41102ES Lentiviral Packaging Kit
- 公司名稱(chēng) 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào) 41102ES
- 產(chǎn)地
- 廠(chǎng)商性質(zhì) 生產(chǎn)廠(chǎng)家
- 更新時(shí)間 2025/7/16 13:01:05
- 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 879
聯(lián)系方式：曹女士400-6111-883 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
企業(yè)簡(jiǎn)介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動(dòng)，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類(lèi)生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷(xiāo)售的高新技術(shù)企業(yè)，通過(guò)打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑，成為國(guó)內(nèi)少數(shù)同時(shí)覆蓋三大品類(lèi)生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測(cè)領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
主營(yíng)業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢(shì)和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類(lèi)型齊全、種類(lèi)豐富的產(chǎn)品管線(xiàn)。自公司成立以來(lái)，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售的生物試劑超過(guò)3000種，涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類(lèi)的生物試劑，能夠滿(mǎn)足客戶(hù)多種類(lèi)型生物試劑的一體化采購(gòu)需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報(bào)告基因檢測(cè)系列等多個(gè)品類(lèi)的生物試劑，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測(cè)和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽(yù)資質(zhì)
翌圣生物通過(guò)申請(qǐng)商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(xiàng)（其中發(fā)明14項(xiàng)、實(shí)用新型1項(xiàng)、外觀(guān)設(shè)計(jì)3項(xiàng)）和45項(xiàng)與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán)，擁有經(jīng)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊(cè)商標(biāo)權(quán)37項(xiàng)以及4項(xiàng)境外注冊(cè)商標(biāo)，是國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專(zhuān)精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺(tái)
經(jīng)過(guò)多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開(kāi)展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點(diǎn)研究基地的江南大學(xué)展開(kāi)合作，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ)，建立了六大核心技術(shù)平臺(tái)——雙向分子酶理性設(shè)計(jì)與定向進(jìn)化平臺(tái)、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺(tái)、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺(tái)、高通量測(cè)序建庫(kù)試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺(tái)、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺(tái)和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺(tái)，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項(xiàng)核心技術(shù)，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑，覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級(jí)、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營(yíng)的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級(jí)發(fā)酵線(xiàn)、工業(yè)級(jí) AKTA 純化線(xiàn)和全自動(dòng)包裝線(xiàn)。同時(shí)，公司通過(guò)了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉(cāng)儲(chǔ)運(yùn)輸?shù)葘?duì)生產(chǎn)線(xiàn)進(jìn)行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過(guò)程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶(hù)服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時(shí)的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶(hù)和工業(yè)用戶(hù)的認(rèn)可，為檢測(cè)公司、治療公司、工具類(lèi)公司和科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測(cè)序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國(guó)科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶(hù)建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國(guó)際頂級(jí)期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶(hù)創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂(lè)
