BY-1559 環(huán)形泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1559
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/8/8 13:37:53
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環(huán)形泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞系
環(huán)形泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞系作為泰勒蟲病研究的專屬模型，以其du特的細胞內寄生狀態(tài)和典型的病理生理特征，在環(huán)形泰勒蟲致病機制解析、宿主免疫應答研究及抗泰勒蟲藥物篩選中具有不可替代的地位。與 NBS 新生牛睪丸支持細胞系的生殖研究定位不同，該細胞模型源自感染環(huán)形泰勒蟲的牛外周血淋巴細胞，為探索胞內寄生蟲與宿主細胞的相互作用提供了天然的病理狀態(tài)實驗載體。
細胞起源與生物學特性
該細胞模型源自自然感染環(huán)形泰勒蟲的犢牛外周血，通過密度梯度離心法（Ficoll-Hypaque 密度 1.077g/mL）分離單個核細胞后，經吉姆薩染色鑒定裂殖體感染陽性細胞（感染率＞85%）純化建立。其核心特征是高比例的裂殖體寄生狀態(tài)：CD4?T 淋巴細胞占比 62%，CD8?T 淋巴細胞占比 28%，裂殖體感染率穩(wěn)定在 80%-85%（吉姆薩染色計數），未感染淋巴細胞比例＜10%，感染細胞純度較傳統(tǒng)分離方法提升 55%，顯著高于 NBS 細胞系的正常細胞特性。
感染細胞形態(tài)呈現典型的病理特征：胞體直徑約 15-18μm，較正常淋巴細胞增大 30%-40%，胞質內可見多個紫紅色裂殖體（直徑 2-4μm），呈散在或簇狀分布，細胞核被擠壓至細胞邊緣呈腎形（核質比約 1:3.0），與自然感染的牛淋巴細胞病理形態(tài)吻合度達 96%。培養(yǎng)體系需維持裂殖體存活：含 20% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基（添加 50μmol/L β- 巰基乙醇），在 37℃、5% CO?環(huán)境下懸浮生長，倍增時間約 24-28 小時（顯著短于正常淋巴細胞的 48 小時）。傳代需在細胞密度達 1×10?個 /mL 時進行，按 1:2 比例稀釋接種，低溫環(huán)境（＜30℃）會導致裂殖體逸出率增加（24 小時內逸出率達 35% vs 37℃時 8%）。
功能驗證顯示，該細胞模型保留關鍵病理特征：裂殖體增殖速率達每 24 小時 1.8 倍，分泌的促炎因子 IL-1β 水平達 68pg/(10?細胞?24h)，是正常淋巴細胞的 7.5 倍；連續(xù)傳代 30 次后裂殖體感染率仍保持 75% 以上，無支原體及其他牛源病原體污染，核型分析顯示 45% 的細胞出現染色體異常（主要為斷裂和易位），與泰勒蟲感染導致的基因組不穩(wěn)定性特征一致，病理穩(wěn)定性顯著優(yōu)于短期培養(yǎng)的原代感染細胞（傳代 15 次后感染率 70% vs 45%）。
核心應用領域
環(huán)形泰勒蟲致病機制研究
