產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3Kγ抑制劑(IPI549)

英文名稱：IPI549

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

煙管菌表面趨化因子受體7抗體Human CCR7(C-C chemokine receptor type 7) ELISA Kit人鈣衛(wèi)蛋白免疫試劑盒

糖化酵母色c氧化10抗體Human DEFA1(Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)免疫試劑盒

少根根霉戴爾變種CRTAM抗體Human CLCF1(Cardiotrophin-like cytokine factor 1) ELISA Kit人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)免疫試劑盒

越桔假絲酵母單核趨化蛋白4抗體Human MSTN(Growth/differentiation factor 8) ELISA Kit人鈣離子通道抗體(IgG)免疫試劑盒

芽孢桿菌NK抑制性受體2DL3抗體Human SLC25A20(Mitochondrial carnitine/acylcarnitine carrier protein) ELISA Kit人鈣結(jié)合蛋白S100A14 免疫試劑盒

葡萄座腔菌CRX抗體Human AGTR1(Type-1 angiotensin II receptor) ELISA Kit人鈣結(jié)合蛋白S100A13 免疫試劑盒

稻生黃單胞菌*CD8抗體Human SFRP4(Secreted frizzled-related protein 4) ELISA Kit人鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌磷化原癌蛋白CBL2抗體Human CS(CitRate synthase, mitochondrial) ELISA Kit人鈣激活中性蛋白6(CAPN6)免疫試劑盒

釀酒酵母磷化原癌蛋白CBL2抗體Human SFTPB(Pulmonary surfactant-associated protein B) ELISA Kit人鈣激活中性蛋白1(CAPN1)免疫試劑盒

竹針孢座囊菌磷化周期依賴激2抗體Human PLA2G4A(Cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit人鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)免疫試劑盒

局限青霉磷化周期依賴激2抗體Human SFTPC(Pulmonary surfactant-associated protein C) ELISA Kit人鈣調(diào)磷(CaN)免疫試劑盒

新疆纖細(xì)芽孢桿菌分裂周期蛋白25抗體Human NDUFS8(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 8, mitochondrial) ELISA Kit人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)免疫試劑盒

Amycolatopsis磷化分裂周期蛋白25抗體Human PRAP1(Proline-rich acidic protein 1) ELISA Kit人鈣蛋白抑制蛋白(CAST)免疫試劑盒

松杉靈芝磷化分裂周期蛋白25抗體Human SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) ELISA Kit人鈣蛋白抑抗體(ACAST-DⅣ)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化分裂周期蛋白25抗體Human NDUFS7(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 7, mitochondrial) ELISA Kit人鈣蛋白2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)免疫試劑盒

相思根瘤菌半胱蛋白8抗體Human CXCL14(C-X-C motif chemokine 14) ELISA Kit人鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2(CAMK 2)免疫試劑盒

米根霉Rhizopus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%乙氧基白屈菜紅堿

魯氏接合酵母Zygosaccharomyces│rouxii 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品芫花

枝孢Cladosporium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥90% (HPLC)3,′6-二芥子酰基蔗糖
PI3Kγ抑制劑(IPI549)鹿皮色曲霉 BOC-β-氨酸a-羥丁酸脫氫Elisa

膠孢 2--4-(三氟甲基)嘧啶脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa

擬莖點(diǎn)霉 L-氨酰-L-亮氨酸腫瘤壞死因子配體超家族成員11Elisa

米根霉 D-亮氨酰-L-酪氨酸水合物氨甲酰磷酸合成Elisa

槐栓 丁位壬內(nèi)酯骨特異性堿性磷酸Elisa

松針散斑殼 6-羧基熒光氨甲酰磷酸合成1Elisa

菊池鏈格孢 1-三苯甲基咪唑-4-甲頂體Elisa

黑木耳 4-三氟甲硫基苯甲酰二?；视王；D(zhuǎn)移1Elisa

卷曲鏈霉 丹磺酰肼二?；视王；D(zhuǎn)移2Elisa

厚環(huán)粘蓋牛肝 環(huán)戊二烯基雙(三苯基膦)化釕(II)富亮氨酸α2糖蛋白1Elisa

高地芽孢桿 (1,5-己二烯)化銠(I)二聚體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白3Elisa

土曲霉 2-氨基噻唑-5-羧酸乙酯血小板反應(yīng)蛋白;凝血敏感蛋白1Elisa

立枯絲核 N-Boc-N'-三苯甲基-L-組氨酸血小板反應(yīng)蛋白;凝血敏感蛋白Elisa

日本山茶盤孢 3，4，5-Trimethoxybenzhydrazide2,3-雙加氧1Elisa

白酒 鄰苯二甲酸二異丁酯 DIBP、鄰苯二 甲酸二丁酯 DBP、鄰苯二甲酸二（4- 甲基-2-戊基）酯 BMPP、鄰苯二甲酸 二（2-乙氧基）乙酯 DEEP、鄰苯二 甲酸二戊酯 DPP、鄰苯二甲酸二己酯 DHXP、鄰苯二甲酸丁基芐基酯 BBP、 鄰苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯 DBEP、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯 DCHP、 鄰苯二甲酸二（α-乙基）己酯 DEHP、 鄰苯二甲酸二苯酯、鄰苯二甲酸二正 辛酯 DNOP、鄰苯二甲酸二甲酯 DMP、鄰苯二甲酸二乙脂（DEP） 谷氨酸鈉利塞膦酸鹽半五水合物CD206分子Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)