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動(dòng)產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶(hù)創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂(lè)”的使命，專(zhuān)注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級(jí)，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，為客戶(hù)提供更為的產(chǎn)品與服務(wù)，助力我國(guó)打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時(shí)，翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國(guó)際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場(chǎng)，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。
分子生物學(xué)試劑，細(xì)胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 41102ES |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
翌圣慢病毒包裝試劑盒（Lentiviral Packaging Kit）由優(yōu)化的慢病毒包裝輔助質(zhì)?；旌衔铮↙entiviral Mix）、表達(dá)eGFP蛋白的對(duì)照質(zhì)粒和高效轉(zhuǎn)染試劑（HG TransgeneTM Reagent）組成，可以兼容第二代和第三代的慢病毒包裝質(zhì)粒，且具有慢病毒包裝時(shí)間周期短（一周之內(nèi)即可拿到純化好的高滴度慢病毒）、病毒滴度高的優(yōu)勢(shì)，可應(yīng)用于針對(duì)不同基因和藥物靶標(biāo)的臨床前細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。非常適合于病毒包裝初試者。
產(chǎn)品組分
| 類(lèi)別 | 組分編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 儲(chǔ)存 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||
| 41102ES10（10T） | 41102ES20（20T） | 41102ES40（40T） | ||||
| Part Ⅰ | 41102-A | Lentiviral Mix(1 μg/μL) | -25~-15℃ | 100 μL | 200 μL | 400 μL |
| 41102-C | eGFP 對(duì)照質(zhì)粒（Amp+） | -25~-15℃ | 1.5 μg | 1.5 μg | 1.5 μg | |
| Part Ⅱ | 41102-B | HG TransgeneTM Reagent | 2~8℃ | 0.6 mL | 1.2 mL | 2×1.2 mL |
慢病毒包裝所需其他材料（選用）
1）DMEM：Yeasen
2）FBS：Yeasen
3）Penicillin-Stretomycin：Yeasen
4）HEK 293T/293FT：慢病毒包裝及低度檢測(cè)所用工具細(xì)胞（HEK293T）
5）Antibiotics：Yeasen 用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株篩選，如Puromycin，G418等
6）Competent cells：Yeasen
病毒包裝前的準(zhǔn)備
慢病毒表達(dá)載體：包含病毒包裝，侵染和將病毒重組基因整合到基因組DNA中以便表達(dá)目的基因或者shRNA的基本元件。
DNA溶液的制備：以質(zhì)粒抽提試劑盒提取慢病毒包裝系統(tǒng)中各種質(zhì)粒DNA，質(zhì)粒DNA溶于無(wú)菌的TE或ddH2O中，以紫外光吸收法測(cè)定其濃度及純度，保證所提質(zhì)粒DNA 的A260/A280在1.8～2.0之間。
細(xì)胞狀態(tài)：良好的細(xì)胞狀態(tài)對(duì)病毒的包裝至關(guān)重要，避免細(xì)胞培養(yǎng)基有細(xì)菌、真菌或支原體的污染，盡量使用傳代次數(shù)較少的細(xì)胞，如果細(xì)胞是剛復(fù)蘇的話(huà)，最好傳兩代之后再包裝。
慢病毒包裝
翌圣生物慢病毒載體表達(dá)系統(tǒng)由pGMLV慢病毒載體和Lentiviral Mix質(zhì)粒組成。pGMLV慢載體中含有HIV的基本元件5’LTR和3’LTR以及其他輔助元件，例如WPRE和cPPT/CTS等。翌圣可以根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康尼槍?duì)pGMLV載體改造以進(jìn)行啟動(dòng)子活性研究、基因表達(dá)研究、RNA干擾等研究。Lentiviral Mix能夠表達(dá)病毒包裝需要的各種必需成分如：gag基因，編碼病毒主要的結(jié)構(gòu)蛋白；pol基因，編碼病毒特異性的酶；rev基因，編碼調(diào)節(jié)gag和pol基因表達(dá)的調(diào)節(jié)因子；還含有單純皰疹病毒來(lái)源的VSV-G基因，提供病毒包裝所需要的包膜蛋白，可以兼容第二代和第三代的慢病毒包裝質(zhì)粒。
使用流程
制備編碼慢病毒顆粒的重組病毒質(zhì)粒及其輔助包裝原件載體質(zhì)粒，重組質(zhì)粒載體和輔助質(zhì)粒載體分別進(jìn)行高純度無(wú)內(nèi)毒素抽提，使用HG TransgeneTM Reagent進(jìn)行共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后18 h 更換為完quan培養(yǎng)基，培養(yǎng)48 h后，收集富含慢病毒顆粒的細(xì)胞上清液，對(duì)其濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液，在293T細(xì)胞中測(cè)定病毒滴度。在一定滴度范圍內(nèi)的慢病毒顆粒可以滿(mǎn)足大部分體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)需求。
1）293T細(xì)胞分盤(pán)：轉(zhuǎn)染前一天，將已經(jīng)長(zhǎng)好的細(xì)胞以合適比例傳代到10 cm培養(yǎng)皿中，當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到~80%時(shí)準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染。
2）轉(zhuǎn)染前換液：轉(zhuǎn)染前1~2 h 將需要轉(zhuǎn)染的細(xì)胞換新鮮的培養(yǎng)基，12 mL/10 cm皿。注意：293T細(xì)胞貼壁性不是很好，換液時(shí)應(yīng)小心滴加盡量避免沖起細(xì)胞。
3）轉(zhuǎn)染：取無(wú)菌的1.5 mL EP管或15 mL離心管，按下列組分配制反應(yīng)體系：
| 無(wú)血清DMEM | 1 mL |
| DNA | 10 μg |
| Lentiviral Mix | 10 μL(10 μg) |
