過(guò)激活 AMPK 通路,使 MM-S10 細(xì)胞的 NAD?水平提升 2 倍,p16???表達(dá)下調(diào) 40%,24 小時(shí)劃痕閉合率提升至 65%,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示其可使老年獼猴創(chuàng)面愈合時(shí)間縮短 40%,揭示抗衰老與促修復(fù)的協(xié)同機(jī)制。

  1. 抗衰老藥物篩選與評(píng)價(jià)

  • 功效性成分篩選:基于衰老標(biāo)志物建立高通量篩選模型,日均可檢測(cè) 150 種化合物。篩選出的新型肽類分子可使 MM-S10 細(xì)胞的 β- 半乳糖苷酶陽(yáng)性率下降 30%,Ⅰ 型膠原蛋白分泌量提升 80%,人體臨床試驗(yàn)顯示其能增加真皮厚度 15%,為抗衰老化妝品開(kāi)發(fā)提供候選成分。

  • 皮膚安全性評(píng)估:用于評(píng)價(jià)抗衰老藥物的老年皮膚耐受性,通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞活力、IL-8 分泌及乳酸脫氫酶釋放,發(fā)現(xiàn)維 A 酸在 0.5μM 濃度下對(duì) MM-S10 的毒性較年輕細(xì)胞高 3 倍,提示老年皮膚用藥需降低劑量,為臨床用藥提供參考。

三、培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)
  1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)方案

  • 培養(yǎng)基:DMEM 高糖培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、100U/mL 青mei素、100μg/mL 鏈mei素,可加入 5ng/mL bFGF 維持細(xì)胞活力(但不逆轉(zhuǎn)衰老表型),pH 7.2-7.4,每周換液 2 次,避免細(xì)胞密度過(guò)高(>80% 融合會(huì)加劇衰老表型)。

  • 傳代流程:當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 70% 時(shí),用 0.25%yi酶 - EDTA 消化 5 分鐘(較年輕細(xì)胞延長(zhǎng) 2 分鐘),終止消化后按 1:2 比例接種,離心速度降至 1000rpm(避免衰老細(xì)胞機(jī)械損傷),24 小時(shí)后換液以提高存活率。

  • 凍存保護(hù):采用含 15% DMSO 的凍存液(提高低溫保護(hù)效果),細(xì)胞密度調(diào)整為 1.5×10?個(gè) /mL,程序降溫速率控制在 - 1℃/ 分鐘,液氮保存后復(fù)蘇存活率可達(dá) 80%。

  1. 功能實(shí)驗(yàn)操作

  • 衰老相關(guān) β- 半乳糖苷酶檢測(cè):細(xì)胞接種至 24 孔板,培養(yǎng) 48 小時(shí)后用固定液處理,加入染色液 37℃孵育 16 小時(shí)(常規(guī)細(xì)胞為 8 小時(shí)),顯微鏡下計(jì)數(shù)藍(lán)色陽(yáng)性細(xì)胞比例。

  • 病毒感染實(shí)驗(yàn):調(diào)整細(xì)胞密度至 5×10?個(gè) / 孔,接種 24 小時(shí)后加入 VZV 病毒液(MOI=0.1),吸附 2 小時(shí)后換維持液,每 6 小時(shí)觀察細(xì)胞病變,48 小時(shí)通過(guò)蝕斑實(shí)驗(yàn)測(cè)滴度。

四、優(yōu)勢(shì)與局限性
  • 優(yōu)勢(shì)

  1. 衰老表型穩(wěn)定性:長(zhǎng)期傳代保持穩(wěn)定的衰老特征,避免年輕細(xì)胞系誘導(dǎo)衰老模型的表型波動(dòng),實(shí)驗(yàn)重復(fù)性達(dá) 90%。

  1. 臨床相關(guān)性高:與人類老年皮膚的基因表達(dá)譜和功能特征高度吻合,研究結(jié)果可直接外推至老年皮膚疾病,轉(zhuǎn)化價(jià)值顯著。

  1. 模型多樣性:可同時(shí)模擬自然衰老、光老化、糖尿病合并衰老等多種病理狀態(tài),減少模型構(gòu)建的復(fù)雜性。

  • 局限性

  1. 增殖能力弱:倍增時(shí)間長(zhǎng),大規(guī)模實(shí)驗(yàn)需提前準(zhǔn)備,增加實(shí)驗(yàn)周期。

  1. 個(gè)體差異影響:源自單一獼猴個(gè)體,可能無(wú)法wan全代表種群水平的衰老特征,建議結(jié)合多株系驗(yàn)證。

  1. 培養(yǎng)成本高:對(duì)血清質(zhì)量敏感,需使用優(yōu)質(zhì)胎牛血清(成本為常規(guī)血清的 2 倍)以維持細(xì)胞活性。

五、研究意義與展望
MM-S10 細(xì)胞系的建立為老年皮膚研究提供了突破性工具,其在光老化機(jī)制中的應(yīng)用揭示了 NAD?代謝與 DNA 修復(fù)的關(guān)聯(lián),為抗衰老靶點(diǎn)開(kāi)發(fā)提供依據(jù);在慢性創(chuàng)面模型中的應(yīng)用推動(dòng)了老年修復(fù)障礙藥物的篩選進(jìn)程。未來(lái),通過(guò)基因編輯技術(shù)敲除衰老相關(guān)基因(如 p16???),可構(gòu)建 “逆轉(zhuǎn)衰老” 對(duì)照模型;結(jié)合 3D 皮膚構(gòu)建技術(shù),有望形成含衰老成纖維細(xì)胞的立體皮膚模型,為老年皮膚疾病研究與藥物開(kāi)發(fā)提供更精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。

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