商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

香蒲新苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nardosinone載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝100g

香薷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Praeruptorin B黑色瘤硫軟骨蛋白多糖抗體包裝25g

香葉木-7-O-葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Atractylenolide II核蛋白易位啟動子區(qū)域TPR抗體包裝500g

香葉木（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Clinodiside A核因子1X抗體包裝100mg

香櫞(枸櫞)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sauchinone環(huán)指蛋白107抗體包裝1g

香櫞（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Emodin-8-glucoside軸突生長誘向因子G1配體抗體包裝250mg

香紫蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Isoliensinine神經(jīng)前體表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體包裝100g

香紫蘇內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Liensinine Perchlorate軸突生長誘向因子4抗體包裝25g

襄五脂英文名稱： 3-Butylidenephthalideγ-分泌組件蛋白NCLN抗體包裝500g

消旋山莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Pachymic acid核受體蛋白NR2E3抗體包裝100g

小白菊內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Corilagin絲/蘇蛋白激NEK8抗體包裝25g

小駁骨（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside F3核孔蛋白Nup37抗體包裝500g

小檗紅堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sophoridine核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體包裝500mg

小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Demethylzeylasteral核苷結(jié)合蛋白1抗體包裝25g

小檗皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Harmine hydrochloride核苷結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng)緊密連接蛋白1試劑盒柴胡皂苷B2;Saikosaponin

纖維堆囊菌Sorangium│cellulosum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1試劑盒甘草查爾;Echinatin

彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格：AR,98%金屬硫蛋白2試劑盒穿心蓮新苷 ;Neoandrograph
Luxol Fast Blue染色液黑曲霉 乙酸松油酯嗜酸粒趨化因子Elisa

熱帶假絲酵母 姜黃油嗜酸性粒陽離子蛋白Elisa

球孢白僵 3-氨基-4-羥基-N-磺酰瘦Elisa

漆柄小孔 3--7-氮雜瘦受體Elisa

血痕韌革 N-CBZ-4-乙酸乙酯鼠泰澤病原體Elisa

梅林青霉 3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶甲雙解絲蛋白1Elisa

鏈霉 3--5-三氟-2-羧酸雙氫睪酮Elisa

聚生殼 3--5(三氟甲氧)苯甲水痘帶狀皰疹病IgG抗體Elisa

葡萄座腔 2H-1,2,3-三氮唑-2-乙酸水通道蛋白1Elisa

粟酒裂殖酵母 4-溴-3-甲氧基苯甲水通道蛋白2Elisa

大腸埃希氏 2-溴-4-甲氧基苯甲水通道蛋白3Elisa

阿舒假囊酵母 N-甲基高哌水通道蛋白4Elisa

干草鞘氨單胞 反,反-2,4-庚二烯水通道蛋白5Elisa

杰丁畢赤酵母 2-氟烯酸水通道蛋白7Elisa

雞樅(雞） 5-甲基-3,4-二氫噻吩并[2,3-D]嘧啶-4-酮水通道蛋白9Elisa