| HG TransgeneTM Reagent | 60 μL |
混勻后，室溫放置18 min~20 min后，均勻滴加到提前換過(guò)液的培養(yǎng)皿中，后置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）換液：轉(zhuǎn)染18~20 h后，小心吸掉細(xì)胞培養(yǎng)液棄于盛有消毒液的廢液杯中（注意：此時(shí)培養(yǎng)基中已含有少量的病毒，必須經(jīng)處理后才能丟棄，所用的移液槍頭等必須經(jīng)消毒液浸泡處理后才能丟棄），然后加15 mL新鮮的培養(yǎng)基（也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求換為無(wú)血清的DMEM）繼續(xù)培養(yǎng)。
5）病毒收集：換液48 h后，吸取細(xì)胞上清液于50 mL離心管，4℃，500 g離心5 min，上清液用0.45 μm濾器過(guò)濾后轉(zhuǎn)移到新的離心管中。此時(shí)上清液中的病毒顆?？梢灾苯尤z測(cè)滴度或者感染目的細(xì)胞，如果對(duì)病毒的滴度及純度有較高要求，可對(duì)上清液進(jìn)行濃縮與純化。
6）病毒分裝與保存：將病毒以40~50 μL分裝，后保存于-80℃。
冰袋運(yùn)輸。HG TransgeneTM Reagent（41102-B）2~8 ℃保存，其余組分（41102-A、41102-C）均于-25~-15℃保存，有效期1年半。
Q:慢病毒包裝試劑盒中是否含有 pGMLV 慢病毒載體？穩(wěn)轉(zhuǎn)怎么篩選？還需要再額外購(gòu)買(mǎi)其他質(zhì)粒嗎？
A: 含有該載體；穩(wěn)轉(zhuǎn)篩選所用為Puromycin，G418；后期分選為熒光篩選；只需要客戶(hù)另外準(zhǔn)備目的質(zhì)粒。
Q: 慢病毒包裝試劑盒中 pGMLV 慢病毒載體，有質(zhì)粒（陽(yáng)性對(duì)照）序列嗎？
A: 慢病毒包裝，一般用三質(zhì)粒或者四質(zhì)粒系統(tǒng)，分別構(gòu)建病毒的不同組件，我們的慢病毒包裝試劑盒，提供陽(yáng)性對(duì)照的質(zhì)粒，但是：
（1）質(zhì)粒序列都不提供；
（2）質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)不能提供。
Q: 為什么容易個(gè)試劑盒包裝的病毒感染成功了，有的卻感染不成功？
A:
①質(zhì)粒構(gòu)建有問(wèn)題，如果不是同一個(gè)質(zhì)粒，可以質(zhì)粒測(cè)序確定質(zhì)粒是否正確，是否有移碼或者脫靶問(wèn)題；
②如果質(zhì)粒沒(méi)問(wèn)題，可能是慢病毒載體不正確導(dǎo)致病毒包裝不成功，我們?cè)噭┖惺羌嫒荻穆《据d體；
③如果以上兩種都沒(méi)問(wèn)題，可能是感染的細(xì)胞是懸浮細(xì)胞或者是貼壁不牢的細(xì)胞，可以使用聚凝胺增加病毒感染率或者是使用腺病毒包裝。
Q: 轉(zhuǎn)染試劑放-20了，還可以再用嗎？
A: 不建議用了，轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)體的，不能冰凍。
Q: 慢病毒包裝試劑盒中陽(yáng)性對(duì)照：eGFP 對(duì)照質(zhì)粒（Amp+）的推薦引物序列是什么？
A: GFP-qF:TGTTCACCGAGTACCCCCAG；GFP-qR:CGCCGTAGAACTTGGACTCG。
[1] Bai D, Du J, Bu X, et al. ALDOA maintains NLRP3 inflammasome activation by controlling AMPK activation. Autophagy. 2022;18(7):1673-1693. doi:10.1080/15548627.2021.1997051(IF:16.016)
[2] Hu P, Li H, Sun W, et al. Cholesterol-associated lysosomal disorder triggers cell death of hematological malignancy: Dynamic analysis on cytotoxic effects of LW-218. Acta Pharm Sin B. 2021;11(10):3178-3192. doi:10.1016/j.apsb.2021.02.004(IF:11.614)
[3] Xu C, Wu J, Wu Y, et al. TNF-α-dependent neuronal necroptosis regulated in Alzheimer's disease by coordination of RIPK1-p62 complex with autophagic UVRAG. Theranostics. 2021;11(19):9452-9469. Published 2021 Sep 13. doi:10.7150/thno.62376(IF:11.556)
[4] Hu P, Wang J, Qing Y, et al. FV-429 induces autophagy blockage and lysosome-dependent cell death of T-cell malignancies via lysosomal dysregulation. Cell Death Dis. 2021;12(1):80. Published 2021 Jan 13. doi:10.1038/s41419-021-03394-4(IF:8.469)
[5] Qing Y, Li H, Zhao Y, et al. One-Two Punch Therapy for the Treatment of T-Cell Malignancies Involving p53-Dependent Cellular Senescence. Oxid Med Cell Longev. 2021;2021:5529518. Published 2021 Sep 21. doi:10.1155/2021/5529518(IF:6.543)
[6] Cao B, Deng H, Cui H, et al. Knockdown of PGM1 enhances anticancer effects of orlistat in gastric cancer under glucose deprivation. Cancer Cell Int. 2021;21(1):481. Published 2021 Sep 10. doi:10.1186/s12935-021-02193-3(IF:5.722)
[7] Qing Y, Wang X, Wang H, et al. Pharmacologic targeting of the P-TEFb complex as a therapeutic strategy for chronic myeloid leukemia. Cell Commun Signal. 2021;19(1):83. Published 2021 Aug 9. doi:10.1186/s12964-021-00764-5(IF:5.712)
[8] Gao Z, Zhong M, Ye Z, et al. PAK3 promotes the metastasis of hepatocellular carcinoma by regulating EMT process. J Cancer. 2022;13(1):153-161. Published 2022 Jan 1. doi:10.7150/jca.61918(IF:4.207)
采購(gòu)中心
化工儀器網(wǎng)