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pCMV / pCAG-LifeAct質(zhì)粒 現(xiàn)貨
- 公司名稱 世聯(lián)博研（北京）科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2020/2/13 19:33:38
- 訪問(wèn)次數(shù) 580
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| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
pCMV / pCAG-LifeAct質(zhì)粒 現(xiàn)貨
pCMV / pCAG-LifeAct質(zhì)粒 現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域
- 細(xì)胞骨架組織：
-無(wú)毒肌動(dòng)蛋白可視化 -熒光染色 - 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)：
-細(xì)胞過(guò)程中的肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)
- 活細(xì)胞成像 和顯微鏡檢查
技術(shù)特點(diǎn)
- 用于瞬時(shí)和穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染
- *的生物相容性-活體樣品的無(wú)毒染色
技術(shù)指標(biāo)
| 存儲(chǔ) | –20°C |
| TagGFP2（Ex max / Em max） | 483/506納米 |
| TagRFP（Ex max / Em max） | 555/584納米 |
| 表達(dá)載體 | 哺乳動(dòng)物 |
| 發(fā)起人 | CMV或CAG |
| 交貨 | 凍干 |
| 真核生物抗性 | 新霉素（Geneticin，G418） |
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p CMV LifeAct-TagGFP2 轉(zhuǎn)染的原代樹(shù)突小鼠細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白動(dòng)態(tài)的活細(xì)胞成像。
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請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)肌動(dòng)蛋白可視化的更多詳細(xì)信息。
在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南，以PDF格式。
矢量地圖
pCAG-LifeAct-TagGFP2
pCAG-LifeAct-TagRFP
pCMV-LifeAct-TagGFP2
pCMV-LifeAct-TagRFP
實(shí)驗(yàn)示例：攝取疏螺旋體期間人類巨噬細(xì)胞細(xì)胞骨架的重組。
疏螺旋體細(xì)菌是萊姆病的病因，也稱為萊姆疏螺旋體病。為了防止疏螺旋體的散播，已證明必需被巨噬細(xì)胞攝取和消除。該過(guò)程涉及巨噬細(xì)胞骨架，特別是肌動(dòng)蛋白微絲的動(dòng)態(tài)重組。
在該實(shí)驗(yàn)中，使用LifeAct質(zhì)粒來(lái)可視化疏螺旋體吞噬過(guò)程中人巨噬細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重組。
原發(fā)性人類巨噬細(xì)胞對(duì)疏螺旋體的吞噬作用。共聚焦z堆棧的延時(shí)電影，顯示表達(dá)RFP-LifeAct（紅色）的主要人類巨噬細(xì)胞，內(nèi)化了幾個(gè)表達(dá)GFP的螺旋體（綠色）以及富含肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞突起。序列41分鐘 Mirko Himmel博士和Stefan Linder教授，德國(guó)漢堡埃彭多夫大學(xué)的數(shù)據(jù)，
LifeAct：在活細(xì)胞中可視化F-Actin的多功能工具
LifeAct是一種17個(gè)氨基酸的肽，來(lái)源于釀酒酵母的一種蛋白質(zhì)。LifeAct對(duì)活的或固定的真核細(xì)胞和組織中的絲狀肌動(dòng)蛋白（F-actin）結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。
請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)LifeAct的詳細(xì)信息。
當(dāng)需要瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)LifeAct時(shí)，LifeAct-Plasmids可用于多種細(xì)胞類型。在這種情況下，研究人員可以在兩種不同的啟動(dòng)子之間選擇，CMV（巨細(xì)胞病毒）或CAG（修飾的雞β-肌動(dòng)蛋白）。對(duì)于許多標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系，CMV啟動(dòng)子是選擇，因?yàn)樗蓪?dǎo)致LifeAct的強(qiáng)表達(dá)。但是，在處理敏感細(xì)胞（例如神經(jīng)元或胚胎干細(xì)胞）時(shí)，通常建議使用CAG啟動(dòng)子，因?yàn)樗鼪](méi)有病毒來(lái)源，并且不太可能干擾細(xì)胞防御機(jī)制（“沉默機(jī)制”） 。
用pLifeAct轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，使用熒光標(biāo)記TagGFP2或TagRFP **觀察F-肌動(dòng)蛋白。細(xì)胞系的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可對(duì)各種應(yīng)用進(jìn)行長(zhǎng)期的肌動(dòng)蛋白染色。
腺病毒載體可用于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞或需要高達(dá)100％轉(zhuǎn)基因表達(dá)的細(xì)胞。在這種情況下，也可以在上述兩個(gè)啟動(dòng)子之間進(jìn)行選擇。
此外，還提供了不同的穩(wěn)定細(xì)胞系，有助于延長(zhǎng)日常實(shí)驗(yàn)室生活。您可以立即開(kāi)始執(zhí)行實(shí)驗(yàn)，而無(wú)需費(fèi)時(shí)費(fèi)力地生成穩(wěn)定的細(xì)胞系，同時(shí)仍可確保高質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。
方法比較：使用LifeAct在活細(xì)胞中可視化F-Actin
LifeAct-Plasmid | LifeAct-mRNA | LifeAct蛋白 | LifeAct- | LifeAct- | |
| 方法適用于1 | |||||
| 細(xì)胞系 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 原代細(xì)胞 | + | +++ | ++ | +++ | +++ |
| 非哺乳動(dòng)物細(xì)胞 | -- | + | + | -- | -- |
| 轉(zhuǎn)染穩(wěn)定性 | |||||
| 短暫的 | 是 | 是 | 是 | 是 | 沒(méi)有 |
| 穩(wěn)定 | 是 | 沒(méi)有 | 沒(méi)有 | 沒(méi)有 | 是 |
| 協(xié)議與分析 | |||||
| 協(xié)議簡(jiǎn)單 | +++ | ++ | ++ | +++ | +++ |
| LifeAct讀出開(kāi)始 | 1-2天 | 幾個(gè)小時(shí) | 幾分鐘 | 1-2天 | 1-2天 |
| LIFEACT讀出持續(xù)時(shí)間 | 幾天 | 幾天 | 多1天 | 幾天 | 幾天 |
| 信號(hào)強(qiáng)度 | +++ | +++ | + | +++ | +++ |
| 額外好處 | |||||
| 防止過(guò)度表達(dá)的 假象 | -- | + | +++ | + | + |
| 預(yù)防病毒反應(yīng) | +++ | +++ | +++ | -- | -- |
| 轉(zhuǎn)移 方法的生物相容性 | + | +++ | +++ | ++ | ++ |
| 肌動(dòng)蛋白功能 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 安全考慮 | |||||
| 生物安全等級(jí) | BSL1 | -- | -- | BSL2 | BSL2 |
1并非所有這些組合都已在所有指示的細(xì)胞類型中進(jìn)行了測(cè)試。我們鼓勵(lì)您使用此表作為指導(dǎo)，以了解如何地使用LifeAct系統(tǒng)。
注：楊清辰發(fā)布
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