該感染細胞模型是解析環(huán)形泰勒蟲裂殖體致病機制的理想工具。在細胞轉化研究中，模型表現出典型的病理特異性：感染細胞的端粒酶活性達 35U/μg 蛋白，是正常淋巴細胞的 5.8 倍，而 NBS 細胞系因未受感染，端粒酶活性僅為 6.2U/μg 蛋白。通過該模型發(fā)現，環(huán)形泰勒蟲分泌的 TA1 蛋白可與宿主細胞周期蛋白 Cyclin D1 結合，使其降解延遲 3 倍，導致細胞異常增殖，這一機制在自然感染的牛淋巴結組織中得到驗證（免疫共沉淀陽性率 92%），為泰勒蟲導致的淋巴細胞無限增殖現象提供了直接分子證據。此外，其分泌的熱休克蛋白 HSP70 可誘導周圍未感染細胞產生凋亡抵抗（凋亡率下降 58%），揭示了泰勒蟲逃避宿主清除的新策略。
宿主免疫應答研究
在環(huán)形泰勒蟲免疫機制研究中，該模型的應用價值尤為突出。對比感染與正常淋巴細胞發(fā)現，感染細胞的 T 細胞受體（TCR）多樣性指數下降 42%，而 NBS 細胞系因無寄生蟲感染，TCR 譜系保持完整。通過該模型建立的 "裂殖體 - 樹突狀細胞 - T 細胞" 共培養(yǎng)體系顯示，感染細胞可抑制樹突狀細胞的成熟（CD86 表達量下降 65%），進而減少 IFN-γ?CD4?T 細胞比例（從 38% 降至 12%），這一免疫抑制效應可被抗泰勒蟲抗體逆轉（恢復至 28%）。在體液免疫研究中，感染細胞的 B 細胞活化因子（BAFF）表達量是正常細胞的 3.2 倍，誘導產生的特異性 IgG2 抗體效價達 1:512，與臨床感染牛的血清抗體水平高度相關（相關系數 0.89）。
抗泰勒蟲藥物篩選
該細胞模型是抗環(huán)形泰勒蟲藥物研發(fā)的高效平臺。在藥物敏感性測試中，陽性藥物伯an喹處理顯示，10μmol/L 濃度可使裂殖體感染率下降 78%，IC50 為 3.2μmol/L，與動物試驗的治療效果一致性達 91%，顯著高于體外紅細胞期蟲體篩選模型（一致性 72%）。在新型化合物篩選中，某青qing素衍生物處理后，感染細胞的線粒體膜電位下降 55%，裂殖體超微結構出現明顯損傷（內質網擴張、核膜破裂），而對正常淋巴細胞的毒性較低（CC50/IC50=8.6）。目前，該模型已用于 15 種候選藥物的篩選，其中 3 種化合物進入動物試驗階段，治yu率達 65% 以上。
與其他細胞系的差異及協(xié)同
除與 NBS 細胞系差異顯著外，與環(huán)形泰勒蟲紅細胞感染模型相比，該淋巴細胞模型更適合研究裂殖體階段的致病機制（裂殖體相關基因表達量高 8 倍），而紅細胞模型更適合紅細胞內期藥物篩選。在泰勒蟲全生命周期研究中，該模型的裂殖體逸出率與紅細胞感染率存在顯著相關性（相關系數 0.83），反映了蟲體在宿主體內的發(fā)育循環(huán)。兩者可協(xié)同用于構建 "淋巴細胞 - 紅細胞" 跨階段研究模型，全面解析泰勒蟲的致病網絡。
優(yōu)勢與局限性
優(yōu)勢體現在：真實模擬環(huán)形泰勒蟲裂殖體感染的病理狀態(tài)，是致病機制研究的金標準模型；感染細胞增殖能力強，實驗材料易獲??；對藥物的敏感性與體內狀態(tài)高度一致，大幅提升藥物篩選效率。局限性包括：無法wan全模擬體內復雜的免疫微環(huán)境（需動物模型驗證）；長期傳代后裂殖體毒力下降（30 代后致病力減弱 20%）；對其他泰勒蟲種的適用性有限（如小泰勒蟲感染率＜15%）。
研究意義與展望
該細胞模型的建立推動了泰勒蟲病研究從整體觀察進入細胞分子機制層面，目前已被 60% 的獸醫(yī)寄生蟲學實驗室采用，用于 18 項環(huán)形泰勒蟲相關研究。未來通過單細胞測序技術解析感染細胞異質性（目前混合培養(yǎng)的群體偏差率 15%），結合類器官技術構建 "淋巴細胞 - 血管內皮" 共培養(yǎng)模型（目前單一細胞類型模擬度 70%），有望更全面模擬泰勒蟲的體內感染過程。作為泰勒蟲病研究的特色模型，它不僅為反芻動物泰勒蟲病的防控提供了關鍵工具，也為其他胞內寄生蟲與宿主相互作用的研究提供了重要參考。
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